【摘要】： 目的:SCF也稱c-Kit配體(KL或c-Kit-L)、MGF及SLF,其受體c-Kit可表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞上,我們通過觀察SCF對HUVECs增殖、遷移、管狀形成功能的影響和對EPCs的趨化作用,探討SCF是否在血管新生、血管發(fā)生中發(fā)揮生物學(xué)活性。 方法:用0.1%Ⅰ型膠原酶消化分離HUVECs;首先設(shè)置空白對照、SCF、VEGF、Anti-SCF、IgG共5組,然后用MTT法、CCK-8法,細(xì)胞劃痕法,Matrigel體外三維成型法分別檢測SCF是否具有提高內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管狀形成能力的生物學(xué)活性。用流式細(xì)胞儀分選臍血中CD133~+細(xì)胞(EPCs);并應(yīng)用transwell技術(shù)(設(shè)為5組,同前)檢測SCF對EPCs是否具有趨化作用。 結(jié)果:①0.1%Ⅰ型膠原酶消化15min為最佳分離HUVECs的方法;②SCF無促進(jìn)HUVECs增殖能力的作用,與空白對照組的100±3.1%(MTT)100±1.9%(CCK-8)相比,SCF組(100ng/ml)的增殖百分率為99±4.4%(MTT)101±2.3%(CCK-8),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);③SCF具有顯著提高HUVECs遷移能力的作用;④SCF具有提高HUVECs管狀形成能力的作用,并呈劑量依賴性,100ng/ml SCF為最佳濃度,完整小管形成數(shù)量達(dá)30±3.4個,明顯高于空白對照組的5±2.6個,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。⑤流式細(xì)胞儀分選標(biāo)記有CD133熒光抗體的臍血單個核細(xì)胞可成功獲得EPCs;⑥SCF對EPCs具有顯著趨化作用,與空白對照組的47±4.7個相對照,SCF組跨膜遷移細(xì)胞數(shù)高達(dá)118±6.5個,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論:SCF具有提高HUVECs遷移、管狀形成能力的生物學(xué)活性,并對EPCs有趨化作用。SCF/c-Kit信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在內(nèi)皮細(xì)胞和EPCs參與的血管新生、血管發(fā)生中可能發(fā)揮重要作用。
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R329

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本文編號：2586803