【摘要】： 目的 本課題通過建立大腸濕熱型UC大鼠模型來研究清腸湯對(duì)大腸濕熱型UC的影響,深入揭示清腸湯治療大腸濕熱型UC的作用機(jī)制,為中醫(yī)藥治療大腸濕熱型UC提供一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。 方法 將清潔級(jí)健康SD大鼠40只(雌雄各半)按雌雄隨機(jī)分為5組,分別為A組(正常對(duì)照組)、B組(模型組)、C組(SASP組)、D組(清腸湯常規(guī)劑量組)和E組(清腸湯大劑量組),每組8只。采用葡聚糖硫酸鈉加乙酸配合飲食加環(huán)境復(fù)合法,復(fù)制大鼠大腸濕熱型UC模型。造模完成后,對(duì)大鼠進(jìn)行藥物灌胃治療:正常組和模型組均以蒸餾水灌胃;清腸湯常規(guī)劑量組和清腸湯大劑量組分別給予不同劑量的清腸湯灌胃治療;SASP組用SASP混懸液灌胃治療,以上均給藥14d,于第15天禁食不禁水24小時(shí)后稱重,處死大鼠,迅速剖取結(jié)腸,自肛門2 cm處向上取結(jié)腸6-8 cm,沿腸系膜縱軸剪開腸腔,在每只大鼠結(jié)腸各取二小塊(3mm×3mm)結(jié)腸組織,一塊以4%甲醛固定,石蠟包埋、切片、HE染色,顯微鏡下觀察各組結(jié)腸病理改變;免疫組化染色檢測(cè)結(jié)腸組織NF-κB p65和TLR4的表達(dá)。另一塊組織勻漿,放免法檢測(cè)細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1β與IL-6)的含量。 結(jié)果 1清腸湯對(duì)大腸濕熱型UC大鼠結(jié)腸組織形態(tài)學(xué)影響 結(jié)果顯示模型組結(jié)腸粘膜充血、水腫、彌漫性多發(fā)糜爛或潰瘍,鏡下粘膜固有膜內(nèi)有彌漫性炎癥細(xì)胞及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),隱窩有急性炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等。清腸湯各劑量組和SASP組治療后,大鼠結(jié)腸粘膜輕度充血水腫,未見糜爛、潰瘍,鏡下粘膜無潰瘍,粘膜固有層內(nèi)有少量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞浸潤(rùn),結(jié)腸粘膜損傷大體觀與模型組比較有明顯差異。清腸湯能減輕大腸濕熱型UC大鼠結(jié)腸組織損傷,促進(jìn)病變組織修復(fù),治療大腸濕熱型UC有效。 2清腸湯對(duì)大腸濕熱型UC大鼠結(jié)腸粘膜損傷指數(shù)(CMDI)的影響 結(jié)果顯示模型組大鼠結(jié)腸粘膜明顯充血水腫,糜爛出血,潰瘍形成,潰瘍直徑2-6mm不等。治療后,SASP、清腸湯常規(guī)劑量和清腸湯大劑量三組大鼠CMDI(分值)與正常對(duì)照組比較無明顯差異(P0.05);與模型組比較有顯著差異(P0.01);清腸湯大劑量組大鼠結(jié)腸粘膜損傷指數(shù)與SASP組比較有顯著差異(P0.01) 3清腸湯對(duì)大腸濕熱型UC大鼠結(jié)腸組織細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1與IL-6)表達(dá)的影響 清腸湯各劑量組和SASP組治療后與模型組比較,結(jié)腸組織TNF-α、IL-1與IL-6含量均下降。說明中藥清腸湯具有降低促炎因子TNF-α、IL-1與IL-6表達(dá),調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,減輕結(jié)腸粘膜損害作用。 4清腸湯對(duì)大腸濕熱型UC大鼠腸組織NF-λB p65和TLR4表達(dá)的影響 清腸湯各劑量組和SASP組治療后與模型組比較:大鼠結(jié)腸組織NF-κB p65和TLR4表達(dá)均下降;清腸湯大劑量組與SASP組比較有顯著性差異(P0.01);清腸湯常規(guī)劑量組與SASP組比較無顯著性差異(P0.05)。說明清腸湯具有降低NF-κB p65和TLR4表達(dá),從而減少細(xì)胞因子的分泌,減輕結(jié)腸粘膜損害的作用。 結(jié)論 1通過高糖高脂飲食、高溫高濕環(huán)境和DSS加乙酸這種復(fù)合方法,可以較好地復(fù)制出具有大腸濕熱證特點(diǎn)的UC大鼠模型。 2中藥清腸湯能夠改善大腸濕熱型UC大鼠的癥狀,減輕其結(jié)腸粘膜的炎性病理改變;在改善大鼠結(jié)腸粘膜損傷指數(shù)、降低大鼠結(jié)腸組織NF-κBp65和TLR4表達(dá)和減少細(xì)胞因子的分泌方面,中藥大劑量組優(yōu)于SASP組。 3 NF-κB p65、TLR4和細(xì)胞因子TNF-α、IL-1與IL-6可能參與了大腸濕熱型UC的發(fā)生、發(fā)展。清腸湯對(duì)TLRs/NF-κB通路的多個(gè)環(huán)節(jié)均有干預(yù)作用,這可能是其抗大腸濕熱型UC作用的部分機(jī)理。
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【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R-332;R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2465392