【摘要】： 目的 亞臨床甲狀腺功能減退癥簡稱亞臨床甲減,又稱輕度甲狀腺功能衰竭(mildthyroid failure,MTF),是以促甲狀腺激素(TSH)水平升高和血清甲狀腺素(T_4)水平正常為特征的甲狀腺疾病。亞臨床甲減可伴不典型或不伴甲狀腺功能減退的癥狀和體征。亞臨床甲減的患病率各國報道不一,在1%-10%之間。亞臨床甲減的病因與甲減相同,常見的原因為自身免疫。一些藥物如鋰、α-干擾素、胺碘酮等都能造成TSH值升高。亞臨床甲減的主要不良后果是發(fā)展為臨床甲減和促進缺血性心臟病的發(fā)生。妊娠婦女的甲減是輕微的或者是無癥狀的,胎兒的神經(jīng)發(fā)育也可以受到損傷;如果對妊娠期的甲減給于左甲狀腺素(L-T_4)治療,后代智力將不會受到影響。亞臨床甲減對身體多方面的危害已經(jīng)得到證實,但是亞臨床甲減的致病機制尚不清楚。因此,建立亞臨床甲減的動物模型以明確亞臨床甲減的致病機制顯得非常必要。本研究通過手術(shù)切除動物的甲狀腺組織并用L-T_4替代治療的方法,探索亞臨床甲狀腺功能減退癥大鼠動物模型的造模方法。 方法 將150-180克的48只wistar雌性大鼠,普通飼料加蒸餾水飼養(yǎng)一周后隨機分為4組。 對正常對照(Nc)組(24只)實施假甲狀腺切除術(shù):10%水合氯醛溶液麻醉,備皮,切開頸部皮膚,鈍性分離結(jié)締組織,僅暴露甲狀腺而不損傷甲狀腺,隨即縫合。術(shù)后飼以普通飼料和蒸餾水。每兩天記錄一次體重。 L-T_4處理組和甲減(HT)組(8只)實施甲狀腺全切術(shù):10%水合氯醛溶液麻醉,備皮,切開頸部皮膚,鈍性分離結(jié)締組織和胸骨舌骨肌,切斷雙側(cè)甲狀腺肌,摘除兩側(cè)和峽部甲狀腺,縫合。術(shù)后飼以普通飼料和高鈣水(0.1%碳酸氫鈣)。每兩天記錄一次體重。 5周后大鼠體重相對穩(wěn)定,用大鼠固定器固定甲狀腺全切后的大鼠,剪尾取血,3000轉(zhuǎn)離心20分鐘,分離血清,存入Eppendrof管中,—4℃冰箱中保存,血清TSH、TT_4由固相化學發(fā)光酶免疫分析(ICMA)法檢測(DPC,USA)。 給與NC組和HT組每天腹部皮下注射安慰劑(PBS溶液)。 L-T_4處理Ⅰ組(8只)每天腹部皮下注射劑量為0.95μg/100g體重的L—T_4,L-T_4處理Ⅱ組(8只)每天腹部皮下注射劑量為1.00μg/100g體重的L-T_4。每天注射一次,連續(xù)注射16天,第17天處死大鼠。體重波動在15克之內(nèi),以最初配液時所采用的體重;超過15克,重新計算平均體重,重新配液。 第17天,水合氯醛麻醉后,上腹正中切口,游離肋骨,心臟采血,3000轉(zhuǎn)離心20分鐘,分離血清,存入Eppendrof管中,—4℃冰箱中保存,待測血清TSH、TT_4。 心臟取血后,穿刺針從左心室進入主動脈,剪開右心耳,迅速灌注600ml左右生理鹽水。心臟灌注后,迅速取部分肝、腎組織,稱重,液氮罐內(nèi)冷凍后放入—70℃冷凍箱內(nèi)保存,測定前肝、腎按照1∶3的比例加入勻漿緩沖液在冰塊環(huán)境中制備勻漿,離心后取上清待測肝腎T_4、T_3。 當實驗組血清TSH高于對照組,而實驗組TT_4和對照組沒有統(tǒng)計學差異,提示亞臨床甲減鼠建模成功。取正常組數(shù)據(jù)的90%可信區(qū)間為正常值范圍,計算成功率。 結(jié)果 HT組血清TSH水平(3.81±1.14 mIU/L)顯著高于NC組和L-T_4處理組(P＜0.01),血清TT_4水平檢測不到。 L-T_4處理Ⅰ組血清TSH水平顯著高于NC組(0.394±0.029 mIU/L VS 0.071±0.022 mIU/L,P＜0.01),血清TT_4水平和NC組沒有差異(4.01±0.92μg/dL VS4.06±0.96μg/dL,P=0.650)。 L-T_4處理Ⅱ組血清TSH水平顯著高于NC組(0.325±0.033 mIU/L VS 0.071±0.022 mIU/L,P＜0.01),血清TT_4水平和NC組沒有差異(4.13±1.27μg/dL VS4.06±0.96μg/dL,P=0.650)。 NC組血清TSH水平的90%可信區(qū)間為0.016 mIU/L～0.239 mIU/L,血清TT_4水平的90%可信區(qū)間為2.33μg/dL～5.98μg/dL。L-T_4處理Ⅰ組符合亞臨床甲減診斷標準的有6例,成功率為75%;L-T_4處理Ⅱ組符合亞臨床甲減診斷標準的有4例,成功率為50%。 L-T_4處理Ⅰ組腎臟TT_4水平和NC組比較沒有差異(18.48±2.35 ng/g VS20.26±3.08 ng/g,P=0.215),腎臟TT_3水平顯著低于NC組(1.63±0.74 ng/g VS2.90±1.09 ng/g,P＜0.05);L-T_4處理Ⅰ組肝臟TT_4水平和NC組沒有差異(35.14±5.58 ng/g VS 37.97±4.71 ng/g,P=0.290),肝臟TT_3水平顯著低于NC組(1.79±0.84 ng/g VS 3.04±1.17 ng/g,P＜0.05)。 L-T_4處理Ⅱ組腎臟TT_4水平和NC組比較沒有差異(18.94±2.47 ng/g VS20.26±3.08 ng/g,P=0.359),腎臟TT_3水平顯著低于NC組(1.58±0.77 ng/g VS2.90±1.09 ng/g,P＜0.05);L-T_4處理Ⅱ組肝臟TT_4水平和NC組沒有差異(35.65±5.07 ng/g VS 37.97±4.71 ng/g,P=0.358),肝臟TT_3水平顯著低于NC組(1.88±0.92 ng/g VS 3.04±1.17 ng/g,P＜0.05)。 結(jié)論 對大鼠采用甲狀腺全切術(shù),再皮下注射劑量為0.95μg/100g體重的L-T_4可以成功獲得亞臨床甲減的動物模型。
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【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R-332;R581.2

【引證文獻】

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1 王秋虹;魏軍平;;亞臨床甲狀腺功能減退癥實驗研究進展[J];福建中醫(yī)藥;2012年04期

2 潘立文;;溫腎方對亞臨床甲減雌鼠血清甲狀腺功能的影響[J];湖北中醫(yī)雜志;2011年10期

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1 潘立文;溫腎方對亞臨床甲減大鼠血管損傷的影響的實驗研究[D];湖北中醫(yī)藥大學;2012年

2 楊瑞霞;溫腎方對亞臨床甲狀腺功能減退大鼠模型心臟損害的防治作用機理研究[D];湖北中醫(yī)藥大學;2012年

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1 劉德志;DTC術(shù)后患者圍~(131)I核素治療期間脂代謝變化研究[D];吉林大學;2012年

2 王秋虹;亞臨床甲狀腺功能減退癥中醫(yī)體質(zhì)特征及與證型相關(guān)性研究[D];中國中醫(yī)科學院;2013年

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本文編號：2463274