發(fā)布時(shí)間：2020-02-27 08:26

【摘要】： 缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)在血管生成表達(dá)中有重要意義,HIF-1α是缺氧狀態(tài)下血管生成的核心調(diào)控因子,通過影響其他生長因子的表達(dá)參與血管生成的全過程。VEGF是血管生成初期關(guān)鍵性的生長因子,缺氧狀態(tài)可以誘導(dǎo)VEGF大量表達(dá)。VEGF在血管生成中發(fā)揮重要作用,VEGF具有促血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂、增殖,增加血管的通透性,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞Bcl-2基因表達(dá),提高內(nèi)皮細(xì)胞抗凋亡能力等作用。本實(shí)驗(yàn)通過檢測缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)和血管內(nèi)皮細(xì)胞生成因子(VEGF)在兔頸總動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫+頸前靜脈自體靜脈移植手術(shù)前后各期的表達(dá)以及移植靜脈術(shù)后剝脫內(nèi)膜段動(dòng)脈管腔橫截面積的變化,研究HIF-1α和VEGF在兔移植靜脈再內(nèi)皮化過程中的作用。 目的 探討HIF-1α和VEGF的表達(dá)對大白兔移植靜脈再內(nèi)皮化的影響。 1、HIF-1α和VEGF在兔頸總動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫+頸前靜脈自體靜脈移植手術(shù)前后各期的表達(dá)關(guān)系。 2、移植靜脈術(shù)后剝脫內(nèi)膜段動(dòng)脈管腔橫截面積的變化 方法 1、分組和制作動(dòng)物模型6月齡成年雄性新西蘭大白兔46只,隨機(jī)分為兩組,第一組10只,第二組36只(其中30只為試驗(yàn)必須動(dòng)物,6只為備用)。均以普通飲食飼養(yǎng)一周后,采集第一組10只實(shí)驗(yàn)兔的血清分別采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)行HIF-1α和VEGF檢測,然后取所有10只兔的左頸前靜脈行HE染色做病理學(xué)檢查,觀察動(dòng)脈血管腔面積。第二組36只大白兔均行左側(cè)頸總動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫+頸前靜脈自體靜脈移植術(shù),制作再狹窄模型,術(shù)后以普通飲食飼養(yǎng)。于手術(shù)后7天、14天、30天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)依次分別隨機(jī)抽取10只實(shí)驗(yàn)兔采集血清用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)行HIF-1α和VEGF檢測,抽血后取該次試驗(yàn)10只兔剝脫內(nèi)膜段動(dòng)脈行HE染色做病理學(xué)實(shí)驗(yàn),并觀察動(dòng)脈血管腔面積、內(nèi)膜增生和平滑肌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化。 2、病理學(xué)資料圖像分析采用病理學(xué)圖像分析系統(tǒng)對標(biāo)本：兔移植靜脈HE染色、Mason染色片進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析。 3、化學(xué)法分析分別于靜脈移植手術(shù)前和手術(shù)后7天、14天、30天采血用ELISA法測量血清中HIF-1α和VEGF的水平。 結(jié)果 1、HIF-1α和VEGF各期的表達(dá)差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；HIF-1α和VEGF在兔自體靜脈移植術(shù)后表達(dá)明顯增加(P0.01),其中在7天時(shí)最高,之后逐漸下降,在術(shù)后30天時(shí)僅稍高于正常。 2、HE染色結(jié)果顯示剝脫內(nèi)膜段動(dòng)脈血管腔面積(LA)總體呈先逐漸縮小,于術(shù)后14天達(dá)最低值,然后逐漸增大趨勢。 結(jié)論 1、本次實(shí)驗(yàn)中成功地制作了兔頸總動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫+自體靜脈移植術(shù)后再狹窄模型。 2、組織器官急性缺血缺氧期HIF-1α和VEGF表達(dá)迅速增高；隨著時(shí)間延長,組織器官對缺血缺氧的適應(yīng),兩因子濃度逐漸降低,本實(shí)驗(yàn)中觀察到的HIF-1α和VEGF表達(dá)高峰出現(xiàn)在術(shù)后7天,且兩指標(biāo)在各期表達(dá)差別明顯有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、移植靜脈術(shù)后血管重塑的早期HIF-1α和VEGF的高表達(dá)可促進(jìn)受損血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)結(jié)構(gòu)和功能的重建,維持動(dòng)脈管腔面積；隨著時(shí)間推移,HIF-1α和VEGF的表達(dá)逐漸減少,移植靜脈術(shù)后剝脫內(nèi)膜段動(dòng)脈管腔逐漸縮小,于術(shù)后14天達(dá)到最小,然后逐漸增大,且動(dòng)脈管腔面積在各期差別明顯有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4、HIF-1α和VEGF表達(dá)高峰和移植靜脈術(shù)后剝脫內(nèi)膜段動(dòng)脈管腔最小值分別出現(xiàn)在術(shù)后7天和14天,所以術(shù)后7-14天HIF-1α和VEGF表達(dá)的過早降低可能與移植靜脈術(shù)后再狹窄有關(guān)。在各期HIF-1α和VEGF表水平均服從正態(tài)分布,經(jīng)過Pearson相關(guān)分析存在強(qiáng)的正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r分別為0.901,0.832,0.779,0.863。
【圖文】：

內(nèi)膜剝脫術(shù)后30天兔左頸總動(dòng)脈

術(shù)后7天兔左頸總動(dòng)脈可見附壁血栓
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R363

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2583234