發(fā)布時間：2020-03-14 18:54

【摘要】： 單純皰疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因是腫瘤基因治療研究中常用的自殺基因,為達到安全有效的治療目的,需要調(diào)控HSV-tk基因在腫瘤細胞內(nèi)精確地表達,從而防止基因過表達對機體產(chǎn)生危害,低表達影響治療效果。 本研究利用基因重組技術構建了四環(huán)素調(diào)控HSV-tk基因表達的雙質(zhì)粒載體系統(tǒng),在此基礎之上又構建了四環(huán)素調(diào)控HSV-tk基因表達的單質(zhì)粒載體系統(tǒng)。體外細胞水平研究結果表明構建的四環(huán)素調(diào)控HSV-tk的雙載體系統(tǒng)可有效調(diào)控HSV-tk基因在宮頸癌HeLa細胞表達及抗腫瘤活性;構建的四環(huán)素調(diào)控HSV-tk的單載體系統(tǒng)可有效地調(diào)控HSV-tk基因在HeLa細胞及結腸癌HCT-8細胞內(nèi)表達,并可調(diào)控其抗腫瘤活性. 本研究構建的四環(huán)素單質(zhì)�；虮磉_調(diào)控系統(tǒng)與四環(huán)素雙質(zhì)�；虮磉_調(diào)控系統(tǒng)比較,具有基因轉(zhuǎn)染操作簡便、節(jié)省時間和經(jīng)濟成本等優(yōu)點;同時單質(zhì)粒調(diào)控系統(tǒng)是一個自我調(diào)節(jié)基因表達的調(diào)控載體,能使HSV-tk基因有一定的基礎表達,比雙載體系統(tǒng)啟動基因表達所需時間短、強力霉素所需濃度低,以及調(diào)控基因表達時間長。這些特點使其更適用于腫瘤的基因治療。 本研究成功構建了四環(huán)素調(diào)控HSV-tk基因表達的雙載體系統(tǒng)及單載體系統(tǒng),為進一步提高HSV-tk基因腫瘤治療的安全性及有效性奠定了實驗基礎。
【圖文】：

- TetO2酶切產(chǎn)物經(jīng) 1％瓊脂. 未酶切的 pMD18- TetO2質(zhì). 酶切的 pMD18- TetO2質(zhì)粒. Marker I1% agarose gel electrophires products of pMD18- TetO2pMD18- TetO2plasmidpMD18- TetO2plasmid digesDNA Marker I

3 pcDNA3.1-TetO2酶切鑒定產(chǎn)物電泳1. pcDNA3.1 質(zhì)粒2. pcDNA3.1 質(zhì)粒酶切產(chǎn)物3 .DNA Marker III4. pcDNA3.1-TetO2質(zhì)粒5. pcDNA3.1-TetO2質(zhì)粒酶切產(chǎn)物Fig1.3 1% agarose gel electrophiresis stion products of pcDNA3.1-TetO2plasLane 1．pcDNA3.1 plasmidLane 2．pcDNA3.1 plasmid digestion pLane 3．DNA Marker IIILane 4．pcDNA3.1-TetO2plasmidLane 5．pcDNA3.1-TetO2digestion pro
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R346

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