【摘要】：痛經(jīng)是指育齡期女性在月經(jīng)前后及行經(jīng)期間,下腹及腰部痙攣性疼痛,嚴(yán)重時伴有頭痛、惡心、嘔吐、肢冷等癥狀。痛經(jīng)分為原發(fā)性痛經(jīng)和繼發(fā)性痛經(jīng)兩種類型,原發(fā)性痛經(jīng),多在初潮開始后6個月內(nèi)發(fā)生,無明顯生殖系統(tǒng)病變。繼發(fā)性痛經(jīng),由生殖器炎癥、子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位等明確生殖系器質(zhì)性統(tǒng)病變引發(fā)。原發(fā)性痛經(jīng)是目前婦科最常見疾病,嚴(yán)重影響婦女的正常工作和生活質(zhì)量。其發(fā)病因素復(fù)雜,病理改變主要為子宮平滑肌和子宮壁螺旋動脈強(qiáng)烈收縮、缺血和缺氧。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)普遍認(rèn)為痛經(jīng)主要與以下幾方面因素關(guān)系密切。一、前列腺素(prostaglandin,PGs)的改變被認(rèn)為是形成痛經(jīng)的根本機(jī)制。有研究表明,子宮肌細(xì)胞不僅是PGs的靶細(xì)胞,其自身亦可在激素和某些介質(zhì)的特定作用下,產(chǎn)生各種不同的PGs物質(zhì),參與調(diào)節(jié)子宮肌細(xì)胞的收縮和舒張。在PGs家族中,PGE_2是重要的致炎致痛的炎癥介質(zhì),能產(chǎn)生廣泛而持久的血管擴(kuò)張作用和致痛作用,與痛覺過敏有關(guān)。痛經(jīng)患者子宮內(nèi)膜中PGs含量顯著高于正常婦女高。無論是增生期或分泌期的子宮內(nèi)膜都有PGE_2。研究表明,身患痛經(jīng)的女性體內(nèi)PGE_2水平較高。當(dāng)PGE_2的水平升高時疼痛加劇,并且伴發(fā)一系列臨床癥狀:劇烈腹痛、惡心、嘔吐、低血壓、面色蒼白、腹瀉或便秘、昏暈、輕微頭痛、疲勞健忘等。二、痛經(jīng)與月經(jīng)周期中性激素水平變化相關(guān)。黃體中期雌激素高峰促進(jìn)月經(jīng)前期子宮內(nèi)膜PGs生成增加,痛經(jīng)模型大鼠的外周血、子宮中PGs的含量與雌二醇(estrogen 2,E2)濃度密切相關(guān)。三、痛經(jīng)的發(fā)生與β-內(nèi)啡肽(β-EP)密切相關(guān)。β-EP是一類具有嗎啡樣活性的神經(jīng)多肽,具有內(nèi)源性鎮(zhèn)痛作用,參與生殖內(nèi)分泌的調(diào)節(jié),在調(diào)控下丘腦-垂體的功能方面起重要作用。β-EP受性激素制約,孕酮能顯著提高β-EP的分泌,而雌二醇卻抑制孕酮對β-EP的作用。因此,黃體期β-EP水平的降低導(dǎo)致子宮功能活動失常,被認(rèn)為是痛經(jīng)發(fā)生的原因之一。流行病學(xué)研究表明原發(fā)性痛經(jīng)是目前婦科最常見疾病,據(jù)國內(nèi)抽樣調(diào)查表明,我國婦女中痛經(jīng)發(fā)生率為33.1%,其中原發(fā)性者占53.2%,痛經(jīng)嚴(yán)重影響工作者占13.55%。加拿大的學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)60%的婦女有中到重度原發(fā)性痛經(jīng),其中51%的痛經(jīng)婦女日常生活受到影響,17%的重度痛經(jīng)患者因痛經(jīng)而不得不缺工或缺課。在馬來西亞,一項(xiàng)針對12-19歲中學(xué)女生的最新流行病學(xué)調(diào)查研究顯示,約有69.4%的被調(diào)查女生經(jīng)歷過原發(fā)性痛經(jīng)。因此,重視痛經(jīng)的治療十分必要。非甾體類抗炎藥(non-steroidal anti-inflammatory drug,NSAIDs)是臨床治療原發(fā)性痛經(jīng)最常用藥物,約有64%～100%患者應(yīng)用此類藥物后主觀癥狀減輕。NSAIDs可通過抑制環(huán)氧化酶-2(Cycloxygenase-2,COX-2)而減少PGs的生物合成,緩解由PGs引起的子宮痙攣性收縮,與其他鎮(zhèn)痙止痛藥聯(lián)合運(yùn)用可增強(qiáng)止痛效果。COX有COX-1和COX-2兩種同功酶,傳統(tǒng)的NSAIDs類藥物對兩種酶的選擇性較差,因而易引起胃腸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等一系列副作用,如甲氯滅酸、芬必得、硫酸撲熱息痛、對乙酰氨基酚、吲哚美辛、消炎痛等,有效率30%～80%,但引起胃腸道和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的副作用較多。20世紀(jì)90年代中、后期,COX-2選擇性抑制劑如美洛昔康、MK966等新一代NSAIDs相繼開發(fā)上市,雖然降低了胃腸道副作用,但由于其價格昂貴及尚存的副作用,影響了其普及應(yīng)用。帕瑞昔布為高選擇性COX-2抑制劑,靜脈注射后可迅速被肝臟羧酸酯酶水解成伐地昔布[4-(5-甲基-3-苯異唑-4-yl)苯磺酰胺],伐地昔布是高選擇性COX-2抑制劑,參與前PGs合成過程,通過特異性抑制COX-2阻斷花生四烯酸合成PGs而發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用。大量臨床研究表明,帕瑞昔布在婦科、骨科、普外科,神經(jīng)外科等多種手術(shù)術(shù)后鎮(zhèn)痛中起到了良好的鎮(zhèn)痛效果,不僅不良反應(yīng)少,而且可以減少阿片類藥物的用量。目前帕瑞昔布的應(yīng)用已不僅限于手術(shù)后疼痛的治療,臨床實(shí)驗(yàn)證明,手術(shù)前超前使用帕瑞昔布可以明顯降低術(shù)后疼痛的VAS評分,提高患者的滿意率,并減少術(shù)后其他麻醉性鎮(zhèn)痛藥的用量。目前國內(nèi)外對原發(fā)性痛經(jīng)的治療研究多與傳統(tǒng)NSAIDs相關(guān),本實(shí)驗(yàn)結(jié)合帕瑞昔布鈉的藥理學(xué)特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn),探索其對原發(fā)性痛經(jīng)可能的作用機(jī)制。在臨床工作中,許多處于黃體末期的原發(fā)性痛經(jīng)患者需要經(jīng)歷手術(shù),因此,提前干預(yù)手術(shù)前期處于黃體末期的原發(fā)性痛經(jīng)患者是否具有現(xiàn)實(shí)意義?本研究采用催產(chǎn)素和苯甲酸雌二醇制作大鼠痛經(jīng)模型,原理是:雌激素可提高子宮肌肉對催產(chǎn)素的敏感性,催產(chǎn)素引起雌性大鼠的子宮肌性收縮,從而產(chǎn)生"痛性痙攣"。大鼠注射催產(chǎn)素后,出現(xiàn)腹部收縮,軀干與后肢伸展,以及臀部與一側(cè)肢體內(nèi)旋的"歪扭"反應(yīng)。催產(chǎn)素所致痛經(jīng)模型具有造模方法簡單、重復(fù)性較好等特點(diǎn),在我國很大一部分的痛經(jīng)研究選用催產(chǎn)素所致痛經(jīng)模型,故本實(shí)驗(yàn)選用之。并通過此模型,研究非甾體類抗炎藥帕瑞昔布鈉對原發(fā)性痛經(jīng)大鼠的作用,并觀察帕瑞昔布鈉對此模型的痛閾、血清炎癥因子、子宮內(nèi)膜、大腦扣帶回、額葉皮質(zhì)等組織COX-2、PGE_2、β-EP的影響,為臨床應(yīng)用帕瑞昔布鈉治療原發(fā)性痛經(jīng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。材料與方法1、實(shí)驗(yàn)動物Wistar雌性未孕大鼠48只,體重180-200克,由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。飼養(yǎng)條件:普通級動物實(shí)驗(yàn)房,大鼠每籠5只,飼養(yǎng)2天后啟用,由專人飼養(yǎng)管理。動物室燈光12小時照明,通風(fēng)和空調(diào)設(shè)備良好,室溫控制在25士 1℃,相對濕度為40-50%。實(shí)驗(yàn)室按常規(guī)定期消毒。2、動物分組及處理因素Wistar大鼠隨機(jī)分成4組,每組12只,分組和處理因素分別為:①C組:空白對照組② M組:原發(fā)性痛經(jīng)模型組③A組:原發(fā)性痛經(jīng)模型+術(shù)前30分鐘帕瑞昔布鈉超前鎮(zhèn)痛組④B組:原發(fā)性痛經(jīng)模型+術(shù)前連續(xù)3天帕瑞昔布鈉超前鎮(zhèn)痛組3、原發(fā)性痛經(jīng)大鼠模型建立參照《常用醫(yī)藥研究動物模型》大鼠原發(fā)性痛經(jīng)模型制作方法建立模型,或取Wistar雌性未孕大鼠,體重180-200g,連續(xù)10天給大鼠皮下注射雌二醇(第1、10兩天皮下給0.5mg/只/日,其余為0.2mg/只/日),再間隔45分鐘后腹腔注入催產(chǎn)素2u/只,觀察30min內(nèi)的扭體反應(yīng)次數(shù)M組:連續(xù)10天給大鼠皮下注射苯甲酸雌二醇(第1、10兩天皮下給0.5mg/只/日,其余為0.2mg/只/日)。A組:連續(xù)10天給大鼠皮下注射苯甲酸雌二醇(第1、10兩天皮下給0.5mg/只/日,其余為0.2mg/只/日),第十一天腹腔注入用催產(chǎn)素2u/只,觀察30min內(nèi)的扭體反應(yīng)次數(shù),并于術(shù)前30分鐘給予帕瑞昔布鈉0.72mg/kg。B組:連續(xù)10天給大鼠皮下注射苯甲酸雌二醇(第1、10兩天皮下給0.5mg/只/日,其余為0.2mg/只/日),第十一天腹腔注入用催產(chǎn)素2u/只,觀察30min內(nèi)的扭體反應(yīng)次數(shù),并于術(shù)前3天給予帕瑞昔布鈉0.72mg/kg。4、大鼠痛閾測定1)采用華東師范大學(xué)科教儀器廠型號為EP601C直流電鉀離子透入痛閾測試儀測定,實(shí)驗(yàn)前先在大鼠測痛部位周圍涂以導(dǎo)電膏,并加以摩擦,使皮膚電阻阻值降低,增加電流在皮膚的滲透性。2)取黑色無關(guān)電極(負(fù)極),按電極的大小裁剪紗布,于飽和氯化鉀溶液浸濕,將此紗布縛在被試的大鼠尾巴根部上部,再將無關(guān)電極隔著紗布裹扎在大鼠左腿上。3)取紅色有效電極(正極),取氯化鉀飽和溶液注入孔內(nèi),使棉花浸濕。4)主試將有效電極的塞有棉花一端放在被試大鼠的測痛部位上。5)被試大鼠出現(xiàn)甩尾反射時,記錄該時電流毫安數(shù),作為痛閾。6)測痛三次,每次間歇5分鐘,取其平均值5、計(jì)算大鼠扭體次數(shù)造模第10天給予苯甲酸雌二醇后,間隔lh,每只大鼠腹腔注射催產(chǎn)素2U/只,大鼠注射催產(chǎn)素后,出現(xiàn)腹部收縮,軀干與后肢伸展以及臀部與一側(cè)肢體內(nèi)旋的"歪扭"反應(yīng),觀察30min內(nèi)各組大鼠的平均扭體次數(shù)。6、盲腸切除術(shù)大鼠實(shí)驗(yàn)前晚禁食12h,正常飲水,次日上午稱重,20%烏拉坦(5 ml/kg)腹腔注射麻醉后,將大鼠仰臥固定于鼠板上,利用保溫?zé)羰勾笫篌w溫控制于(35±1)℃。手術(shù)步驟:大鼠腹部備皮→消毒→鋪無菌手術(shù)巾→無菌條件下沿腹中線切開皮膚、肌肉和腹膜→找到盲腸組織→分離并結(jié)扎盲腸與小腸之間的血管→切除盲腸→分層縫合腹膜、肌肉以及皮膚。7、血漿 E2、TNF-α、IL-1、IL-10、β-EP 濃度測定所有血液樣本離心后留取血漿,液氮-80℃C條件下保存,用于測定血漿中TNF-α、IL-1、IL-10、β-EP含量。試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定樣品中大鼠血漿E2、TNF-α、IL-1、IL-10、β-EP的濃度。分別向預(yù)先包被了大鼠E2、TNF-α、IL-1、IL-10、β-EP單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入E2、TNF-α、IL-1、IL-10、β-EP,溫育;溫育后,分別加入生物素標(biāo)記的抗E2、TNF-α、IL-1、IL-10、β-EP抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,經(jīng)過溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過氧化物的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。待測標(biāo)本濃度越高,標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受抑制,顯色越淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān),而與樣品中待測物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。8、免疫組化方法檢測子宮組織內(nèi)COX-2、PGE_2的表達(dá)(1)脫水與透明(2)浸蠟、包埋、修臘塊(3)脫蠟和水化(4)對組織抗原進(jìn)行相應(yīng)的修復(fù)(5)阻斷內(nèi)源性過氧化物酶(6)每張切片加50ul的非免疫性動物血清,室溫下孵育10分鐘(7)去血清,每張切片加50ul的第一抗體,4℃過夜(8)PBS沖洗3min ×3次,每張切片50ul生物素標(biāo)記的第二抗體,室溫下孵育10分鐘,PBS沖洗3min ×3次(9)每張切片加50ul鏈霉菌抗生物素一過氧化物酶溶液,室溫下孵育10分鐘,PBS沖洗3min ×3次(10)每張切片加100ul新鮮配制的DAB,顯微鏡下觀察3-10分鐘,終止顯色(11)梯度酒精脫水之后,封片,拍照9、Western-blot法檢測扣帶回、前額葉皮質(zhì)組織內(nèi)COX-2、PGE_2、β-EP的定量表達(dá)從低溫冰箱中取出相應(yīng)大鼠的腦組織,每個稱取50mg,剪碎放入研缽里,用液氮研磨碎,將組織裂解液轉(zhuǎn)入EP管內(nèi),提取的腦組織總蛋白。根據(jù)樣品數(shù)量配制BCA工作液。稀釋蛋白樣品,按說明書加標(biāo)準(zhǔn)品及樣品至96孔板中,以A562測定,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。SDS—聚丙烯酸胺凝膠電泳,轉(zhuǎn)膜,將PVDF膜作好記號封閉,4℃C過夜。加一抗與抗原結(jié)合,然后加二抗與一抗的結(jié)合,最后將兩種顯色液A、B液按1:1等體積混合后將其覆蓋在膜表面使其均勻,在暗室中將X光片覆蓋在膜的上面15min,顯影。10、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用完全隨機(jī)分組設(shè)計(jì)資料,大鼠痛閾采用重復(fù)測量數(shù)據(jù)的方差分析,組內(nèi)效應(yīng)比較、組間效應(yīng)比較、交互效應(yīng)比較、多重比較有顯著差異,若方差齊則采用LSD檢驗(yàn);若方差不齊,采用Dunnett T3檢驗(yàn)。其他數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0處理,用One Way ANOVA單因素分析,組間比較有顯著性差異,若方差齊則采用LSD檢驗(yàn);若方差不齊,采用Welch F檢驗(yàn),再采用Dunnett T3檢驗(yàn)。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1、大鼠痛閾Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=1.323,P=0.112);組間效應(yīng)比較:帕瑞昔布鈉對大鼠痛閾影響的差異有顯著差異(F=10.090,P0.01);組內(nèi)因素4個不同水平間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=27.854,P0.01),痛閾與處理因素有交互作用(F=8.277,P0.01)。與C組比較,M組與A組痛閾均降低,差異顯著(P0.01),B組和C組痛閾差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.137);與M組比較,B組痛閾降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002),A組和M組痛閾差異不顯著(P=0.534);與A組比較,B組痛閾降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.011)。2、大鼠扭體次數(shù)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差不齊(F=16.491,P0.01),采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)方法,四組之間差異有顯著性意義(F=38.791,P0.01),帕瑞昔布鈉對原發(fā)性痛經(jīng)大鼠的扭體次數(shù)影響有顯著意義。根據(jù)平均秩次可推斷,空白對照組扭體次數(shù)最少,模型組最多,術(shù)前提前3天使用帕瑞昔布鈉組效果最好,術(shù)前提前30分鐘使用帕瑞昔布鈉組次之。3、大鼠血漿E2水平Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=1.424,P=0.249),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.117,P=0.036)。M組、A組和B組血漿E2濃度均高于C組(P0.05);A組和B組血漿血漿E2濃度與M組比較,差異均不顯著(P=0.858,P=0.892);與A組比較,B組血漿E2濃度差異不顯著(P=0.754)。4、子宮內(nèi)膜COX-2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差不齊(F=9.971,P0.01),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=86.744,P0.01)。M組、A組、B組大鼠子宮內(nèi)膜COX-2表達(dá)均比C組表達(dá)增加,差異顯著(P0.01);A組、B組子宮內(nèi)膜COX-2表達(dá)均較M組降低,差異顯著(P0.05,);與A組比較,B組子宮內(nèi)膜COX-2表達(dá)降低,差異顯著(P0.05)。5、子宮內(nèi)膜PGE_2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差不齊(F=4.268,P=0.01),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=82.519,P0.01)。M組、A組和B組大鼠子宮內(nèi)膜PGE_2表達(dá)均比C組表達(dá)增加,差異顯著(P0.01);與M組比較,A組子宮內(nèi)膜PGE_2表達(dá)降低不顯著(P=0.071),B組表達(dá)顯著降低(P0.01);與A組比較,B組子宮內(nèi)膜PGE_2表達(dá)顯著降低(P0.05)。6、血漿TNF-α濃度Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差不齊(F=8.965,P0.01),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=21.038,P0.01)。M組、A組和B組血漿TNF-α濃度均高于C組,差異顯著(P0.01);與M組比較,B組血漿TNF-α濃度顯著降低(P0.05),A組差異不顯著(P=0.088);與A組比較,B組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.932)。7、血漿IL-1濃度Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差不齊(F=7.601,P0.01),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=29.345,P0.01)。M組、A組和B組血漿IL-1濃度均高于C組,差異顯著(P0.05);A組和B組血漿IL-1濃度均低于M組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與A組比較,B組血漿IL-1濃度降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。8、血漿IL-6濃度Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差不齊(F=3.011,P=0.04),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=14.767,P0.01)。M組、A組和B組血漿IL-6濃度均高于C組,差異顯著(P0.05);A組、B組血漿IL-6濃度均低于M組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.05);與A組比較,B組血漿IL-6濃度差異不顯著(P=0.999)。9、血漿β-EP濃度Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=2.088,P=0.116),組間比較差異不顯著(F=2.711,P=0.056)。M組血漿β-EP濃度低于C組,差異顯著(P0.05),A組和B組與C組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.283,P=0.911);與M組比較,B組血漿β-EP濃度顯著增高(P0.05),A組差異不顯著(P=0.20);與A組比較,B組血漿β-EP濃度差異不顯著(P=0.237)。10、前扣帶回COX-2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=0.202,P=0.892),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=41.486,P0.01)。M組、A組和B組大鼠前扣帶回COX-2表達(dá)高于C組,差異顯著(P0.01);A組和B組前扣帶回COX-2表達(dá)低于M組,差異顯著(P0.05,P0.01);與A組比較,B組前扣帶回COX-2表達(dá)不顯著(P=0.068)。11、海馬COX-2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=0.564,P=0.654),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=195.048,P0.01)。M組、A組和、B組大鼠海馬COX-2表達(dá)高于C組,差異顯著(P0.01);A組、B組海馬COX-2表達(dá)低于M組,差異顯著(P0.05);與A組比較,B組前扣帶回COX-2表達(dá)不顯著(P=0.864)。12、額葉皮質(zhì)COX-2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差不齊(F=2.118,P=0.176),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=50.369,P0.01)。M組、A組和B組大鼠額葉皮質(zhì)COX-2表達(dá)高于C組(P0.01);A組、B組額葉皮質(zhì)COX-2表達(dá)低于M組,差異顯著(P0.05,P0.01);與A組比較,B組額葉皮質(zhì)COX-2表達(dá)降低,差異顯著(P0.05)。13、脊髓COX-2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=3.846,P=0.057),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=37.556,P0.01)。M組、A組和B組大鼠脊髓COX-2表達(dá)高于C組,差異顯著(P0.01);A組、B組脊髓COX-2表達(dá)低于M組,差異顯著(P0.05,P0.01);與A組比較,B組脊髓COX-2表達(dá)降低,差異顯著(P0.05)。14、前扣帶回PGE_2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差不齊(F=4.617,P=0.037),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=90.281,P0.01)。M組、A組和B組大鼠前扣帶回PGE_2表達(dá)均高于C組(P0.01,P0.05);,A組、B組前扣帶回PGE_2表達(dá)均低于M組,差異顯著(P0.05);與A組比較,B組表達(dá)不顯著(P=0.872)。15、海馬PGE_2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=3.45,P=0.072),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=38.274,P0.01)。M組、A組和B組大鼠海馬PGE_2表達(dá)均高于C組(P0.01);A組、B組海馬PGE_2表達(dá)均低于M組,差異顯著(P0.05,P0.01);與A組比較,B組差異不顯著(P=0.06)。16、額葉皮質(zhì)PGE_2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=0.161,P=0.920),組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=218.544,P0.01)。M組、A組和B組大鼠額葉皮質(zhì)PGE_2表達(dá)均高于C組(P0.01);A組、B組額葉皮質(zhì)PGE_2表達(dá)均低于M組,差異顯著(P0.05,P0.01);與A組比較,B組額葉皮質(zhì)PGE_2表達(dá)降低,差異顯著(P0.05)。17、脊髓PGE_2表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=4.456,P=0.04),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=65.719,P0.01)。M組、A組和B組大鼠脊髓PGE_2表達(dá)均高于C組(P0.05);與M組比較,A組脊髓PGE_2表達(dá)差異不顯著(P=0.152),B組脊髓PGE_2表達(dá)降低,差異顯著(P0.05);與A組比較,B組脊髓PGE_2表達(dá)差異不顯著(P=0.219)。18、前扣帶回β-EP表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=2.862,P=0.104),組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=59.638,P0.01)。M組、A組和B組大鼠前扣帶回β-EP表達(dá)低于C組,差異顯著(P0.01,P0.01,P0.05);A組、B組前扣帶回β-EP表達(dá)高于M組,差異顯著(P0.01);與A組比較,B組前扣帶回β-EP表達(dá)顯著增加(P0.05)。19、海馬β-EP表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=3.567,P=0.067),組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=53.121,P0.01)。M組、A組和B組大鼠海馬β-EP表達(dá)低于C組,差異顯著(P0.01,P0.01,P0.05);A組、B組海馬β-EP表達(dá)高于M組,差異顯著(P0.01);與A組比較,B組大鼠海馬β-EP表達(dá)顯著增高(P0.05)。20、額葉皮質(zhì)β-EP表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=2.523,P=0.131),組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=24.707,P0.01)。M組、A組和B組大鼠額葉皮質(zhì)β-EP表達(dá)低于C組,差異顯著(P0.01,P0.01,P0.05);A組、B組額葉皮質(zhì)β-EP表達(dá)顯高于M組,差異顯著(P0.05,P0.01);與A組比較,B組額葉皮質(zhì)β-EP表達(dá)顯著增高(P0.05)。21、脊髓β-EP表達(dá)Levene檢驗(yàn)方差齊性,方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果提示方差齊(F=1.809,P=0.224),組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=23.263,P0.01)。M組、A組和B組大鼠脊髓β-EP表達(dá)低于C組,差異顯著(P0.01,P0.01,P0.05);A組、B組脊髓β-EP表達(dá)高于M組,差異顯著(P0.05,P0.01);與A組比較,B組脊髓β-EP表達(dá)不顯著(P=0.067)。結(jié)論1、制作原發(fā)性痛經(jīng)大鼠模型成功。2、原發(fā)性痛經(jīng)大鼠痛閾下降。3、帕瑞昔布鈉能提高原發(fā)性痛經(jīng)大鼠痛閾。4、帕瑞昔布鈉能顯著降低COX-2和PGE_2在原發(fā)性痛經(jīng)大鼠子宮內(nèi)膜的表達(dá)。5、帕瑞昔布鈉能降低TNF-α、IL-1、IL-6在原發(fā)性痛經(jīng)大鼠外周血液的水平,并增加β-EP在外周血的含量。6、帕瑞昔布鈉能降低COX-2、PGE_2在原發(fā)性痛經(jīng)大鼠腦組織前扣帶回、額葉皮質(zhì)、海馬、脊髓的表達(dá),并增加β-EP在原發(fā)性痛經(jīng)大鼠腦組織前扣帶回、額葉皮質(zhì)、海馬、脊髓的表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R711.51;R-332
【圖文】：

帕瑞昔布軸對原發(fā)性痛經(jīng)大鼠的扭體次數(shù)影響有顯著意義。根據(jù)平均秩次可推逡逑斷，空白對照組扭體次數(shù)最少，模型組最多，術(shù)前提前３天使用帕瑞昔布鋼組逡逑效果最好，術(shù)前提前３０分鐘使用帕瑞昔布鋼組次之。見表１－２，圖１－２。逡逑１９逡逑

比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｆ＝３．１１７，邋Ｐ＝０．０３６）。Ｍ組、Ａ組、Ｂ組血漿Ｅ２濃度均高于逡逑Ｃ組（Ｐ＜０．０５）；邋Ａ組和Ｂ組血漿血漿Ｅ２濃度與Ｍ組比較，差異均不顯著（Ｐ＝０．８５８，逡逑Ｐ＝０．Ｗ２）；與Ａ組比較，Ｂ組血漿Ｅ２濃度差異不顯著（Ｐ＝０．７５４）。見表＾３，圖１－３逡逑表１－３大鼠血漿Ｅ２濃度比較（ｎ＝１２，Ｊ邋±ｓ）逡逑Ｔａｂ．邋１－３邋Ｃｏｍｐａｒｅ邋ｗｉｔｈ邋Ｅ２邋ｌｅｖｅｌ邋ｉｎ邋ｅａｃｈ邋ｇｒｏｕｐ逡逑邐Ｃ邐Ｍ邐Ａ邐Ｂ邐Ｓｕｍ邐Ｆ邋Ｐ逡逑Ｅ２邋濃度邋２５０．４７±１６８．４５９邐４５４．７社２３５．的２＃邐４４０．０化２１９．０７６＃邋４６５．８７±１６９．１７６＃邋４０２．７化２１３．４４４邋３．１１７邐０．０３６逡逑與Ｃ組比較排＜０．０１逡逑２０逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2742798