發(fā)布時(shí)間：2019-09-11 10:10

【摘要】： 目的:本研究采用哺乳動(dòng)物細(xì)胞雙雜交、免疫共沉淀以及GST pull-down等方法進(jìn)一步確認(rèn)HBV包膜蛋白(HBsAg)與跳躍斷裂易位(Jumping Translocation Breakpoint, JTB)蛋白之間的相互作用。 方法:采用Stratagene公司生產(chǎn)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞雙雜交系統(tǒng)進(jìn)行驗(yàn)證。將pCMV-BD-JTB、pCMV-AD-全S質(zhì)粒及報(bào)告質(zhì)粒pFR-Luc共轉(zhuǎn)染入293FT細(xì)胞以確證HBsAg與JTB蛋白的相互作用。收集293FT細(xì)胞表達(dá)的BD-JTB蛋白及AD-全S蛋白進(jìn)行雙向免疫共沉淀實(shí)驗(yàn),并以JTB-GST pull-down進(jìn)一步確認(rèn)JTB蛋白與主S蛋白的相互作用。 結(jié)果:哺乳動(dòng)物細(xì)胞雙雜交提示HBsAg與JTB蛋白共染組激發(fā)的熒光素酶表達(dá)高于陽(yáng)性對(duì)照組,提示兩者存在相互作用;雙向免疫共沉淀以及GST pull-down等方法的驗(yàn)證結(jié)果均提示HBsAg與JTB蛋白存在相互作用,并且兩者的結(jié)合位點(diǎn)可能位于主S結(jié)合域。 結(jié)論:HBsAg與JTB蛋白存在相互作用,結(jié)合位點(diǎn)位于主S結(jié)合域。
【圖文】：

誘餌質(zhì)粒（pCMV-BD）結(jié)構(gòu)示意圖

獵物質(zhì)粒（pCMV-AD）結(jié)構(gòu)示意圖
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類(lèi)號(hào)】：R373

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本文編號(hào)：2534355