【摘要】：目的研究胰島素誘導(dǎo)大鼠血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)轉(zhuǎn)錄因子激活蛋白-1(activator protein 1,AP-1)表達(dá)下調(diào)對VSMC表型轉(zhuǎn)換標(biāo)志蛋白α肌動蛋白(alpha smooth muscle actin,SM-α)表達(dá)調(diào)控及細(xì)胞增殖的影響。方法流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度(0、25、50、100、125 nmol/L)的胰島素刺激VSMC 24 h后的細(xì)胞周期。設(shè)計(jì)AP-1表達(dá)質(zhì)粒載體,轉(zhuǎn)染至血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)。分為4組:空白對照組、胰島素實(shí)驗(yàn)組、AP-1表達(dá)載體組、胰島素+AP-1表達(dá)載體組。分別采用Western blot、RT-PCR檢測AP-1蛋白及SM-α蛋白的表達(dá)及mRNA水平。結(jié)果細(xì)胞周期分布結(jié)果顯示,不同濃度的胰島素刺激VSMC 24 h后,VSMC的S期百分比升高至峰值后開始下降[(23.49±1.17)%、(28.08±0.68)%、(30.44±1.77)%、(47.47±0.88)%、(46.23±1.65)%,P0.05],100 nmol/L的胰島素刺激VSMC 24 h后,VSMC的S期百分比達(dá)到峰值(47.47±0.88)。RT-PCR及Western blot檢測結(jié)果顯示,胰島素刺激VSMC可下調(diào)AP-1[(0.47±0.09)、(0.46±0.14),P0.05]及抑制SM-α的表達(dá)[(0.41±0.03)、(0.32±0.03),P0.05]。結(jié)論胰島素能下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子AP-1表達(dá),進(jìn)而抑制表型轉(zhuǎn)換標(biāo)志蛋白SM-α的表達(dá),誘導(dǎo)VSMC發(fā)生增殖。

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