發(fā)布時(shí)間：2020-03-02 11:43

【摘要】： 目的:通過(guò)本課題的研究,探討新疆維吾爾族和漢族胃疾病患者感染幽門螺桿菌(Helieobacter pyroli,H.pylori))cagA和vacA基因亞型的分布狀況以及與胃相關(guān)性疾病的關(guān)系。方法:(1)臨床收集慢性淺表性胃炎、慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍和胃癌患者胃鏡活檢標(biāo)本,采用H.pylori分離培養(yǎng)技術(shù)對(duì)其進(jìn)行H.pylori培養(yǎng)鑒定;(2)采用Chelex 100法提取培養(yǎng)出的H.pylori基因組,采用聚合酶鏈反應(yīng)-序列特異性引物法(PCR-SSP)對(duì)H.pylori進(jìn)行cagA和vacA基因亞型檢測(cè),并對(duì)其在民族間的分布及與特定疾病間的關(guān)系進(jìn)行分析。結(jié)果:檢測(cè)cagA陽(yáng)性率為84.8%,其在不同胃疾病的維吾爾族和漢族之間的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),在維吾爾族和漢族的不同疾病間cagA陽(yáng)性率差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。檢測(cè)vacA亞型,s1a、s2、m1b、m2陽(yáng)性率分別為62.0%、4.3%、18.5%、67.4%。在胃癌患者中,vacA m2基因在漢族人群中的陽(yáng)性率(25%)低于維吾爾族人群中的陽(yáng)性率(85.7%),vacA m1b基因在漢族人群中的陽(yáng)性率(75%)高于維吾爾族人群中的陽(yáng)性率(0%)(P0.05)。在漢族人群中,vacA m2基因在胃潰瘍組的陽(yáng)性率(71.4%)高于胃癌組;vacA m1b在慢性淺表性胃炎組的陽(yáng)性率(71.4%)高于胃潰瘍組(0%)、在胃潰瘍組的陽(yáng)性率低于胃癌組(75%)(P0.05)。結(jié)論:新疆地區(qū)H.pylori cagA基因與漢族和維吾爾族間及特定疾病間的分布未發(fā)現(xiàn)不同;H.pylori vacA m2基因在漢族人群中的陽(yáng)性率低于維吾爾族人群中的陽(yáng)性率,vacA m1b基因在漢族人群中的陽(yáng)性率高于維吾爾族人群中的陽(yáng)性率;vacA m2基因亞型在胃潰瘍組的陽(yáng)性率高于胃癌組;vacA m1b亞型在胃癌組陽(yáng)性率較高。
【圖文】：

圖 1 H.pylori 革蘭染色油鏡（10×100）鏡檢圖（箭頭所指為 H.pylori）2.3 H.pylori cagA 和 vacA 基因型的檢測(cè)2.3.1 H.pylori 基因組 DNA 的提取采用 Chelex 100 法直接從 H.pylori 保存管中提取 H.pylori 基因組 DNA。具體步驟如下所述：1）取出 H.pylori 保存管待融化后 12000rpm 離心 5 分鐘，棄上清。2）加入 5% Chelex100 150μl，混勻后再加入蛋白酶 K 4μl，漩渦混勻 10 分鐘。3）55℃水浴 3 小時(shí)。4）煮沸 10 分鐘。5）置于冰上 1 分鐘后，12000rpm 離心 10 分鐘。6）取上清（約 150μl）置于 1.5ml 的 EP 管中。7）取 5μl 模板與 1μl 6×溴酚藍(lán)載樣緩沖液混勻于 0.8%含 EB 的瓊脂糖凝膠電泳分離，，紫外凝膠成像系統(tǒng)觀察基因組 DNA 條帶，未見(jiàn)明顯條帶。8）取 1μl 模板加入 1ml 1×TE 中，以 1×TE 作為空白，在核酸 蛋白分光光度

株、維吾爾族 14 株）、慢性萎縮性胃炎攜帶族 19 株）、胃潰瘍（GU）13 株（漢族 7 （漢族 4 株、維吾爾族 7 株）。年齡 18～8性 37 例。和 vacA 基因型結(jié)果ylori 中，cagA 陽(yáng)性率 84.8%（76/92），見(jiàn)表型；vacA s1a 亞型陽(yáng)性率 62.0%（57/92），表 4；vacA m1b 亞型陽(yáng)性率 18.5%（17/92）），見(jiàn)表 5。cagA 基因陽(yáng)性片段大小為 40大小為 190bp（圖 3）；vacA s2 亞型陽(yáng)性片型陽(yáng)性片段大小為 291bp（圖 5）；vacA mM 1 2 3 4 5 6 7
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：R378

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 劉改芳;韓曉輝;張彥普;吳婧;張玉貞;趙麗偉;徐華洲;姚希腎;;幽門螺桿菌cagA及vacA亞型與胃腸疾病的關(guān)系[J];中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志;2006年03期

2 馬嵐青,南瓊,周曾芬,張靜垎,和澤元,木金花,陶中原,王健,金利,張建中;云南三民族幽門螺桿菌空泡毒素基因分布特征及其致病性[J];中華內(nèi)科雜志;2004年08期

3 張維!213200,趙志泉,劉平,張紅杰;具有cagA基因的幽門螺桿菌感染與宿主產(chǎn)生白介素-8、腫瘤壞死因子-α的關(guān)系研究[J];中華消化雜志;2000年06期

4 紀(jì)徐淮,Daniela Burroni,許國(guó)銘,Cristina Pagliaccia,Jean,屠振興,丁華,杜奕奇,Rino,JohnL.Telford;中國(guó)幽門螺桿菌vacA基因的等位變異[J];中華消化雜志;2000年03期

5 楊桂彬!100034,胡伏蓮!100034,郟建臣;CagA陽(yáng)性幽門螺桿菌感染與上胃腸道疾病關(guān)系的研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2001年11期

6 李曉波,劉文忠,蕭樹(shù)東,徐蔚文;上海地區(qū)幽門螺桿菌cagA基因3’區(qū)和vacA基因的多態(tài)性分析及其臨床意義[J];胃腸病學(xué);2000年02期

7 蕭樹(shù)東;鄭青;;幽門螺桿菌cagA基因多態(tài)性對(duì)臨床結(jié)局的影響:東亞菌株和西方菌株[J];醫(yī)學(xué)與哲學(xué)(臨床決策論壇版);2007年06期

本文編號(hào)：2584322