【摘要】：目的建立載脂蛋白M（apolipoprotein M, apoM）基因敲除小鼠模型及其基因型鑒定方法。 方法采用常規(guī)同源重組方法建立apoM基因敲除小鼠模型。分別應用堿基淬滅探針技術及聚合酶鏈式反應（Polymerase chain reaction, PCR）-瓊脂糖凝膠電泳技術對子代小鼠基因型進行鑒定。 結果在清潔級飼養(yǎng)條件下，apoM基因敲除的雜合子及純合子小鼠均可以正常生長、繁殖，且在毛色、活動、進食、體溫、體重等一般表型方面與野生型小鼠無明顯差異。堿基淬滅探針技術鑒定結果顯示，野生型小鼠在57.14±0.33C處出現(xiàn)單個熔解谷，敲除型純合子小鼠在51.33±0.11C處出現(xiàn)單個熔解谷，apoM雜合子小鼠則在兩處都出現(xiàn)熔解谷。鑒定結果與PCR-瓊脂糖凝膠電泳技術的鑒定結果一致。 結論成功構建了apoM基因敲除小鼠。堿基淬滅探針技術可以準確、經濟、方便、快速地分型apoM基因敲除小鼠。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R3416
【圖文】：

apoM基因敲除策略圖

圖 1. apoM 基因敲除策略圖注：apoM 基因第 2 外顯子至第 5 外顯子（E2～E5）被 Lox-Neo-LoxP 所替代，達到敲除該基因的目的。

Southern印跡法篩選apoM基因敲除陽性胚胎干細胞的克隆方案圖

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本文編號：2746228