發(fā)布時(shí)間：2020-01-27 23:03

【摘要】： 細(xì)菌“活的非可培養(yǎng)”狀態(tài)是細(xì)菌在不良環(huán)境下的一種特殊存在形式,當(dāng)細(xì)菌處于不良環(huán)境條件下,細(xì)胞縮成球形,用常規(guī)方法培養(yǎng)不能生長(zhǎng)繁殖,在適當(dāng)?shù)臈l件下仍然能復(fù)蘇的一種特殊生存方式。進(jìn)入非可狀態(tài)的病原菌在不良環(huán)境中,喪失了在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖的能力,但仍具有與原菌相似的致病性。這可能成為逃避檢測(cè)的“隱性”傳染源,對(duì)周?chē)沫h(huán)境及人類(lèi)安全構(gòu)成潛在威脅。 實(shí)驗(yàn)中選取三種典型致病微生物,大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌作為對(duì)象。在食品和飲用水的微生物指標(biāo)檢測(cè)中,革蘭氏陰性的大腸菌群通常作為微生物污染的主要指標(biāo)菌,大腸菌群的指標(biāo)直接影響著水微生物指標(biāo)是否過(guò)關(guān)。而沙門(mén)氏菌通常為食品和飲用水中常見(jiàn)的致病菌,是引起通常腹瀉主要微生物。金黃色葡萄球菌更是常見(jiàn)的革蘭氏陽(yáng)性食品性致病微生物,同時(shí)國(guó)內(nèi)外相關(guān)報(bào)道對(duì)于活的非可培養(yǎng)狀態(tài)多集中在革蘭氏陰性菌細(xì)菌上,而對(duì)于革蘭氏陽(yáng)性菌的活的非可培養(yǎng)狀態(tài)研究卻研究的很少。 本實(shí)驗(yàn)研究了低溫和重金屬Cu~(2+)等誘導(dǎo)條件對(duì)大腸桿菌和沙門(mén)氏菌,金黃色葡萄球菌進(jìn)入“活的非可培養(yǎng)”狀態(tài)的影響,并對(duì)非可狀態(tài)下菌體生物學(xué)特性、檢測(cè)方法、致病性及條件進(jìn)行深入地研究。并嘗試?yán)眠^(guò)氧化氧酶,吐溫20進(jìn)行了復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)。 細(xì)菌的“活的非可培養(yǎng)”狀態(tài)現(xiàn)象廣泛存在于自然環(huán)境中和人類(lèi)的生活領(lǐng)域,對(duì)人類(lèi)健康造成潛在的威脅�，F(xiàn)階段我國(guó)常規(guī)的水和食品衛(wèi)生檢驗(yàn)及進(jìn)出口商品檢疫等中,細(xì)菌檢測(cè)仍多用常規(guī)的培養(yǎng)方法,這樣的結(jié)果顯然不可靠�；趯�(duì)公眾健康和安全的考慮,加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌VBNC狀態(tài)的研究尤為迫切,實(shí)際意義重大。
【圖文】：

3Ti訂〔(days)圖3一12c了‘誘導(dǎo)條件下金黃色葡萄球菌可培養(yǎng)菌數(shù)變化 F193一 ZN::mberoft一 leeulturab一es‘，，z一 rezlsinducedbyct一2‘ 3.1.5正常狀態(tài)菌體菌落與誘導(dǎo)菌體在常規(guī)培養(yǎng)基生長(zhǎng)對(duì)比:種汁常狀態(tài)的菌甘液(約105一IO6CFU/mL)和三種誘導(dǎo)后的l商體菌甘液(約1護(hù)一1護(hù)CFU/mL)分別取In:L加入平板，肉湯瓊脂培養(yǎng)基傾注搖勻，J乙37℃下培養(yǎng)24h/L’.右。觀察到正常狀態(tài)下的環(huán)中致病菌在培養(yǎng)基平板t:均有大獄菌落出現(xiàn)，而經(jīng)誘學(xué)的二種菌在培養(yǎng)從‘{吮板1幾末出現(xiàn)菌落。取同樣的菌甘液加入液體肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)37’C卜搖床培養(yǎng)241:。發(fā)現(xiàn)含有正常狀態(tài)致病菌液體培養(yǎng)基均出現(xiàn)混濁，顏色變淺等現(xiàn)象，吸光度值增大。而誘導(dǎo)后的菌體培養(yǎng)基仍然澄清，透明，吸光度值保持不變。正常狀態(tài)菌體菌落與誘導(dǎo)菌體在常規(guī)固體和液體培養(yǎng)基生長(zhǎng)對(duì)比結(jié)果可以得出:誘導(dǎo)后的三種菌體已經(jīng)失去了可培養(yǎng)性，至于它們是己經(jīng)死亡還是處于活著的特殊狀態(tài)，還需要通過(guò)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和進(jìn)一步的原子力顯微鏡管觀察得出結(jié)論。圖3一13正常狀態(tài)大腸桿菌菌落照片 F193一 13PhotoofE

天津科技大學(xué)碩卜學(xué)位論文圖3一15正常狀態(tài)下的沙門(mén)氏菌菌落照片 F193一 15PhotoofSalmonellainthenormalstate圖3一 16vBNC狀態(tài)的沙門(mén)氏菌菌落照片 F193一 16Photoofsalmonellahadbeenindueed圖3一17正常狀態(tài)金黃色葡萄球菌照片 F193一 17Photoofs.aureusinthenormalstate圖3一 18VBNC狀態(tài)金黃色葡萄球菌照片 F193一 18Photoofs.aureushadbeeninduced
【學(xué)位授予單位】：天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類(lèi)號(hào)】：R378

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本文編號(hào)：2573794