【摘要】：自然界中存在大量的病原微生物,能夠入侵機體,威脅人類的健康甚至生命,而免疫系統(tǒng)則能發(fā)揮抵御病原體侵襲、清除病原體感染的作用。免疫反應包括天然免疫和適應性免疫,其中天然免疫對于病原的識別依賴的是一類胚系編碼的受體,即病原分子模式識別受體(pattern recognition receptor,PRR)。這類受體可以識別病原體產(chǎn)生的保守的特異性的分子模式,即病原相關分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP)。宿主細胞通過對病原體的識別激活一系列的下游級聯(lián)反應,最終導致Ⅰ型干擾素(type I interferons)、促炎癥細胞因子(proinflammatory cytokines)、趨化因子等的產(chǎn)生從而抑制病原體的復制、抵抗感染并清除病原體。 近些年來,病毒感染所誘導的Ⅰ型干擾素表達過程一直是細胞抗病毒天然免疫研究的重點。細胞依賴Toll樣受體(Toll-like receptor,TLRs)(比如TLR3,TLR7,TLR8, TLR9), RIG-I樣受體(RIG-I-like receptor,RLRs)(比如RIG-I,MDA5)和近年來發(fā)現(xiàn)的DNA受體(如DAI和IFI16)來識別病毒的核酸。其中,細胞質中的病毒核酸被RIG-I以及MDA5識別后會導致RLR的激活,并通過CARD-CARD同型相互作用而與接頭蛋白VISA(也叫MAVS, Cardif或者IPS-1)結合。RIG-I和MDA5與VISA的相互作用會導致RLRs到VISA錨定的內(nèi)膜上重新定位,一邊招募來TRAF2/6活化IKK激酶復合物,從而激活轉錄因子NF-κB；另一邊招募來TRAF3和TBκ1,從而促進IRF3的磷酸化激活�；罨蟮霓D錄因子NF-κB以及IRF3會進入細胞核,共同協(xié)作促進I型干擾素基因的表達。 雖然RIG-I和MDA5在結構和功能上都具有相似性,但是這兩個解旋酶識別的RNA病毒配體有所不同。關于RIG-I介導的抗病毒免疫反應的研究較為廣泛,而目前關于MDA5活性的調控的了解則比較少。因此,我們利用了串聯(lián)親和純化的方法篩選了能與MDA5目互作用的蛋白,來探索MDA5介導的抗病毒反應的機制。在本研究中,我們發(fā)現(xiàn)了RAVER1(ribonucleoprotein,PTB-binding1)是MDA5特異性相互作用蛋白,能直接結合MDA5,并能在病毒刺激下與MDA5發(fā)生內(nèi)源性相互作用。過量表達情況下,低劑量的RAVER1能上調MDA5介導的IFN-β啟動子的激活而對RIG-I無此反應。而下調RAVER1的內(nèi)源性表達則能得到相反的結果：MDA5而非RIG-I介導的IFN-p,ISRE, NF-κB)啟動子的激活均被下調,下游抗病毒基因的表達也被抑制；仙臺病毒刺激誘導的IRF3和IκBα的磷酸化被減弱；poly(I:C)誘導的抗病毒反應被抑制從而上調了水皰性口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV)的復制；新城病毒(Newcastle Disease virus, NDV)復制水平也得到明顯上調。此外,我們利用長鏈poly (I:C)體外結合實驗證明了RAVER1通過促進MDA5與配體的結合來發(fā)揮調控作用。我們的研究證明,RAVER1是MDA5的專屬共激活因子,為揭示RLR介導的抗病毒天然免疫信號通路的差異性調控的機理做出了貢獻。 我們的研究還存在不足之處。既然RAVER1自身無法結合長鏈poly (I:C),那么RAVER1促進MDA5結合長鏈poly(I:C)的方式是什么呢?是通過改變MDA5的構象,還是有其他分子參與這個過程呢?近期,MDA5對雙鏈RNA的識別、結合形成絲狀纖維并激活在結構學研究上有了較大進展,因此在結構學方面RAVER1是如何結合MDA5并發(fā)揮作用的也可以進行更深入的探索；另外,RAVER1基因敲除的小鼠的制備和獲得也許能更深入地驗證其在天然免疫中的功能以及機制。
【學位授予單位】：武漢大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R392.1

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李衛(wèi)中;洪敏;李琦涵;;APOBEC家族:介導天然抗病毒免疫的新型宿主細胞因子[J];病毒學報;2006年01期

2 劉紅;免疫系統(tǒng)的現(xiàn)代概念(下)[J];腎臟病與透析腎移植雜志;2001年02期

3 白志軍,陳政良;天然免疫分子及其進化趨勢[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2003年06期

4 胡巢鳳;胞漿蛋白NOD1和NOD2在天然免疫中的作用[J];中華微生物學和免疫學雜志;2005年02期

5 劉燕明;天然免疫與獲得性免疫的進化關系[J];免疫學雜志;2001年S1期

6 舒紅兵;;抗病毒天然免疫信號轉導關鍵接頭蛋白的發(fā)現(xiàn)[J];科學觀察;2009年05期

7 楊yN;侯煒;;Ⅲ型干擾素——新型抗病毒細胞因子[J];生命科學;2011年08期

8 ;科學出版社新書推介(2009-09)[J];微生物學報;2009年11期

9 張宗梁,姚鑫;Toll受體介導的天然免疫信號傳遞系統(tǒng):從果蠅到人類[J];上海免疫學雜志;1998年06期

10 章曉聯(lián),潘勤;Toll樣受體在免疫學方面的研究進展[J];細胞與分子免疫學雜志;2002年06期

相關會議論文 前10條

1 李鳳琦;魏海明;田志剛;;呼吸道合胞病毒感染中的天然免疫機制研究[A];中國免疫學會第五屆全國代表大會暨學術會議論文摘要[C];2006年

2 金麗華;;果蠅天然免疫相關基因的功能及作用機制[A];中國遺傳學會模式生物與人類健康研討會會議論文集[C];2010年

3 馬小彤;徐玢;董成亞;張芳;林永敏;吳克復;;小鼠β-防御素2和IL-18瘤苗協(xié)同抗白血病作用研究[A];第11次中國實驗血液學會議論文匯編[C];2007年

4 劉文靜;楊麗詩;江世貴;李曉蘭;楊其彬;蘇天鳳;;斑節(jié)對蝦TLR22基因的克隆與表達[A];漁業(yè)科技創(chuàng)新與發(fā)展方式轉變——2011年中國水產(chǎn)學會學術年會論文摘要集[C];2011年

5 牛芳;錢寶華;屠曉華;宋耘;郭品娥;花美仙;王明曄;;γ射線輻照對血液部分天然免疫功能影響的研究[A];中國輸血協(xié)會第三屆輸血大會論文專輯[C];2004年

6 劉玉峰;;天然免疫皮膚科醫(yī)師的認識與貢獻[A];中華醫(yī)學會第十五次全國皮膚性病學術會議論文集[C];2009年

7 周萬青;李芳秋;;一種自發(fā)抗腫瘤小鼠模型的建立及對其抗腫瘤機制的探討[A];中華醫(yī)學會第七次全國檢驗醫(yī)學學術會議資料匯編[C];2008年

8 郭熠潔;趙國琦;;脂多糖刺激對牛單核細胞由來的巨噬細胞Toll樣受體表達的影響[A];中國奶業(yè)協(xié)會年會論文集2009（上冊）[C];2009年

9 晉秀明;;人角膜成纖維細胞TLRs在茄病鐮刀菌滅活菌絲刺激后的表達和功能[A];2007年浙江省眼科學術會議論文集[C];2007年

10 ;大會報告[A];第七屆全國免疫學學術大會論文集[C];2010年

相關重要報紙文章 前10條

1 記者 張冬素;癌癥克星發(fā)現(xiàn)了[N];浙江日報;2010年

2 應慶;天然免疫中TLRs調節(jié)機制[N];中國醫(yī)藥報;2005年

3 本報記者 于莘明;揭制非典別忘了天然免疫[N];科技日報;2003年

4 王淑;腸管具有天然免疫能力[N];大眾科技報;2002年

5 徐錚奎;天然免疫調節(jié)劑研發(fā)進展[N];中國醫(yī)藥報;2004年

6 王懷民邋魯偉;武漢大學在細胞抗病毒天然免疫領域取得重要進展[N];科技日報;2008年

7 記者 蔣明　通訊員 王懷民 魯偉;細胞抗病毒天然免疫研究有新成果[N];健康報;2008年

8 記者蔣明 通訊員王懷民;細胞抗病毒天然免疫研究獲進展[N];健康報;2009年

9 記者 唐先武;我學者發(fā)現(xiàn)微小RNA調控抗細菌感染天然免疫新機制[N];科技日報;2011年

10 田地 編譯;為何有人對疼痛天然免疫[N];大眾科技報;2006年

相關博士學位論文 前10條

1 陳禾;RAVER1調控MDA5介導的天然免疫的分子機制[D];武漢大學;2013年

2 劉新蕾;TRIM38調節(jié)天然免疫的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2010年

3 李婉玉;天然免疫和獲得性免疫等因素在慢性HBV感染中的作用研究[D];吉林大學;2011年

4 毛愛平;cIAP1/2調控IFN-β誘導表達的分子機制[D];武漢大學;2011年

5 燕杰;E3泛素連接酶TRIM4和TRIM21調節(jié)細胞抗病毒天然免疫信號轉導的機制[D];武漢大學;2012年

6 朱梁;NLR家族蛋白對NF-κB及RLR-IFN信號通路負調控機制的研究[D];浙江大學;2011年

7 劉敏;乙型肝炎病毒對肝細胞表達免疫相關分子的影響[D];華中科技大學;2011年

8 謝立蘭;偽狂犬病毒和豬傳染性胃腸炎病毒誘導β干擾素產(chǎn)生的分子機制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2011年

9 林森;紅細胞成分輸血促進消化道腫瘤患者EⅡAF的實驗研究[D];山東大學;2004年

10 陳月;甘露聚糖結合凝集素對抗原提呈細胞分化與功能的調節(jié)作用[D];第一軍醫(yī)大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 于新蕾;乙型肝炎病毒對肝細胞中β-干擾素表達的影響[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

2 吳楠楠;宿主細胞對人類冠狀病毒HCoV-229E天然免疫應答機制的研究[D];華東師范大學;2012年

3 彭少卿;鯉Xbp1基因克隆及其免疫功能的初步研究[D];山東師范大學;2013年

4 白志軍;人MBL在哺乳細胞中表達的研究[D];第一軍醫(yī)大學;2004年

5 陳襄文;人呼吸道上皮細胞天然免疫NODs受體及TLRs受體信號通路初步研究[D];四川大學;2004年

6 張娟;人呼吸道上皮細胞Nod2受體的表達與調控-Nods受體在天然免疫中作用的初探[D];四川大學;2006年

7 張亞婷;手足口病病毒EV71感染與細胞表面受體表達以及胞內(nèi)天然免疫通路的關系[D];蘭州大學;2012年

8 王秋景;胞質內(nèi)DNA識別蛋白在HBV復制中的作用[D];華中科技大學;2012年

9 譚艷;具C1q抑制活性C1q結合十二肽的研究[D];第一軍醫(yī)大學;2004年

10 沈杰;甘露聚糖結合凝集素的分離純化和活性研究[D];浙江大學;2003年

本文編號：2717584