【摘要】：動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是冠心病和腦卒中發(fā)病的重要病理基礎(chǔ)，心腦血管疾病是當(dāng)前人類(lèi)主要死因之一。對(duì)AS機(jī)制及防治的研究一直是科研及臨床工作的重要課題。 多年的研究表明，AS基本病理?yè)p害是有免疫系統(tǒng)參與的慢性炎癥反應(yīng)。尤其是新近一些基因打靶小鼠的研究結(jié)果為了解免疫機(jī)制參與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病過(guò)程提供了有力的依據(jù)。這些結(jié)果也為探討AS的分子機(jī)制及防治途徑提供了新的思路。AS是一種多基因病，其發(fā)病不但受外部環(huán)境危險(xiǎn)因素的影響，更重要的是有內(nèi)在基因表達(dá)異常。從分子水平上探究AS發(fā)生發(fā)展各環(huán)節(jié)中基因表達(dá)的變化，是目前研究AS發(fā)病機(jī)制和防治途徑的基本思路。 氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)作為AS重要的促發(fā)因素一直倍受關(guān)注。與之相對(duì)應(yīng)的是，大量證據(jù)表明高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)及其主要載脂蛋白ApoA-I具有抗AS作用。本實(shí)驗(yàn)室所建的重組h-apoA-I轉(zhuǎn)基因C_(57)BL／6小鼠系，轉(zhuǎn)入的h-apoA-I可通過(guò)常染色體穩(wěn)定遺傳，并可在多臟器(如：肝、腎、主動(dòng)脈等)高效表達(dá)。已有工作分別從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞水平上證實(shí)這種小鼠是抗高脂及ox-LDL致AS的理想模型。為延續(xù)前述工作，比較原來(lái)對(duì)形成AS敏感的C_(57)BL／6小鼠在轉(zhuǎn)入人apoA-I基因，血漿人ApoA-I水平明顯升高并具有抗動(dòng)脈內(nèi)膜脂質(zhì)沉積和粥樣斑塊形成的條件以后，和vSMC增生相關(guān)基因的變化，本實(shí)驗(yàn)試圖篩選、克隆參與這一過(guò)程的相關(guān)基因，從分子生物學(xué)水平上探討ox-LDL致AS及ApoA-I抗AS的機(jī)制。 本實(shí)驗(yàn)首先用PCR和Northern blot對(duì)用于取材的小鼠進(jìn)行了鑒定，確認(rèn)其有h-apoA-I整合并表達(dá)h-apoA-I mRNA，而后用改良貼塊法原代培養(yǎng)其主動(dòng)脈的平滑肌細(xì)胞，取傳至第五代的vSMC為孵育對(duì)象。同時(shí)，以小鼠vSMC分裂指數(shù)最高為指標(biāo)確定30μg／ml ox-LDL孵育三天為誘導(dǎo)激活條件。對(duì)以上述條件誘導(dǎo)激活的trvSMC用RT-PCR和Northern Blot證實(shí)有h-apoA-I基因表達(dá)的增加，進(jìn)一步確認(rèn)存在抗AS的保護(hù)性背景。而后采用新型減除雜交技術(shù)分離、克隆經(jīng)上述條件誘導(dǎo)和非誘導(dǎo)vSMC
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類(lèi)號(hào)】：R363

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 朱晨林;劉建磊;;X基因缺失的乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)基因鼠中的病毒復(fù)制[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));2003年02期

2 邱永祥,阮明,賈鳳蘭,邱飛嬋,李雪婷,尚蘭琴,張寶旭;秋水仙堿對(duì)小鼠肝臟的損傷作用[J];毒理學(xué)雜志;2005年02期

3 李文龍,程萱,譚曉紅,張繼帥,孫巖松,陳林,楊曉;血管內(nèi)皮細(xì)胞特異表達(dá)Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠的建立(英文)[J];遺傳學(xué)報(bào);2005年09期

4 王勇,劉勤,倪勇,魏泓,孫新民,趙永聚;通過(guò)雙原核顯微注射提高轉(zhuǎn)基因小鼠研制效率的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào);2005年03期

5 時(shí)令,王友亮,程萱,候?qū)?楊曉;表面活性蛋白A啟動(dòng)子指導(dǎo)Cre重組酶在轉(zhuǎn)基因小鼠Ⅱ型肺上皮細(xì)胞中表達(dá)[J];生物技術(shù)通訊;2005年05期

6 何迎春;田道法;盧芳國(guó);毛積芳;;人突變型p53和EB病毒LMP1轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年01期

7 張雪光;陳香美;呂揚(yáng);洪權(quán);田月;師鎖柱;尹忠;蔡廣研;;人TIMP-1轉(zhuǎn)基因小鼠腎組織內(nèi)外源基因功能表型的鑒定[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2006年03期

8 宋敏;唐軍;李達(dá)兵;徐海偉;白云;;PS1/APP雙轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病模型傳代小鼠的基因型鑒定及其組織學(xué)分析[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年14期

9 王芙蓉;姜永生;肖文伍;張?zhí)K明;袁慧;趙浩斌;鄭新民;魏慶信;;人bcl-xL基因在轉(zhuǎn)基因小鼠中的整合和表達(dá)[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年04期

10 曾林;孫巖松;楊曉;王冬平;胡仲明;胡成進(jìn);孫曉明;;流式細(xì)胞術(shù)分析p21~(HBsAg/HBsAg)轉(zhuǎn)基因小鼠肝細(xì)胞凋亡[J];中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志;2006年09期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 田金洲;時(shí)晶;張雷明;尹軍祥;盛樹(shù)力;任映;王蓬文;王蓉;;金思維提取物預(yù)防Aβ42淀粉樣蛋白產(chǎn)生及其機(jī)制研究[A];中醫(yī)藥優(yōu)秀論文選（下）[C];2009年

2 董婉維;鄭志紅;;小鼠睪丸特異基因Fank1基因敲減轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立[A];第八次全國(guó)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議(中華醫(yī)學(xué)會(huì)2009年醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)年會(huì))論文摘要匯編[C];2009年

3 李明明;吳麗穎;張寬;黃欣;熊雷;劉朝暉;朱玲玲;范明;;Luc-ODD轉(zhuǎn)基因小鼠篩選穩(wěn)定HIF-1α藥物及其作用機(jī)制研究[A];“基因、進(jìn)化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國(guó)生理學(xué)會(huì)第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2009年

4 吳麗娟;陳瀟;但剛;龔揚(yáng)彬;曾平;;鋅指蛋白A20突變體轉(zhuǎn)基因小鼠膿毒癥肺損傷研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)成立30周年慶典大會(huì)資料匯編[C];2009年

5 張冬霞;許小媛;季正劍;邢華;;利用GFP轉(zhuǎn)基因小鼠研究外源NSCs在受體腦內(nèi)的存活與分化[A];全國(guó)動(dòng)物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文摘要匯編[C];2010年

6 黃偉;李超;李敖;薛存彪;楊濤;周平;;IκBαAN-Tg(H-2b)轉(zhuǎn)基因小鼠的培育和鑒定[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——遺傳學(xué)進(jìn)步推動(dòng)中國(guó)西部經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展——2011年中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)大會(huì)論文摘要匯編[C];2011年

7 盧宇;于梅;程靜;李洪波;李征月;劉莊;高建剛;袁慧軍;;Smac/Diablo~(S41L)轉(zhuǎn)基因小鼠的建立與鑒定[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——遺傳學(xué)進(jìn)步推動(dòng)中國(guó)西部經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展——2011年中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)大會(huì)論文摘要匯編[C];2011年

8 李明;嚴(yán)阿勇;姚慧;王宇;安曉榮;陳永福;茍克勉;;利用ICSI技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因小鼠[A];中國(guó)生物工程學(xué)會(huì)第四次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2005年

9 鄭振宇;許蘭菊;李春麗;趙衛(wèi)東;宋根娣;柴保國(guó);;人白細(xì)胞介素-10基因在轉(zhuǎn)基因小鼠中遺傳和表達(dá)的穩(wěn)定性研究[A];第六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

10 徐駿;張志愿;陳萬(wàn)濤;楊文君;王鑄鋼;王龍;王延安;;轉(zhuǎn)基因小鼠血管瘤動(dòng)物模型建立[A];2004年口腔頜面腫瘤基礎(chǔ)研究學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議日程及論文集[C];2004年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 ;我國(guó)學(xué)者成功建立一套轉(zhuǎn)基因小鼠系統(tǒng)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

2 張磊;斑塊內(nèi)平滑肌細(xì)胞可能源于骨髓[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

3 于明山;轉(zhuǎn)基因小鼠研制成功為克隆器官提供基礎(chǔ)[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2003年

4 ;血管緊張素Ⅱ和氯沙坦對(duì)大鼠小動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的基質(zhì)金屬蛋白酶2和9表達(dá)的影響[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

5 記者 張巍巍;高脂食品可加劇早老年癡呆癥[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

6 孔琪　張連峰;小動(dòng)物 大作為[N];健康報(bào);2010年

7 衣曉峰邋通訊員 陳英云;缺氧性肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)理被揭示[N];健康報(bào);2007年

8 王艷紅;美科學(xué)家用骨髓成體干細(xì)胞培育出血管[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

9 記者 吳苡婷;夢(mèng)想:讓治療變得簡(jiǎn)單高效[N];上�？萍紙�(bào);2009年

10 新化;大快朵頤不發(fā)胖[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李政;酵母人工染色體（YAC）介導(dǎo)的含HS2定點(diǎn)突變的人β-珠蛋白基因簇在轉(zhuǎn)基因小鼠中的表達(dá)[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1998年

2 朱化星;mRFP1報(bào)告基因表達(dá)及Gal4-UAS二元表達(dá)系統(tǒng)在小鼠中的應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

3 王波;血紅素加氧酶-1活性變化對(duì)腫瘤細(xì)胞體外抗藥性、體內(nèi)生長(zhǎng)影響的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2010年

4 高俊;細(xì)菌人工染色體（BAC）介導(dǎo)的人載脂蛋白apoA-Ⅰ C-Ⅲ A-Ⅳ A-Ⅴ基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2002年

5 馮東曉;細(xì)菌人工染色體（BAC）介導(dǎo)的人α-珠蛋白基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

6 劉慶輝;帶紅系增強(qiáng)子的人βE-珠蛋白基因在轉(zhuǎn)基因小鼠中的表達(dá)[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1992年

7 劉亞梅;疏肝健脾補(bǔ)腎方對(duì)CHB患者、HBV轉(zhuǎn)基因小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2007年

8 韋玉生;BAC介導(dǎo)ApoCⅢ增強(qiáng)子刪除的人載脂蛋白apoAⅠ/CⅢ/AⅣ/AⅤ基因簇突變株轉(zhuǎn)基因鼠系的建立以及其與完整基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠的比較研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

9 范志強(qiáng);蚓激酶基因在山羊乳腺中的表達(dá)及轉(zhuǎn)基因小鼠的制備[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

10 劉光澤;復(fù)制型HBV轉(zhuǎn)基因小鼠的建立、生物學(xué)特性、應(yīng)用及無(wú)免疫耐受研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張鵬;平滑肌細(xì)胞特異性Smad4基因敲除小鼠的建立[D];蘭州大學(xué);2010年

2 李明;利用ICSI技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因小鼠[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

3 李文龍;血管內(nèi)皮細(xì)胞特異表達(dá)Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

4 尚�，�;人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物-1轉(zhuǎn)基因小鼠單側(cè)輸尿管梗阻術(shù)后腎小管間質(zhì)炎癥改變的意義[D];鄭州大學(xué);2005年

5 孫新志;條件性RNAi技術(shù)降低FGFR2的表達(dá)對(duì)小鼠脛骨骨折愈合的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

6 蔡蘭蘭;基于四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)的TRE-C-imp13轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建及表達(dá)分析[D];廈門(mén)大學(xué);2009年

7 鄭逸梅;pBC-rtTA轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立和應(yīng)用[D];揚(yáng)州大學(xué);2006年

8 張艷榮;多巴胺D5受體轉(zhuǎn)基因小鼠的建立及其生理學(xué)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

9 竺淑佳;前腦特異性過(guò)表達(dá)VGLUT1轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建及初步表型分析[D];華東師范大學(xué);2009年

10 方亮;PTA1/CD226轉(zhuǎn)基因小鼠胸腺細(xì)胞的發(fā)育研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

本文編號(hào)：2721593