發(fā)布時(shí)間：2020-06-13 02:27

【摘要】：目的：前B細(xì)胞集落增強(qiáng)因子(pre-B cell colony enhancing factor, PBEF)是聯(lián)系炎癥與胰島素抵抗的橋梁,是研究和治療炎癥所致胰島素抵抗的潛在靶點(diǎn)。然而PBEF與胰島素通路是否存在相互作用及其機(jī)制一直存在很大爭(zhēng)議。脂筏作為膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要平臺(tái),在胰島素信號(hào)通路中發(fā)揮著重要作用。本研究首次從一個(gè)全新的角度——脂筏來(lái)探究PBEF與胰島素受體(insulin receptor, IR)及胰島素信號(hào)通路相互作用的機(jī)制,以期揭示炎癥所致的胰島素抵抗的新機(jī)制。 方法：采用去垢劑及非去垢劑法從A549細(xì)胞系中提取脂筏,鑒定PBEF與IRβ在脂筏內(nèi)外的分布。構(gòu)建重組PBEF質(zhì)粒及其突變質(zhì)粒S199,提取PBEF及S199蛋白,研究PBEF對(duì)IRp在脂筏內(nèi)外分布的影響。運(yùn)用免疫共沉淀(immunoprecipitation, IP)研究PBEF、IRβ與Caveolin-1(Cav-1)的相互作用,及其與Cav-1磷酸化的關(guān)系。采用不同時(shí)間點(diǎn)研究PBEF對(duì)胰島素誘導(dǎo)的Akt活化的影響。 結(jié)果：PBEF在脂筏內(nèi)外均有分布,而IRp在非去垢劑法中僅存在于脂筏。PBEF能誘導(dǎo)IRβ從脂筏轉(zhuǎn)移至非脂筏,NAD也具有類(lèi)似作用,但該作用不能完全被S199和FK866阻斷。IRβ、PBEF與Cav-1三者相互結(jié)合。PBEF可導(dǎo)致非脂筏中與IRp結(jié)合的Cav-1磷酸化水平明顯增加。給予胰島素處理5min內(nèi)加入PBEF,Akt的磷酸化水平較胰島素單獨(dú)作用時(shí)降低；而給予胰島素處理5min后再加入PBEF,Akt的磷酸化水平部分恢復(fù)。 結(jié)論： 1、PBEF在脂筏內(nèi)外均有分布。PBEF能誘導(dǎo)IRp從脂筏轉(zhuǎn)移至非脂筏,該作用部分依賴(lài)其N(xiāo)ampt酶活性。 2、IRβ、 PBEF與Cav-1三者相互結(jié)合。PBEF促進(jìn)磷酸化Cav-1與IRp共同移向非脂筏,且該作用與其N(xiāo)ampt酶活性相關(guān)。 3、PBEF能影響胰島素誘導(dǎo)的Akt活化,且該作用具有時(shí)間依賴(lài)性。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 彭倩宜;艾宇航;張麗娜;;前B細(xì)胞集落增強(qiáng)因子在炎癥相關(guān)性疾病中的作用[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2012年04期

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本文編號(hào)：2710492