【摘要】：目的:檢測G蛋白偶聯(lián)雌激素受體(GPER)在小鼠睪丸引帶上的存在情況,并進(jìn)一步探討已烯雌酚(DES)影響小鼠睪丸引帶細(xì)胞的非基因效應(yīng),從睪丸外因素初步了解外源性雌激素影響雄性生殖系統(tǒng)的可能機(jī)制。方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法了解GPER在不同發(fā)育時期(孕17、19 d,生后0、3、7、14和21 d)小鼠睪丸引帶上的表達(dá)分布情況,并利用免疫電鏡進(jìn)行亞細(xì)胞水平的定位。將培養(yǎng)傳代的小鼠睪丸引帶細(xì)胞隨機(jī)分為3組:實驗組(DES組),經(jīng)典雌激素核受體阻斷劑亦是GPER激動劑ICI 182780干預(yù)組(ICI 182780-DES組)和GPER阻斷劑G15干預(yù)組(G15-DES組)。利用Western Blot方法檢測不同組別中DES對其ERK通路的影響。結(jié)果:GPER存在于不同發(fā)育時期的小鼠睪丸引帶內(nèi)層疏松間葉組織區(qū),主要表達(dá)于引帶細(xì)胞的細(xì)胞膜及細(xì)胞漿上;免疫電鏡顯示GPER顆粒主要錨定在小鼠睪丸引帶細(xì)胞的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,表達(dá)量少。Western blot方法發(fā)現(xiàn)DES對ERK通路上p-ERK1/2的抑制作用可被GPER阻斷劑G15阻斷,但預(yù)先加入ER阻斷劑ICI 182780后沒有得到類似的反轉(zhuǎn)現(xiàn)象。結(jié)論:GPER持續(xù)存在小鼠睪丸引帶的各個發(fā)育階段,表達(dá)于引帶細(xì)胞的膜性結(jié)構(gòu)上;DES對小鼠睪丸引帶的快速非基因效應(yīng)至少部分是通過GPER介導(dǎo)的。以睪丸引帶為研究對象,探討DES影響雄性生殖系統(tǒng)發(fā)育的可能機(jī)制,可為其他迫切需要進(jìn)行效應(yīng)評價研究的環(huán)境雌激素提供一個新的實驗參考系統(tǒng)。
[Abstract]:Objective: to detect the presence of G-protein-coupled estrogen receptor (GPER) in mouse testicular banding, and to further explore the non-genetic effect of diethylstilbestrol (DES) on mouse testicular banding cells. The possible mechanism of the effect of exogenous estrogen on the male reproductive system was preliminarily understood from the extratesticular factors. Methods: immunohistochemical method was used to study the expression and distribution of GPER in testis of mice at different developmental stages (17, 19 days, 0, 3, 7, 14 and 21 days after birth), and the localization of subcellular level was carried out by immunoelectron microscope (IEM) in different stages of development (17 and 19 days of gestation, 0, 3, 7, 14 and 21 days after birth). Three groups were randomly divided into three groups: experimental group (DES group), classical estrogen receptor blocker ICI 182780 intervention group (ICI 182780-DES group) and GPER blocker G15 intervention group (G15-DES group). Western Blot method was used to detect the effect of DES on ERK pathway in different groups. Results: GPER was present in the loose interlobar tissue in the inner layer of the testis of mice at different developmental stages, and was mainly expressed on the cell membrane and cytoplasm of the striated cells. Immunoelectron microscopy showed that GPER granules were mainly anchored in the rough endoplasmic reticulum of mouse testicular lead cells, and the inhibitory effect of DES on p-ERK1/2 in ERK pathway could be blocked by GPER blocker G15 by the method of less. Western blot expression. However, there was no similar reversal phenomenon after adding ER blocker ICI 182780 in advance. Conclusion: GPER continues to exist at all developmental stages of mouse testicular banding, which is expressed in the membrane structure of mouse testicular banding cells, and the rapid non-gene effect of DES on mouse testicular banding is mediated at least in part by GPER. In order to explore the possible mechanism of DES affecting the development of male reproductive system, a new experimental reference system was provided for other environmental estrogens which urgently need to evaluate the effect of testicular crest.
【作者單位】： 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院小兒外科;深圳大學(xué)附屬婦女兒童醫(yī)院小兒外科;汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院兒科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81341099,81170555)
【分類號】：R339.21

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 鄧汪東,蔣學(xué)武,李建宏,賴亞曼,陳中獻(xiàn),黃天華;己烯雌酚致胚胎期睪丸引帶形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)育異常的研究[J];癌變.畸變.突變;2005年02期

2 張鏇;蔣學(xué)武;李建宏;馬廉;黃天華;;小鼠睪丸引帶細(xì)胞的培養(yǎng)及己烯雌酚對培養(yǎng)睪丸引帶細(xì)胞的影響[J];中華男科學(xué)雜志;2009年10期

3 蔣學(xué)武,陳中獻(xiàn),陳紹基,王光義;先天性尿道下裂患兒陰莖組織中多種性激素受體的比較研究[J];中國男科學(xué)雜志;2000年01期

4 ;Effect of prenatal exposure to diethylstilbestrol on gubernacular development in fetal male mice[J];Asian Journal of Andrology;2004年04期

5 胡廷澤;蔣學(xué)武;劉文英;王明和;胡顯良;黃魯剛;;青春期前小陰莖患兒的臨床和內(nèi)分泌觀察[J];中華小兒外科雜志;1997年01期

6 蔣學(xué)武,鄧汪東,胡顯良,李建宏,林涵,賴亞曼,陳中獻(xiàn),黃天華;外源性雌激素對小鼠睪丸引帶收縮和增殖活性的影響[J];中華小兒外科雜志;2005年09期

7 王光義，陳紹基，蔣學(xué)武，黃魯剛，，雷剛;尿道下裂伴陰莖發(fā)育不良的內(nèi)分泌改變及治療[J];中華小兒外科雜志;1995年01期

8 蔣學(xué)武，陳紹基，王光義，黃魯剛，姚先瑩;先天性尿道下裂陰莖雄激素受體的研究[J];中華小兒外科雜志;1995年03期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王廣歡;段守興;李建宏;張鏇;蔣學(xué)武;;己烯雌酚影響培養(yǎng)的睪丸引帶細(xì)胞收縮及其信號機(jī)制[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2012年15期

2 黃永興;小兒隱匿陰莖誤治后的矯治[J];廣西醫(yī)學(xué);2002年10期

3 黃永興;小兒隱匿陰莖的診斷和治療[J];廣西醫(yī)學(xué);1998年03期

4 張飛虎;李健;靳冠通;王宏偉;周變?nèi)A;劉妍妍;黃春陽;趙文鵬;;炔雌醚暴露對幼年小鼠睪丸發(fā)育及增殖細(xì)胞核抗原、半胱氨酸蛋白酶-3表達(dá)的影響[J];中國畜牧獸醫(yī);2014年03期

5 石歡;沈山梅;;胰島素樣因子3及其在多囊卵巢綜合征中的作用[J];國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2014年02期

6 徐英江;孫巖;任傳博;薛敬林;劉慧慧;田秀慧;黃會;宮向紅;;己烯雌酚及代謝物在草魚(Ctenopharynodon idellus)體內(nèi)的組織分布及藥物代謝動力學(xué)研究[J];現(xiàn)代食品科技;2014年06期

7 鄭麗華;程忠平;;雌激素跨膜受體GPR30及其在子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌中的研究進(jìn)展[J];國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2014年04期

8 文貴成;;不同術(shù)式修復(fù)尿道下裂5年診治體會[J];大理學(xué)院學(xué)報;2015年02期

9 阮姝琴;李剛;王善偉;韓萍;楊志祥;;乳腺癌GPR30、HRG1和HER2表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2015年07期

10 侯麗萍;舒琥;劉珊;趙建亮;方展強(qiáng);;廣東四會鄧村河水體的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)研究[J];環(huán)境科學(xué)與技術(shù);2015年05期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前7條

1 馮政夫;櫛孔扇貝Cf-dmrt4-like基因的克隆、表達(dá)及功能分析[D];中國海洋大學(xué);2010年

2 王艷萍;尿道下裂相關(guān)基因的突變研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

3 趙清;鄰苯二甲酸二丁酯和苯并（a）芘對Leydig細(xì)胞激素合成的影響及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

4 楊艷峰;GPR30介導(dǎo)的雌激素非經(jīng)典途徑在子宮腺肌病發(fā)病機(jī)制中的研究[D];浙江大學(xué);2013年

5 羅浩軍;乳腺癌CAF中GPER介導(dǎo)的雌激素效應(yīng)及其在腫瘤他莫昔芬耐受中的作用探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

6 田瑞娟;雌激素受體GPR30在人子宮肌瘤以及血管平滑肌細(xì)胞中的作用和機(jī)理研究[D];南開大學(xué);2013年

7 蔡美娟;G蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)的蛻皮激素非基因組途徑和保幼激素抑制變態(tài)的分子機(jī)理[D];山東大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 黃錦文;HCG與口服十一酸睪酮治療小陰莖的臨床療效觀察[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2011年

2 段守興;DES及INSL3對體外培養(yǎng)小鼠睪丸引帶細(xì)胞中LGR8轉(zhuǎn)錄和表達(dá)的影響[D];汕頭大學(xué);2011年

3 楊新彬;己烯雌酚對小鼠睪丸引帶組織中胰島素樣因子3受體LGR8的影響[D];汕頭大學(xué);2011年

4 祁艷衛(wèi);胰島素樣因子3對培養(yǎng)小鼠睪丸引帶細(xì)胞的影響[D];汕頭大學(xué);2011年

5 林涵;小鼠睪丸引帶的附著及外源性雌激素對引帶結(jié)構(gòu)成分的影響[D];汕頭大學(xué);2004年

6 李麗霞;正常兒童青春期性發(fā)育規(guī)律調(diào)查及分析[D];青島大學(xué);2005年

7 戎冬文;兔先天性尿道下裂包皮血管變異三維重建的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2006年

8 謝肖俊;己烯雌酚（DES）對小鼠睪丸促性腺激素及其受體影響的實驗性研究[D];汕頭大學(xué);2006年

9 劉強(qiáng);新生小鼠睪丸和睪丸引帶形態(tài)結(jié)構(gòu)及外源性雌激素DES對其影響的顯微連續(xù)研究[D];汕頭大學(xué);2007年

10 柯坤彬;雌激素受體（ERa、ERβ）、雌二醇與先天性尿道下裂的研究[D];中南大學(xué);2007年

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 黃幸紓;環(huán)境內(nèi)分泌干擾化學(xué)物與人類健康[J];癌變.畸變.突變;1999年06期

2 李江源;陰莖過小:標(biāo)準(zhǔn)、病因和分類[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊;1981年04期

3 謝肖俊;蔣學(xué)武;;胰島素樣激素3與睪丸引帶發(fā)育和睪丸下降[J];中華男科學(xué)雜志;2006年01期

4 吳正蓉;Rho GTP酶對肌動蛋白細(xì)胞骨架的作用[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);2002年01期

5 ;Effect of prenatal exposure to diethylstilbestrol on gubernacular development in fetal male mice[J];Asian Journal of Andrology;2004年04期

6 龔春雨,黃魯剛,李虹,魏強(qiáng),羅琦,李響;己烯雌酚建立尿道下裂大鼠模型的實驗研究[J];中華小兒外科雜志;2004年02期

7 王廣歡,李建宏,蔣學(xué)武;睪丸引帶形態(tài)和功能的研究進(jìn)展[J];中華小兒外科雜志;2004年06期

8 蔣學(xué)武,陳繼東,王少洪;小兒腎母細(xì)胞瘤中增殖細(xì)胞核抗原的表達(dá)及其臨床意義[J];中國實驗診斷學(xué);2000年01期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 龔未;潘林林;林強(qiáng);周媛媛;辛成齊;俞曉敏;崔鵬;胡松年;于軍;;基于新一代測序方法的小鼠睪丸出生后發(fā)育的轉(zhuǎn)錄組研究[J];中國科學(xué):生命科學(xué);2013年02期

2 黃良田;促甲狀腺激素釋放激素受體基因在小鼠睪丸中的表達(dá)[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1997年03期

3 袁青,徐晨,張小瑾,陳海珍,王一飛;胱蛋白酶抑制劑相關(guān)的附睪精子發(fā)生基因在不同發(fā)育階段小鼠睪丸和附睪中的表達(dá)[J];中華男科學(xué);2004年03期

4 寧紅梅;楊雪峰;徐之勇;葛亞明;趙恒章;田雷;;鎘對生長發(fā)育期小鼠睪丸的組織學(xué)影響[J];畜牧與獸醫(yī);2012年S1期

5 張紅,張煦,鄭榮梁,高清祥,衛(wèi)增泉,李文建,陳衛(wèi)強(qiáng),梁劍平,韓光武,黃濤,頡紅梅;小劑量~(16)O~(8+)離子預(yù)輻射減輕大劑量輻射所致小鼠睪丸組織損傷(英文)[J];實驗生物學(xué)報;2000年02期

6 趙燕凌;張斌;宋國華;劉茂林;高繼平;;氟化鈉對小鼠睪丸組織的損傷及細(xì)胞凋亡的影響[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2012年01期

7 張遠(yuǎn)強(qiáng),張舒華,劉新平,L.L.Vacca-Galloway;促甲狀腺激素釋放激素受體基因在小鼠睪丸中的表達(dá)[J];科學(xué)通報;1996年06期

8 趙超英,尤育洲,姚小曼;六種化合物誘發(fā)小鼠睪丸初級精母細(xì)胞染色體畸變實驗研究[J];癌變.畸變.突變;2000年03期

9 楊三平;申秀英;吳益;趙倩;阮琴;;釤對小鼠睪丸組織超微結(jié)構(gòu)的影響[J];中國環(huán)境科學(xué);2011年11期

10 徐邦生,蔡云平;小鼠睪丸、附睪發(fā)育過程中的形態(tài)學(xué)研究[J];交通醫(yī)學(xué);2001年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 朱葉飛;馬翔;冒韻東;王蕾;劉勸;謝滿鑫;趙欣;孟艷;周作民;沙家豪;;小鼠睪丸二維電泳參照圖[A];21世紀(jì)男科學(xué)——中華醫(yī)學(xué)會第五次全國男科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

2 江燕;李水冰;錢偉;;不同年齡小鼠睪丸生殖細(xì)胞凋亡的研究[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（上冊）[C];2001年

3 肖長義;王雅琴;黎家華;;小鼠睪丸生精小管內(nèi)殘余物質(zhì)形成及轉(zhuǎn)歸[A];中國解剖學(xué)會2012年年會論文文摘匯編[C];2012年

4 陳敏;謝吉民;宋霞;李敏智;;五種螯合劑對鎘致小鼠睪丸毒性的解毒作用比較[A];第四屆全國環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)研究生學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

5 阮海星;吳克楓;;不同劑量的環(huán)磷酰胺對小鼠睪丸染色體畸變的影響[A];中國環(huán)境誘變劑學(xué)會抗誘變劑和抗癌劑專業(yè)委員會第三次全國學(xué)術(shù)會議、中國毒理學(xué)會生化與分子毒理專業(yè)委員會第五屆學(xué)術(shù)交流會、貴州省環(huán)境誘變劑學(xué)會成立大會暨首屆學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2004年

6 寧紅梅;楊雪峰;徐之勇;葛亞明;趙恒章;田雷;;鎘對生長發(fā)育期小鼠睪丸的組織學(xué)影響[A];全國動物生理生化第十二次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2012年

7 張曉彥;張建海;陳書明;;三聚氰胺對小鼠睪丸p38 MAPK信號通路影響的研究[A];全國動物生理生化第十二次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2012年

8 鄧雯;呂瓊霞;劉玉梅;;檸檬酸對小鼠睪丸組織抗氧化作用的影響[A];全國動物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2010年

9 武惠珍;王貴娟;劉貴生;雷建章;;混合除草劑對小鼠睪丸超微結(jié)構(gòu)的毒性影響[A];第十三屆全國電子顯微學(xué)會議論文集[C];2004年

10 張波;;有機(jī)磷農(nóng)藥氧化樂果對小鼠睪丸細(xì)胞DNA的損傷[A];中國毒理學(xué)會第四屆全國學(xué)術(shù)會議論文（摘要）集[C];2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 朱葉飛;加熱致小鼠睪丸生精障礙相關(guān)蛋白質(zhì)及其功能的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

2 金明華;苯并（a）芘對小鼠睪丸細(xì)胞毒作用及其相關(guān)機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2007年

3 王麗雅;ART操作對雄性小鼠睪丸組織基因表達(dá)和脂類代謝影響及其機(jī)理研究[D];浙江大學(xué);2013年

4 胡濤;小鼠睪丸特異性表達(dá)基因TSEG-2的功能初步研究[D];華中科技大學(xué);2010年

5 趙慶國;GGNBP1和GGN2在小鼠睪丸中的表達(dá)及相互作用研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

6 胡廉;RNAi調(diào)控雄性小鼠睪丸uPA表達(dá)的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 拜瀟;微囊藻毒素暴露對小鼠睪丸的生理生化影響[D];河南師范大學(xué);2012年

2 王群;雙酚A誘導(dǎo)小鼠睪丸生殖細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

3 張鵬飛;檸檬酸對小鼠睪丸組織抗氧化酶活性的影響[D];河南科技大學(xué);2012年

4 祁艷衛(wèi);胰島素樣因子3對培養(yǎng)小鼠睪丸引帶細(xì)胞的影響[D];汕頭大學(xué);2011年

5 蔣爾鵬;p38MAPK在小鼠睪丸不同發(fā)育階段及實驗性隱睪中的表達(dá)[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

6 黃成竹;Elkl在小鼠睪丸和卵巢中的表達(dá)規(guī)律[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

7 魏瑞芬;氟對小鼠睪丸免疫毒性的研究及精子雙向電泳圖譜的構(gòu)建[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

8 張瑩;小鼠睪丸發(fā)育過程睪丸特異基因表達(dá)與不育的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

9 黃禮元;吸煙小鼠睪丸蛋白組差異研究：PEBP1對吸煙后小鼠睪丸精子發(fā)生功能影響的可能機(jī)制[D];上海交通大學(xué);2012年

10 王菲菲;NYD-SP5基因在小鼠睪丸中的表達(dá)及NYD-SP5干擾載體的構(gòu)建[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

本文編號：2458127