【摘要】： 目的: 胃腸道惡性腫瘤是人類最常見的惡性腫瘤。在目前以手術(shù)切除為主的綜合治療中,輔助治療由于其治療模式的非特異性特點,常難以達到理想的效果。樹突細胞(Dendritic Cell,DC)腫瘤疫苗是近年來興起的一個免疫治療新方法。CD40配體(CD40ligand,CD40L)在體內(nèi)是T細胞激活DC功能的重要分子。本實驗旨在通過外源性的CD40L刺激DC,促進其分化成熟,增強CEA轉(zhuǎn)基因小鼠的細胞免疫,探討在CEA轉(zhuǎn)基因小鼠中,CD40L激活的DC誘導(dǎo)細胞免疫的有效性,為進一步進行腫瘤疫苗的細胞毒性試驗和動物體內(nèi)試驗奠定基礎(chǔ)。 材料與方法: 使用CEA轉(zhuǎn)基因小鼠的骨髓細胞,通過粒-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素4(IL-4)在體外的刺激,貼壁法定向誘導(dǎo)分化出未成熟DC,利用CD40L刺激未成熟DC后,體外荷載CEA_(526-533)抗原肽,使DC具備誘導(dǎo)特異性細胞免疫的能力。通過定量測定DC表面分子、DC分泌的細胞因子、淋巴細胞增殖試驗等來研究此方法激活DC誘導(dǎo)細胞免疫的有效性。 結(jié)果: 1、實驗組DC表面各類分子的表達均高于對照組。 2、實驗組DC分泌的IL-12量顯著高于對照組(P＜0.01)。 3、實驗組DC刺激的CD8~+T細胞增殖多于對照組(P＜0.05),其分泌的INF-γ量顯著高于對照組(P＜0.01)。 4、實驗組DC刺激的脾細胞增殖顯著多于對照組(P＜0.01),其分泌的INF-γ量顯著高于對照組(P＜0.01)。 結(jié)論: 在CEA轉(zhuǎn)基因小鼠的動物模型中,體外使用CD40L刺激骨髓來源DC可以促進其分化成熟,該成熟DC能有效增強CEA轉(zhuǎn)基因小鼠的細胞免疫。
【圖文】：

第一批子代小鼠DNAPCR擴增產(chǎn)物

復(fù)I」_人學碩卜贊位論文圖3第三批子代小鼠 DNAPCR擴增產(chǎn)物注:圖1至圖3中M為標準品，1一7泳道分別為一只小鼠的PCR擴增產(chǎn)物。根據(jù)以上PCR結(jié)果，所鑒定的C57BL/6一CEA小鼠組織DNA均可擴增出92Obp的條帶。因此實驗所使用的C57BL/6一CEA小鼠均穩(wěn)定攜帶人CEA基因，是本實驗設(shè)計中理想的動物模型。以上顯示三批共21只小鼠的鑒定結(jié)果，本實驗中所使用的小鼠均取自這三批小鼠。二、C57BL/6一CEA小鼠骨髓來源DC免疫表型的鑒定流式細胞儀對各組DC表面分子鑒定結(jié)果見圖4:(一)、 NoCD4OL組的DC表面分子表達分別為 CDlle7.61%， CD401.52%，CDSO138%，， CD8610.81%
【學位授予單位】：復(fù)旦大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R392

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃光勝;呂永恒;陳琪;黎洪展;;阿托伐他汀對大鼠樹突狀細胞吞噬功能及共刺激分子表達的影響[J];重慶醫(yī)學;2011年23期

2 崔久嵬;牛超;李薇;金浩范;Boyapati Maheoh;王冠軍;;CML來源的DC激活的T淋巴細胞對自體CML細胞的殺傷作用[J];中國生物制品學雜志;2011年08期

3 黃羽;曾星;李莎莎;張嫻;;49例腫瘤患者外周血樹突狀細胞亞群與細胞免疫功能的研究[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2011年10期

4 郭力紅;張歲;劉靜;李保欣;段衛(wèi);佟立新;;HBsAg致敏自體樹突細胞聯(lián)合阿德福韋和單用阿德福韋對CHB者IFN-γ和IL-4的影響比較[J];臨床薈萃;2011年14期

5 周振海;李小銀;李娟;莊蘭;羅紹凱;;多發(fā)性骨髓瘤患者外周血moDC分泌APRIL和BAFF臨床意義的研究[J];中華腫瘤防治雜志;2011年11期

6 馮地路;汪宏波;;樹突狀細胞在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機制中的作用[J];國際婦產(chǎn)科學雜志;2011年04期

7 劉群威;周勝華;海志杰;;阿托伐他汀對鼠頸總動脈血管損傷后CD40L和MMP-8表達影響[J];中國介入心臟病學雜志;2011年04期

8 秦雯;李春萍;詹瑛;葉元華;崔雪娜;;血漿可溶性CD40L水平變化與子癇前期病人發(fā)病關(guān)系[J];青島大學醫(yī)學院學報;2011年05期

9 謝啟超;朱波;陳正堂;;IDO基因轉(zhuǎn)染小鼠樹突狀細胞體外誘導(dǎo)Treg細胞增殖的研究[J];重慶醫(yī)學;2011年20期

10 郭力紅;張歲;劉靜;李保欣;段衛(wèi);佟立新;;阿德福韋聯(lián)合特異性樹突細胞疫苗治療慢性乙型肝炎抗病毒療效與Th細胞因子觀察[J];河北醫(yī)藥;2011年14期

相關(guān)會議論文 前10條

1 王薇;劉U

本文編號：2553359