發(fā)布時間：2019-12-04 13:29

【摘要】： 目的探討人骨髓間充質(zhì)干細胞(human bone marrow mesenchymal stem cells ,hMSCs)在體外誘導向運動神經(jīng)元分化的潛能。 方法取正常人新鮮骨髓,用密度梯度離心法分離hMSCs,在含有10%胎牛血清(FBS)的DMEM/ F12培養(yǎng)基擴增和培養(yǎng),通過細胞傳代純化hMSCs。利用傳代后的第1代hMSCs分為誘導組和對照組,誘導組的細胞在完全培養(yǎng)基中加入終濃度為10μg/L堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)預處理24小時后,用0.5μg/ml維甲酸(RA)和200 ng/mL音猬因子(Shh)聯(lián)合誘導10天。對照組不加上述誘導劑。光鏡下觀察其分化過程中hMSCs的形態(tài)變化;免疫細胞化學檢測誘導前后細胞是否表達神經(jīng)干細胞特異性標志蛋白神經(jīng)巢蛋白(nestin)、神經(jīng)元細胞特異性烯醇化酶(NSE),并計算陽性細胞所占比率;用流式細胞儀檢測是否產(chǎn)生運動神經(jīng)元標志物HB9及運動神經(jīng)元在總的細胞數(shù)中所占比率,并用流式軟件分析結(jié)果。 結(jié)果誘導組hMSCs經(jīng)誘導后能分化為具有典型神經(jīng)元形態(tài)的細胞,部分細胞表達nestin和NSE,表達率分別達到(25.00±4.47)%、(51.52±4.40)%;流式檢測誘導后運動神經(jīng)元特異性標志蛋白HB9表達,表達率達到(50.04±5.25) %。對照組細胞形態(tài)無改變,無nestin和NSE表達;HB9表達小于5%,兩組差異有顯著性(p0.05)。 結(jié)論hMSCs在體外條件下能誘導分化為運動神經(jīng)元樣細胞。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R329

【參考文獻】

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1 鄧鎮(zhèn);姜曉丹;徐如祥;蔡穎謙;鄒雨汐;杜謀選;;維甲酸和音猬因子促進骨髓基質(zhì)細胞向運動神經(jīng)元發(fā)育的實驗研究[J];中華神經(jīng)醫(yī)學雜志;2006年06期

2 吳曉牧;楊志剛;丁偉榮;楊海軍;柳U，

本文編號：2569632