發(fā)布時間：2020-03-02 11:43

【摘要】： 目的:通過本課題的研究,探討新疆維吾爾族和漢族胃疾病患者感染幽門螺桿菌(Helieobacter pyroli,H.pylori))cagA和vacA基因亞型的分布狀況以及與胃相關(guān)性疾病的關(guān)系。方法:(1)臨床收集慢性淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍和胃癌患者胃鏡活檢標本,采用H.pylori分離培養(yǎng)技術(shù)對其進行H.pylori培養(yǎng)鑒定;(2)采用Chelex 100法提取培養(yǎng)出的H.pylori基因組,采用聚合酶鏈反應(yīng)-序列特異性引物法(PCR-SSP)對H.pylori進行cagA和vacA基因亞型檢測,并對其在民族間的分布及與特定疾病間的關(guān)系進行分析。結(jié)果:檢測cagA陽性率為84.8%,其在不同胃疾病的維吾爾族和漢族之間的分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),在維吾爾族和漢族的不同疾病間cagA陽性率差異也無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。檢測vacA亞型,s1a、s2、m1b、m2陽性率分別為62.0%、4.3%、18.5%、67.4%。在胃癌患者中,vacA m2基因在漢族人群中的陽性率(25%)低于維吾爾族人群中的陽性率(85.7%),vacA m1b基因在漢族人群中的陽性率(75%)高于維吾爾族人群中的陽性率(0%)(P0.05)。在漢族人群中,vacA m2基因在胃潰瘍組的陽性率(71.4%)高于胃癌組;vacA m1b在慢性淺表性胃炎組的陽性率(71.4%)高于胃潰瘍組(0%)、在胃潰瘍組的陽性率低于胃癌組(75%)(P0.05)。結(jié)論:新疆地區(qū)H.pylori cagA基因與漢族和維吾爾族間及特定疾病間的分布未發(fā)現(xiàn)不同;H.pylori vacA m2基因在漢族人群中的陽性率低于維吾爾族人群中的陽性率,vacA m1b基因在漢族人群中的陽性率高于維吾爾族人群中的陽性率;vacA m2基因亞型在胃潰瘍組的陽性率高于胃癌組;vacA m1b亞型在胃癌組陽性率較高。
【圖文】：

圖 1 H.pylori 革蘭染色油鏡（10×100）鏡檢圖（箭頭所指為 H.pylori）2.3 H.pylori cagA 和 vacA 基因型的檢測2.3.1 H.pylori 基因組 DNA 的提取采用 Chelex 100 法直接從 H.pylori 保存管中提取 H.pylori 基因組 DNA。具體步驟如下所述：1）取出 H.pylori 保存管待融化后 12000rpm 離心 5 分鐘，棄上清。2）加入 5% Chelex100 150μl，混勻后再加入蛋白酶 K 4μl，漩渦混勻 10 分鐘。3）55℃水浴 3 小時。4）煮沸 10 分鐘。5）置于冰上 1 分鐘后，12000rpm 離心 10 分鐘。6）取上清（約 150μl）置于 1.5ml 的 EP 管中。7）取 5μl 模板與 1μl 6×溴酚藍載樣緩沖液混勻于 0.8%含 EB 的瓊脂糖凝膠電泳分離，，紫外凝膠成像系統(tǒng)觀察基因組 DNA 條帶，未見明顯條帶。8）取 1μl 模板加入 1ml 1×TE 中，以 1×TE 作為空白，在核酸 蛋白分光光度

株、維吾爾族 14 株）、慢性萎縮性胃炎攜帶族 19 株）、胃潰瘍（GU）13 株（漢族 7 （漢族 4 株、維吾爾族 7 株）。年齡 18～8性 37 例。和 vacA 基因型結(jié)果ylori 中，cagA 陽性率 84.8%（76/92），見表型；vacA s1a 亞型陽性率 62.0%（57/92），表 4；vacA m1b 亞型陽性率 18.5%（17/92）），見表 5。cagA 基因陽性片段大小為 40大小為 190bp（圖 3）；vacA s2 亞型陽性片型陽性片段大小為 291bp（圖 5）；vacA mM 1 2 3 4 5 6 7
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R378

【參考文獻】

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本文編號：2584322