【摘要】：背景:脂肪干細胞是從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的間充質干細胞,在組織工程中比骨髓間充質干細胞具有更多優(yōu)勢,是當今的研究熱點之一。目的:在體外建立一種分離純化人皮下脂肪來源脂肪干細胞的方法,進行體外培養(yǎng)擴增及誘導其向成骨、成脂細胞分化。方法:通過密度梯度離心和貼壁篩選法相結合,對人脂肪干細胞進行分離、體外培養(yǎng)及擴增。倒置顯微鏡下觀察人脂肪干細胞的細胞形態(tài)和生長特性。選取第2代及第5代細胞,用CCK-8法檢測細胞活性,繪制細胞生長曲線,用流式細胞儀檢測細胞表面抗原標記。選取第5代細胞,分別進行成脂及成骨誘導分化,以確定其多向分化潛能。結果與結論:1采用密度梯度離心和貼壁培養(yǎng)相結合方法,可成功從人脂肪組織中獲得純度較高的人脂肪干細胞。2人脂肪干細胞經(jīng)歷了生長滯緩期、對數(shù)增殖期和生長平臺期,符合正常細胞的生長規(guī)律,且其生長具有對數(shù)生長期,其倍增時間較短。3人脂肪干細胞表達干細胞表面抗原標記,具有低免疫原性,且具有成脂成骨多向分化潛能。4DAPI是一種簡單、有效的標記人脂肪干細胞的方法,DAPI不損傷細胞活性,對細胞標記率高。

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