【摘要】：線粒體作為細(xì)胞能量代謝的核心，其結(jié)構(gòu)和功能的改變與胰島素抵抗的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。然而，線粒體缺陷是胰島素抵抗的原因，結(jié)果，還是其中的一個伴隨過程，目前仍有爭議。事實上，最早的關(guān)于線粒體功能與糖尿病之間相關(guān)性的研究是van den Ouweland JM等于1992年發(fā)現(xiàn)的線粒體DNA突變可導(dǎo)致母系遺傳性糖尿病。目前，關(guān)于二者相關(guān)性的眾多研究更傾向于線粒體功能的缺陷是繼發(fā)于胰島素抵抗而發(fā)生的，而非其始動因素。但是隨著線粒體氧化及磷酸化能力的下降，胰島素抵抗的程度也隨之增加，因此可以推斷線粒體功能的缺陷是加劇胰島素抵抗的原因之一。 線粒體融合蛋白2（mitofusin2, Mfn2）是位于線粒體外膜上的一種跨膜蛋白，它促進(jìn)了線粒體的融合，并且參與了線粒體代謝的調(diào)節(jié)。其表達(dá)具有組織特異性，在骨骼肌、心肌及大腦等高能量代謝組織中高表達(dá)。近期的研究提示Mfn2在葡萄糖穩(wěn)態(tài)的維持中起到了重要的作用，此外，Mfn2表達(dá)的缺陷可能是胰島素抵抗發(fā)生的潛在病理生理機(jī)制之一。研究發(fā)現(xiàn)，在Mfn2/shRNABALB/c小鼠中，早期即出現(xiàn)胰島素抵抗，同時伴有肝葡萄糖生成增加。Sebastian D等發(fā)現(xiàn)Mfn2缺失可引起線粒體功能障礙，活性氧簇（reactive oxygen species, ROS）生成增加，c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase, JNK）活性增強(qiáng)，而胰島素信號通路的關(guān)鍵分子胰島素受體底物1（insulin receptor substrate-1, IRS-1）失活。骨骼肌細(xì)胞中Mfn2功能的獲取增加了葡萄糖氧化率及線粒體膜電位，而線粒體膜電位的增加說明線粒體丙酮酸氧化作用的增強(qiáng)及三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化的增強(qiáng)。最近，有學(xué)者提出在非糖尿病及糖尿病個體中Mfn2表達(dá)與胰島素敏感性之間存在著正相關(guān)關(guān)系。 無論是在健康個體還是在2型糖尿病患者中，骨骼肌對葡萄糖的攝取和利用在全身葡萄糖穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)中都發(fā)揮了重要的作用。葡萄糖的攝取是葡萄糖代謝過程中的主要限速步驟，在骨骼肌中這一過程主要由葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（glucose transporter4, GLUT4）完成。GLUT4是葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白家族(GLUTs)中的一員，主要存在于骨骼肌和脂肪組織中。GLUT4表達(dá)減少或轉(zhuǎn)位障礙直接導(dǎo)致骨骼肌對葡萄糖的攝取障礙，最終導(dǎo)致高血糖。GLUT4的轉(zhuǎn)運主要是通過兩個獨立的信號途徑完成，一為胰島素依賴的信號途徑（PI3K-Akt途徑），另一條為非胰島素依賴的信號途徑（AMPK途徑）。研究發(fā)現(xiàn)全身葡萄糖的攝取與骨骼肌中GLUT4的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系。GLUT4的表達(dá)可通過調(diào)節(jié)GLUT4啟動子區(qū)的肌細(xì)胞增強(qiáng)子2（myocyte enhancer factor2, MEF-2）來實現(xiàn)，其中組蛋白去乙�；�(histone deacetylases, HDACs)、過氧化物酶體增生物激活受體γ共激活因子-1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator1α, PGC-1α）及p38均可通過MEF-2來調(diào)節(jié)GLUT4的表達(dá)。SriwijitkamolA等報道在肥胖的胰島素抵抗大鼠中存在不同程度的AMPK-PGC-1α信號通路的異常，并且認(rèn)為AMPK可能是通過PGC-1α誘導(dǎo)GLUT4蛋白表達(dá)。隨后Leick L等證實了這一觀點，研究發(fā)現(xiàn)AICAR干預(yù)（AMPK激動劑）可誘導(dǎo)野生型小鼠GLUT4蛋白表達(dá)增加，而在PGC-1α敲除小鼠中無此改變，進(jìn)一步肯定了AMPK-PGC-1α途徑在調(diào)節(jié)GLUT4表達(dá)中的重要作用。 最近在一項關(guān)于糖尿病減肥手術(shù)的臨床研究中發(fā)現(xiàn)，6名病態(tài)肥胖女性患者通過手術(shù)成功減重之后Mfn2mRNA表達(dá)水平升高，同時伴有GLUT4mRNA表達(dá)上調(diào)及全身葡萄糖的攝取增加，并且Mfn2mRNA與GLUT4mRNA表達(dá)存在正相關(guān)關(guān)系。然而Mfn2在葡萄糖攝取方面的更深入的研究目前尚未見報道。我們前期的研究發(fā)現(xiàn)，高脂飲食喂養(yǎng)所致胰島素抵抗的大鼠模型中骨骼肌Mfn2及GLUT4表達(dá)減低。國外亦有報道，在肥胖和2型糖尿病患者骨骼肌中同樣存在Mfn2及GLUT4的表達(dá)減低，且兩者之間存在正相關(guān)關(guān)系。 那么在整體動物模型中，Mfn2過表達(dá)能否抗衡病理條件，改善大鼠胰島素抵抗呢？本研究通過高脂飲食構(gòu)建大鼠胰島素抵抗模型，觀察Mfn2腺病毒干預(yù)后對大鼠胰島素敏感性的變化及對骨骼肌GLUT4表達(dá)及轉(zhuǎn)運的影響；通過腺病毒轉(zhuǎn)染L6肌細(xì)胞，在細(xì)胞實驗中進(jìn)一步驗證Mfn2對GLUT4表達(dá)及轉(zhuǎn)運的影響，進(jìn)一步探討Mfn2影響GLUT4表達(dá)及轉(zhuǎn)運的具體機(jī)制。本實驗內(nèi)容主要包括以下三部分： 第一部分Mfn2對高脂飲食誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠骨骼肌GLUT4表達(dá)及轉(zhuǎn)運的影響 目的：Mfn2過表達(dá)對高脂飲食誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠胰島素敏感性及骨骼肌GLUT4表達(dá)及轉(zhuǎn)運的影響 方法：40只雄性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為4組，正常對照組(NC, n=10)、高脂飲食組(HF, n=10)、高脂+空病毒組(HF+Ado, n=10)、高脂+Mfn2腺病毒組(HF+AdMfn2, n=10)，NC組給予普通飼料喂養(yǎng)，HF組、 HF+Ado組及HF+組給予高脂飼料喂養(yǎng)8周，實驗第8周末應(yīng)用清醒狀態(tài)下高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗評價各組大鼠胰島素抵抗程度。實驗第9周開始，NC組、HF組、HF+Ado組及HF+AdMfn2組分別接受0.1ml生理鹽水、生理鹽水、Ado、AdMfn2經(jīng)尾靜脈注射，每周1次，共3周。病毒濃度為1×1010pfu/ml。實驗第11周末再次行高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗評價各組大鼠胰島素抵抗程度。實驗結(jié)束前取血用于生化指標(biāo)的測定，之后處死各組大鼠，留取骨骼肌組織標(biāo)本于-80°C低溫冰箱保存。實時熒光定量PCR（Real-time PCR）方法檢測骨骼肌Mfn2及GLUT4mRNA的表達(dá)。Western blot方法檢測骨骼肌Mfn2、胰島素受體β（IRβ）、磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、腺苷酸活化蛋白激酶α（AMPKα）、p-AMPKα及GLUT4蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：1、大鼠空腹血糖、血清胰島素及游離脂肪酸的比較：高脂飲食干預(yù)11周后，大鼠空腹血葡萄糖、胰島素及游離脂肪酸水平HF組、HF+Ado組明顯高于NC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；HF+AdMfn2組與NC組相比無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。HF+Ado組與HF組相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），HF+AdMfn2組明顯低于HF組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。2、大鼠葡萄糖輸注率（GIR）的比較：高脂飲食喂養(yǎng)11周后，葡萄糖輸注率（GIR）HF組明顯低于NC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2干預(yù)后GIR明顯增加，HF+AdMfn2組較HF組增加了67%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），而HF+Ado組較HF組相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。3、Mfn2mRNA和蛋白表達(dá)變化的比較：高脂飲食喂養(yǎng)11周后，HF組Mfn2mRNA和蛋白水平表達(dá)明顯下降，分別為NC組的51%和44%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2干預(yù)后，HF+AdMfn2組Mfn2mRNA和蛋白水平分別為HF組的3.4和3.3倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），而HF+Ado組較HF組相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。4、GLUT4mRNA和蛋白表達(dá)變化的比較：高脂飲食喂養(yǎng)11周后，HF組GLUT4mRNA和蛋白水平表達(dá)明顯下降，分別為NC組的56%和66%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2干預(yù)后，HF+AdMfn2組GLUT4mRNA和蛋白水平分別為HF組的1.49和1.31倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），而HF+Ado組較HF組相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。5、AdMfn2干預(yù)對GLUT4轉(zhuǎn)位的影響：與NC組相比，HF組骨骼肌組織中膜蛋白與總蛋白比值（PM/T）明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；與HF組相比，AdMfn2干預(yù)后HF+AdMfn2組PM/T比值為HF組的1.87倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；而這一比值在HF+Ado組和HF組中無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。6、AdMfn2誘導(dǎo)GLUT4轉(zhuǎn)位過程中Akt及AMPK信號通路蛋白表達(dá)的變化：與NC組相比，HF組IRβ、PI-3K、p-Akt和Akt蛋白表達(dá)水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；而在HF組、HF+Ado組和HF+AdMfn2組中上述指標(biāo)無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。與NC組相比，HF組p-AMPKα蛋白表達(dá)水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；HF+Ado組與HF組相比無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2顯著增加了AMPKα的磷酸化水平，HF+AdMfn2組p-AMPKα蛋白表達(dá)水平為HF組的2.76倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），但總的AMPKα蛋白表達(dá)水平各組間無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論：1、高脂飲食使大鼠空腹血糖、胰島素及游離脂肪酸水平升高，葡萄糖輸注率下降，導(dǎo)致胰島素抵抗，Mfn2過表達(dá)可改善高脂飲食誘導(dǎo)的大鼠胰島素抵抗。2、高脂飲食可使大鼠骨骼肌Mfn2表達(dá)下降，Mfn2過表達(dá)可使骨骼肌Mfn2表達(dá)上調(diào)。3、高脂飲食可使大鼠骨骼肌GLUT4的表達(dá)及轉(zhuǎn)位減少，Mfn2過表達(dá)可使骨骼肌GLUT4的表達(dá)及轉(zhuǎn)位上調(diào)。4、Mfn2過表達(dá)在增加GLUT4轉(zhuǎn)位的同時，伴有AMPK磷酸化水平增加，而Akt磷酸化水平無明顯變化。Mfn2過表達(dá)可能通過AMPK磷酸化增加的方式增加了GLUT4的轉(zhuǎn)位，從而改善了胰島素敏感性。 第二部分Mfn2對L6肌細(xì)胞GLUT4表達(dá)的影響 目的：通過腺病毒轉(zhuǎn)染siMfn2及AdMfn2干預(yù)L6肌細(xì)胞，觀察L6肌細(xì)胞GLUT4蛋白的表達(dá)情況，明確Mfn2表達(dá)對GLUT4蛋白表達(dá)的影響。 方法：將L6細(xì)胞接種于含10%FBS、100U/ml青霉素、100ug/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中，37℃、5%CO2飽和培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)，每2-3天傳代一次，待細(xì)胞進(jìn)入對數(shù)生長期后將含10%FBS的培養(yǎng)基換成含2%FBS的培養(yǎng)基誘導(dǎo)細(xì)胞分化，共7天。分后成功后，實驗分為四組：①正常對照組(NC group)②正常+空病毒組(Ado group)③正常+小干擾RNA病毒組(siMfn2group)④正常+Mfn2腺病毒組(AdMfn2group)。L6肌細(xì)胞分化成功后，換用含0.5%FBS的DMEM培養(yǎng)基，以100pfu/cell (100MOI)的濃度分別加入Ado、siMfn2或AdMfn2轉(zhuǎn)染孵育24h，實驗結(jié)束前加入胰島素（終濃度為100nM）孵育10min，收集細(xì)胞用于實驗。應(yīng)用Western blot方法檢測L6肌細(xì)胞Mfn2、AMPKα、p-AMPKα、PGC-1α及GLUT4蛋白的表達(dá)。 結(jié)果:1、siMfn2及AdMfn2干預(yù)對Mfn2蛋白表達(dá)影響的比較:siMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞Mfn2蛋白水平明顯下降，siMfn2組約為NC組的13.9%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞Mfn2蛋白表達(dá)水平明顯增加，AdMfn2組約為NC組的2.61倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。為排除病毒轉(zhuǎn)染對細(xì)胞的影響，，以空病毒作為對照，Ado組與NC組相比無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2組Mfn2蛋白表達(dá)水平較siMfn2組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。2、siMfn2及AdMfn2干預(yù)對p-AMPKα及AMPK蛋白表達(dá)影響的比較:siMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞p-AMPKα蛋白水平明顯下降，siMfn2組約為NC組的61.1%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞p-AMPKα蛋白表達(dá)水平明顯增加，AdMfn2組約為NC組的1.49倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。Ado組與NC組相比無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2組p-AMPKα蛋白水平較siMfn2組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。各組間AMPKα蛋白表達(dá)無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。3、siMfn2及AdMfn2干預(yù)對PGC-1α蛋白表達(dá)影響的比較:siMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞PGC-1α蛋白水平明顯下降，siMfn2組約為NC組的32.4%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞PGC-1α蛋白表達(dá)水平明顯增加，AdMfn2組約為NC組的1.95倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。Ado組與NC組相比無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2組PGC-1α蛋白水平較siMfn2組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。4、siMfn2及AdMfn2干預(yù)對GLUT4蛋白表達(dá)影響的比較:siMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞GLUT4蛋白水平明顯下降，siMfn2組約為NC組的54.5%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞GLUT4蛋白表達(dá)水平明顯增加，AdMfn2組約為NC組的1.62倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。Ado組與NC組相比無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2組GLUT4蛋白水平較siMfn2組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論：在L6肌細(xì)胞中，上調(diào)Mfn2表達(dá)可使AMPK磷酸化水平增加，PGC-1α蛋白表達(dá)增加，GLUT4蛋白表達(dá)增加；下調(diào)Mfn2表達(dá)后，隨著Mfn2表達(dá)的下降，p-AMPK、PGC-1α及GLUT4的表達(dá)均隨之出現(xiàn)下調(diào)。 第三部分AMPK在Mfn2誘導(dǎo)的GLUT4表達(dá)及轉(zhuǎn)位中的作用 目的：通過AdMfn2腺病毒轉(zhuǎn)染干預(yù)L6肌細(xì)胞，并加入compound C（AMPK抑制劑），觀察L6肌細(xì)胞中GLUT4表達(dá)及轉(zhuǎn)位的變化，明確AMPK對GLUT4蛋白表達(dá)及轉(zhuǎn)位的影響。 方法：將L6細(xì)胞接種于含10%FBS、100U/ml青霉素、100ug/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基中，37℃、5%CO2飽和培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)，每2-3天傳代一次，待細(xì)胞進(jìn)入對數(shù)生長期后將含10%FBS的培養(yǎng)基換成含2%FBS的培養(yǎng)基誘導(dǎo)細(xì)胞分化，共7天。實驗分為四組：①正常對照組(NC group)②正常+Mfn2腺病毒組(AdMfn2group)③正常+compound C組(CC group)④Mfn2腺病毒+compound C組(AdMfn2+CC group)。L6肌細(xì)胞分化成功后，加入compound C10uM孵育30min,然后以100pfu/cell(100MOI)的濃度加入AdMfn2轉(zhuǎn)染孵育24h，實驗結(jié)束前加入胰島素（終濃度為100nM）孵育10min，收集細(xì)胞用于實驗。應(yīng)用Western blot方法檢測L6肌細(xì)胞Mfn2、AMPKα、p-AMPKα、Akt、p-Akt、PGC-1α及GLUT4蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：1、AdMfn2及compound C干預(yù)對Mfn2蛋白表達(dá)影響的比較：AdMfn2干預(yù)24小時后，L6肌細(xì)胞Mfn2蛋白表達(dá)水平明顯增加，AdMfn2組約為NC組的3.0倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。CC組較NC組略有降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。compound C和AdMfn2共同干預(yù)后，AdMfn2+CC組較NC組相比Mfn2蛋白表達(dá)明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；但較AdMfn2組相比降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。2、AdMfn2及compound C干預(yù)對p-AMPKα及AMPK蛋白表達(dá)影響的比較：AdMfn2干預(yù)24小時后，AdMfn2組較NC組相比p-AMPKα蛋白表達(dá)明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。compound C單獨干預(yù)及compound C加AdMfn2共同干預(yù)后，CC組和AdMfn2+CC組p-AMPKα蛋白表達(dá)水平較NC組降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；同樣低于AdMfn2組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。而AdMfn2+CC組與CC組相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。各組間AMPKα蛋白表達(dá)無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。3、AdMfn2及Compound C干預(yù)對p-Akt及Akt蛋白表達(dá)影響的比較：各組間p-Akt及Akt蛋白表達(dá)均無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。4、AdMfn2及Compound C干預(yù)對GLUT4轉(zhuǎn)位影響的比較：AdMfn2干預(yù)24小時后，AdMfn2組較NC組相比GLUT4膜蛋白的表達(dá)水平明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。compound C單獨干預(yù)及compound C加AdMfn2共同干預(yù)后，CC組和AdMfn2+CC組GLUT4膜蛋白表達(dá)水平較NC組降低，并且也低于AdMfn2組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。而AdMfn2+CC組與CC組相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。AdMfn2干預(yù)24小時后，AdMfn2組較NC組相比GLUT4總蛋白的表達(dá)水平明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。compound C單獨干預(yù)及compound C加AdMfn2共同干預(yù)后，CC組和AdMfn2+CC組GLUT4總蛋白表達(dá)較NC組降低，并且也低于AdMfn2組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。而AdMfn2+CC組與CC組相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。GLUT4膜蛋白與總蛋白的比值各組間無明顯差異，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。5、AdMfn2及compound C干預(yù)對PGC-1α蛋白表達(dá)影響的比較：AdMfn2干預(yù)24小時后，AdMfn2組較NC組相比PGC-1α蛋白表達(dá)明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。compound C單獨干預(yù)及compound C加AdMfn2共同干預(yù)后，CC組和AdMfn2+CC組PGC-1α蛋白表達(dá)水平較NC組降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；同樣低于AdMfn2組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。而AdMfn2+CC組與CC組相比無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論：1.AdMfn2腺病毒轉(zhuǎn)染L6肌細(xì)胞可上調(diào)細(xì)胞Mfn2表達(dá)，加入AMPK抑制劑compound C干預(yù)后，Mfn2表達(dá)略有下降。2. Mfn2可增加AMPK磷酸化水平，應(yīng)用AMPK抑制劑compound C干預(yù)后，此作用消失。3. Mfn2及compound C均不影響Akt的磷酸化水平。4. Mfn2可上調(diào)GLUT4蛋白的表達(dá)，并且是通過AMPK-PGC-1α途徑實現(xiàn)的。5. Mfn2對GLUT4的轉(zhuǎn)位不依賴于AMPK。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R363

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張蓉;朱榕峰;徐俊;周麗斌;張迪;楊鍵;楊穎;陳名道;;大黃素改善脂多糖引起的胰島素抵抗機(jī)制研究[J];上海中醫(yī)藥雜志;2010年08期

2 高宇;宋光耀;;骨骼肌脂肪酸轉(zhuǎn)位酶FAT/CD36與胰島素抵抗[J];中國老年學(xué)雜志;2008年14期

3 姜兆順;趙建芹;劉元濤;;脂肪因子與骨骼肌胰島素抵抗研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2010年17期

4 潘作東;盧雁;何冰;張詠言;韓萍;;大鼠游離脂肪酸的異常蓄積導(dǎo)致骨骼肌胰島素抵抗機(jī)制的研究[J];中國老年學(xué)雜志;2008年10期

5 侯士方;孟馨;相泓冰;王滌非;;胰島素抵抗骨骼肌細(xì)胞中P-Ser473PKB及糖原合成酶-3表達(dá)[J];山西醫(yī)藥雜志;2011年01期

6 侯士方;孟馨;相泓冰;王滌非;;蛋白激酶C對胰島素抵抗骨骼肌細(xì)胞的影響[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2011年03期

7 畢會民,歐陽靜萍,鄧向群,陳小琳,張妍,宋春宇;胰島素抵抗大鼠骨骼肌中蛋白激酶B表達(dá)及葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4轉(zhuǎn)位的改變[J];中華糖尿病雜志;2005年04期

8 王滌非;蔡冬梅;蔣麗娟;張錦;;老年胰島素抵抗小鼠骨骼肌細(xì)胞磷脂酰肌醇-3激酶的表達(dá)[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2006年10期

9 李春艷;;氧化應(yīng)激、骨骼肌胰島素抵抗與抗氧化劑干預(yù)[J];生命的化學(xué);2009年06期

10 付正香;牛文彥;;飽和脂肪酸對骨骼肌細(xì)胞胰島素作用的影響及其機(jī)制研究[J];天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2010年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 臧麗;;LRP16基因?qū)2-C12骨骼肌細(xì)胞胰島素抵抗的影響及機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

2 郝麗萍;曲巍;趙立娜;孫秀發(fā);;酒精對原代培養(yǎng)大鼠骨骼肌細(xì)胞葡萄糖攝取及胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的影響[A];第四屆第二次中國毒理學(xué)會食品毒理學(xué)專業(yè)委員會與營養(yǎng)食品所毒理室聯(lián)合召開學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

3 胡瑞萍;吳毅;胡永善;吳軍發(fā);;運動促進(jìn)2型糖尿病大鼠骨骼肌細(xì)胞攝取葡萄糖的細(xì)胞內(nèi)機(jī)制研究[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會運動療法分會第十一屆全國康復(fù)學(xué)術(shù)大會學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2011年

4 湯孫寅焱;畢艷;孫婧;梁華;朱大龍;翁建平;;在L-6骨骼肌細(xì)胞中SREBP-1c對IRS-1的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

5 宋衛(wèi)紅;湯長發(fā);;離心運動對大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡的時序性影響[A];湖南省首屆生理—藥理科學(xué)青年論壇論文摘要匯編[C];2009年

6 李良剛;陳槐卿;;AMPK通過轉(zhuǎn)錄抑制子HDAC5調(diào)節(jié)骨骼肌細(xì)胞GLUT4基因的表達(dá)[A];第八屆全國體育科學(xué)大會論文摘要匯編（一）[C];2007年

7 馬麗;柴家科;申傳安;尹會男;遲云飛;鄧虎平;張西波;;睪酮對小鼠骨骼肌細(xì)胞泛素E3連接酶的影響及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會燒傷外科學(xué)分會2009年學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

8 洪琴;池霞;張敏;童梅玲;郭錫熔;;不同濃度葡萄糖和游離脂肪酸對骨骼肌細(xì)胞胰島素敏感性和細(xì)胞內(nèi)ROS的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國兒科學(xué)術(shù)大會論文匯編（上冊）[C];2010年

9 吳毅;楊曉冰;馮光斌;胡永善;占飛;李益明;朱尚權(quán);張新堂;;運動改善糖尿病葡萄糖轉(zhuǎn)運能力的分子生物學(xué)機(jī)制[A];1998年全國運動療法學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];1998年

10 湯慧芹;徐焱成;;早衰素相關(guān)菱形體樣蛋白基因在胰島素抵抗和2型糖尿病大鼠中骨骼肌的表達(dá)[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會第十次全國糖尿病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 衣曉峰;2型糖尿病動物模型成模率逾85％[N];健康報;2005年

2 張家慶 （教授）;適度鍛煉身體改善胰島素抵抗[N];上海中醫(yī)藥報;2003年

3 成楓;“青錢柳”可改善胰島素抵抗[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

4 趙振愛;中藥可改善糖尿病胰島素抵抗[N];中國中醫(yī)藥報;2007年

5 傅敏端;你知道胰島素抵抗嗎[N];家庭醫(yī)生報;2008年

6 第一軍醫(yī)大學(xué)珠江醫(yī)院內(nèi)分泌科 劉宏;糖尿病和胰島素抵抗[N];中國老年報;2003年

7 第一軍醫(yī)大學(xué)珠江醫(yī)院內(nèi)分泌科 劉宏;糖尿病和胰島素抵抗[N];科技日報;2003年

8 副主任醫(yī)師 韓詠霞;為何妊娠期婦女易發(fā)胰島素抵抗[N];保健時報;2006年

9 劉士敬邋劉紅虹;肝源性糖尿病患者宜早用胰島素[N];家庭醫(yī)生報;2007年

10 湘雅二醫(yī)院 陳化;胰島素抵抗：糖尿病、心血管疾病的重要危險因素[N];大眾衛(wèi)生報;2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 孔德賢;線粒體融合蛋白2對大鼠骨骼肌L6肌細(xì)胞GLUT4表達(dá)及轉(zhuǎn)位的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 李金茹;缺氧的脂肪細(xì)胞與巨噬細(xì)胞條件培養(yǎng)基對骨骼肌細(xì)胞胰島素作用的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

3 王文匯;血管緊張素Ⅱ受體與骨骼肌微循環(huán)胰島素抵抗[D];山東大學(xué);2012年

4 高麗;長期飲酒增加大鼠胰島素抵抗和骨骼肌蛋白酪氨酸磷酸酶1B活性的研究[D];山東大學(xué);2011年

5 那立欣;姜黃素對2型糖尿病大鼠骨骼肌胰島素抵抗的作用及機(jī)制研究[D];哈爾濱醫(yī)科大學(xué);2010年

6 馮曉桃;蒲黃總黃酮對C2C12骨骼肌細(xì)胞葡萄糖代謝的影響及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 李澤;AMPK活性對宰后羊肉能量代謝和肉質(zhì)的影響及其機(jī)理研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

8 張志紅;下丘腦輸注Nesfatin-1對肝臟AMPK/TORC2/AKT信號通路的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

9 孫香蘭;心肌葡萄糖代謝的分子機(jī)制探討-AMPK和SNARK信號傳導(dǎo)通路[D];山東大學(xué);2012年

10 王納遂;血管緊張素Ⅱ受體活性對骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性的調(diào)節(jié)作用[D];中南大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 陳文才;運動干預(yù)對糖尿病大鼠骨骼AMPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

2 宋帥召;高糖血脂喂養(yǎng)妊娠大鼠脂聯(lián)素和AMPK基因表達(dá)與胰島素抵抗關(guān)系研究[D];鄭州大學(xué);2012年

3 金曉明;胰島素抵抗大鼠骨骼肌細(xì)胞蛋白激酶B的表達(dá)及羅格列酮的干預(yù)研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

4 陳麗;AMPKβ_2對運動中骨骼肌細(xì)胞肌糖原的調(diào)節(jié)作用及機(jī)理研究[D];成都體育學(xué)院;2011年

5 陳灰;脂聯(lián)素激活A(yù)MPK信號通路調(diào)控奶牛肝細(xì)胞脂代謝的相關(guān)機(jī)制[D];吉林大學(xué);2013年

6 李梅;針刺調(diào)節(jié)胰島素抵抗模型大鼠IRS-1、IRS-2和GLUT4的實驗研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

7 龔豪杰;運動對AMPK不同基因型小鼠骨骼肌MEF2-GLUT4的影響[D];北京體育大學(xué);2011年

8 陳大鵬;耐力訓(xùn)練對AMPKα2基因敲除小鼠骨骼肌GLUT4表達(dá)的影響[D];北京體育大學(xué);2010年

9 栗莉;TLR4在脂肪酸誘導(dǎo)人骨骼肌細(xì)胞胰島素抵抗中作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

10 匡霞;小檗堿對胰島素抵抗HepG2細(xì)胞AMPK信號通路及其下游糖脂代謝相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[D];華中科技大學(xué);2012年

本文編號：2695838