【摘要】： 腦卒中是一類具有高發(fā)病率、高致殘率及高死亡率特點的疾病,迄今為止,尚缺乏有效的防治措施。內皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是存在于胎肝、臍帶血和成人外周循環(huán)血中的、能夠分化為內皮細胞的多潛能細胞。研究表明內皮祖細胞參與缺血性腦卒中后新生血管的形成、修復損傷的內皮、促進神經再生,在防治支架術后血栓形成及官腔再狹窄,以及構建組織工程微血管網(wǎng)絡方面具有廣泛的應用前景。 我們實驗立足于臨床,研究人臍帶血(umbilical cord blood,CB)、外周血(peripheral blood,PB)EPCs的分離、培養(yǎng)和鑒定,為EPCs在缺血性腦卒中的臨床應用提供技術支持。實驗選取人臍帶血外周血各15ml,采用1.077 Ficoll-Paque密度梯度離心法獲得單個核細胞(monocytes,MNCs),聯(lián)合貼壁篩選法進行純化,用含VEGF的M199培養(yǎng)基對MNCs進行誘導培養(yǎng)。觀察細胞的生長特性,從形態(tài)學、免疫細胞化學、免疫熒光、流式細胞學及吞噬攝取實驗五方面對細胞進行鑒定。 體外培養(yǎng)的EPCs先后出現(xiàn)“血島”樣細胞集落、首尾相連條索樣、網(wǎng)狀及鵝卵石樣形態(tài),流式細胞學檢測細胞表達祖細胞表面標志CD34、CD133、CD105,培養(yǎng)第7d的細胞高度表達內皮系細胞特異性標志KDR及CD31,加之細胞吞噬乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL),胞膜結合荊豆凝集素-1(UEA-1),進一步證明我們獲得了EPCs。 隨著自體細胞治療和基因修飾的進展,EPCs成為血管相關性疾病的種子細胞,我們從臍帶血和外周血中成功分離出了EPCs,以期為缺血性腦卒中患者自體內皮祖細胞回輸及臨床干細胞庫的建立提供理論及技術支持。
【圖文】：

圖2.1 MMP-9促進mKitL向sKitL 轉化，，cKit陽性祖細胞從骨髓微環(huán)境血管區(qū)遷移，這種易位激活EPCs由休眠進入增殖狀態(tài)。圖片摘自ov M, Erl W, Weber PC. Endothelial Progenitor Cells Mobilization, DifferentiaArterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2003,23:1185-1189.acental growth factor，PlGF）和激素類[21-22]如雌激素、促紅細胞生員具有相同的調節(jié)作用。此外，他汀類藥物通過活化Akt信號通路Cs參與新生血管生成[23-26]。EPCs一旦受到動員，就會從骨髓的血中。EPCs 參與新生血管生成和內皮細胞更新的機制傳統(tǒng)觀念認為成人體內新生血管的形成只有血管新生（angiogen已有血管處芽生出新的毛細血管，EPCs的成功鑒定改變了我們對識，EPCs可以選擇性募集到受損或缺血組織區(qū)，在以前未存在血

植入體內的EPCs可能通過釋放細胞因子促進成熟內皮細胞的增殖遷移，進而增強其血管生成能力。圖2.2 血管新生（左）與 血管發(fā)生（右）血管新生由已存在的原位血管內皮細胞增殖遷移形成血管結構；血管發(fā)生是在一系列細胞因子作用下由骨髓EPCs動員到循環(huán)血中并募集到缺血損傷部位，增殖分化遷移參與形成血管結構。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R329

【參考文獻】

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1 朱軍慧;馬彩艷;陳君柱;王興祥;張芙榮;孫堅;;高同型半胱氨酸血癥患者循環(huán)內皮祖細胞的變化[J];臨床心血管病雜志;2008年04期

2 黃偉劍;肖方毅;張懷勤;林以諾;蔡雪黎;周浩;林杰;楊德業(yè);;兩種內皮祖細胞修復兔頸動脈內膜損傷血管的對比研究[J];中華醫(yī)學雜志;2007年44期

本文編號：2558806