【摘要】：目的:構(gòu)建異種EGFR蛋白疫苗并研究其抗腫瘤效果。方法:用PCR方法獲得雞EGFR胞外片段,與pGEX-4T-2載體連接,并在E.coli BL21(DE3)中表達雞的EGFR胞外片段與GST的融合蛋白,融合蛋白經(jīng)Ni2+親和層析柱純化、復(fù)性后,免疫小鼠,免疫3次后,接種小鼠Lewis細胞,觀測腫瘤生長情況,ELISA檢測小鼠血清中抗EGFR蛋白的抗體效價。結(jié)果:成功構(gòu)建了EGFR胞外段基因的原核表達載體;SDS-PAGE顯示成功表達了目的融合蛋白;融合蛋白免疫小鼠后,ELISA法檢測到特異性抗EGFR抗體;實驗組與對照組腫瘤體積的比較結(jié)果顯示,融合蛋白疫苗能夠在一定程度上抑制腫瘤的生長。結(jié)論:異種EGFR蛋白能夠克服免疫耐受問題,誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體,有一定的抗腫瘤效果,為后續(xù)的腫瘤疫苗研究打下了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective: to construct xenogeneic EGFR protein vaccine and study its antitumor effect. Methods: the extracellular fragment of chicken EGFR was obtained by PCR and ligated with pGEX-4T-2 vector. The fusion protein of chicken EGFR extracellular fragment and GST was expressed in E.coli BL21 (DE3). The fusion protein was purified by Ni2 affinity chromatography and renatured, then immunized mice. After 3 times of immunization, Lewis cells were inoculated into mice, the growth of tumor was observed, and the antibody titers of anti-EGFR protein in serum of mice were detected by ELISA. Results: the prokaryotic expression vector of the extracellular segment of EGFR was successfully constructed, and the fusion protein was successfully expressed by SDS-PAGE, and the specific anti-EGFR antibody was detected by ELISA after immunization with the fusion protein in mice. The results showed that the fusion protein vaccine could inhibit tumor growth to a certain extent. Conclusion: xenogeneic EGFR protein can overcome the problem of immune tolerance and induce the body to produce antibodies, which has a certain anti-tumor effect, which lays a foundation for further research on tumor vaccine.
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;上海市肺科醫(yī)院肺癌免疫研究室;沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院;
【基金】：上海市科委重大課題資助項目(03DZ19236)
【分類號】：R73-36

【參考文獻】

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