【摘要】：鉤端螺旋體病，簡(jiǎn)稱(chēng)鉤體病，是由致病性鉤端螺旋體感染所致，是一種分 布廣泛的人獸共患病，由于其發(fā)病急、臨床癥狀復(fù)雜多樣且不典型，極易誤診 和漏診，因此，鉤體病的實(shí)驗(yàn)室診斷和預(yù)防對(duì)于控制鉤體病的流行具有重要的 意義。目前應(yīng)用的鉤體滅活疫苗及試用的外膜疫苗雖然具有很好的預(yù)防同型鉤 體感染的效果，但二者都不能有效地預(yù)防多種不同血清型鉤體的感染，而且免 疫持續(xù)時(shí)間短。因此研究編碼鉤體保守性抗原及保護(hù)性抗原的基因，對(duì)于致病 性鉤體的診斷和疫苗研究具有重要的意義。本實(shí)驗(yàn)首次克隆分析并表達(dá)了中國(guó) 鉤體特有血清型56609的四種保守性抗原的編碼基因flaB、ompL1、lipL41和 lipL32；構(gòu)建了3種DNA疫苗pcD－flaB、pcD－ompL1和pcD－lipL41，并進(jìn)行了 在豚鼠、小鼠和仔豬體內(nèi)的免疫保護(hù)性研究，以及豚鼠小鼠體內(nèi)的安全性研究， 對(duì)基于 lipL32基因的 PCR方法用于致病性鉤體的診斷進(jìn)行了探討。結(jié)果(1) 成功克隆了四種基因并表達(dá)了GST－FlaB、GST－LipL32和GST－LipL41；(2)三種 DNA疫苗均具有不同程度的免疫保護(hù)效果，其中pcD-flaB效果最佳，不但具有 較好的預(yù)防同型鉤體感染的作用，還具有交叉保護(hù)作用；(3)pcD-flaB具有 比滅活苗和亞單位疫苗較好的保護(hù)效果；(4)DNA疫苗pcD-flaB不但激活了體 液免疫，而且也激活了Thl應(yīng)答；(5)未檢測(cè)出與宿主染色體DNA發(fā)生整合； (6)基于lipL32基因的比PCR法可以特異性地診斷鉤體。 以上結(jié)果表明DNA疫苗pcD-flaB具有較好的免疫保護(hù)性和安全性，有望用 于鉤體的預(yù)防：基于lipL32基因的PCR方法有望用于致病性鉤體的診斷。
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類(lèi)號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳莊，戴保民，閻和平，李勝富，趙慧業(yè)，劉家福，宋紹忠，楊耀，張?jiān)�，劉富先，屠云人，楊洪斌，黃自英，梁莉，胡利貞，趙慕愚;賴(lài)型鉤體內(nèi)鞭毛基因的擴(kuò)增、克隆、核苷酸序列測(cè)定及其在大腸桿菌中的表達(dá)[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1996年01期

2 游自立,戴保民,陳莊,閻和平,方之茂,李勝富,劉家福;一種鉤端螺旋體DNA疫苗的免疫原性和免疫保護(hù)性研究[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1999年02期

3 時(shí)曼華,邵祝軍,程均福,何劍峰,劉倫光,郭綬衡;1987～1997年中國(guó)鉤端螺旋體病流行態(tài)勢(shì)分析[J];疾病監(jiān)測(cè);1998年12期

4 時(shí)曼華;鉤端螺旋體病研究進(jìn)展與待解決的問(wèn)題[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);1999年04期

5 秦進(jìn)才;中國(guó)鉤端螺旋體參考菌株的建立與應(yīng)用[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;1999年03期

6 時(shí)曼華，屠云人，李慶俊，徐慧棟，于恩庶;我國(guó)鉤端螺旋體病地理分布的研究[J];中華流行病學(xué)雜志;1995年05期

7 李春好,秦進(jìn)才,時(shí)曼華,王岳竹,聶一新;中國(guó)鉤端螺旋體 rRNA 基因酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)分析[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;1997年03期

8 蔣秀高,聶一新,顧莉莉,肖玉春,時(shí)曼華;PCR技術(shù)在鉤端螺旋體病傳染源監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用[J];中國(guó)人獸共患病雜志;2001年01期

9 李巍，應(yīng)英華;鉤端螺旋體組分疫苗研究進(jìn)展[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1996年03期

本文編號(hào)：2794268