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臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的內(nèi)皮分化及其與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的對比研究

發(fā)布時間:2019-04-09 08:57
【摘要】:間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)作為組織工程的種子細(xì)胞具有良好的應(yīng)用前景。而通過組織工程得到的新生組織的新血管生成越來越成為制約組織工程發(fā)展的關(guān)鍵因素。在本次研究中,由臍帶沃頓膠質(zhì)組織(Wharton’s Jelly)分離所得的間充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSCs)經(jīng)內(nèi)皮細(xì)胞分化誘導(dǎo)后可分化成內(nèi)皮細(xì)胞,并首次就其內(nèi)皮分化能力與骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)進(jìn)行了較為全面的比較。 UCMSCs與BMMSCs具有相似的梭形成纖維細(xì)胞狀的細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)分析表明二者均表達(dá)典型間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)志物且表達(dá)水平相當(dāng),且堿性磷酸酶活性染色和Von Kossa染色表明二者均具有類似的以成骨分化為典型代表的多向分化能力。然而,UCMSCs比BMMSCs具有更快的增殖速度和更強(qiáng)的增殖能力。 經(jīng)內(nèi)皮分化誘導(dǎo)后,免疫熒光細(xì)胞化學(xué)分析和實(shí)時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-Time PCR)分析均表明UCMSCs比BMMSCs表達(dá)更高水平的三種內(nèi)皮細(xì)胞特征性標(biāo)志蛋白;微血管生成能力的檢測也表明UCMSCs比BMMSCs具有更強(qiáng)的微血管生成能力;低密度脂蛋白吸收能力的檢測表明二者具有相似的低密度脂蛋白吸收能力。以上結(jié)果表明臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSCs)比骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)具有更強(qiáng)的內(nèi)皮細(xì)胞分化能力。 另外,與骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)相比,由于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSCs)來源于免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完善的新生兒臍帶,所以UCMSCs作為組織工程的種子細(xì)胞在進(jìn)行移植后引起免疫排斥機(jī)率相對較小,而且由于臍帶傳統(tǒng)上作為醫(yī)療廢棄物,所以臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSCs)的來源也具有易獲得性。以上這些數(shù)據(jù)表明,與骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)相比,臍帶沃頓膠組織(Wharton’s Jelly)來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSCs)可以成為組織工程中新血管形成及血管損傷相關(guān)疾病的治療中的更理想的細(xì)胞來源的選擇。
[Abstract]:As seed cells of tissue engineering, mesenchymal stem cells (MSCs) have good application prospects. The neovascularization of new tissue by tissue engineering is becoming the key factor to restrict the development of tissue engineering. In this study, mesenchymal stem cells (UCMSCs) isolated from umbilical cord Wharton glial tissue (Wharton's Jelly) could differentiate into endothelial cells after induced by endothelial cell differentiation. The ability of endothelial differentiation was compared with that of bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMMSCs) for the first time. UCMSCs and BMMSCs had similar cell morphology of spindle forming fiber. Flow cytometry analysis showed that both of them expressed typical mesenchymal stem cell markers and expressed at the same level. Alkaline phosphatase activity staining and Von Kossa staining showed that both of them had similar ability of multidirectional differentiation represented by osteogenic differentiation. However, UCMSCs has faster proliferation speed and stronger proliferation ability than BMMSCs. After induction of endothelial differentiation, immunofluorescence cytochemical analysis and real-time quantitative polymerase chain reaction (Real-Time PCR) analysis showed that the expression of UCMSCs was higher than that of BMMSCs in three characteristic marker proteins of endothelial cells. The microangiogenic ability of UCMSCs was also higher than that of BMMSCs, and the ability of LDL absorption was similar to that of LDL. These results suggest that umbilical cord mesenchymal stem cells (UCMSCs) have stronger ability of endothelial cell differentiation than bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMMSCs). In addition, compared with bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMMSCs), umbilical cord mesenchymal stem cells (UCMSCs) are derived from the umbilical cord of newborn whose immune system is not well developed. Therefore, as the seed cells of tissue engineering, the probability of immune rejection caused by UCMSCs transplantation is relatively small, and the (UCMSCs) source of umbilical cord mesenchymal stem cells is also easy to acquire because the umbilical cord is traditionally used as medical waste. These data suggest that compared with bone marrow derived mesenchymal stem cells (BMMSCs), (UCMSCs) derived from umbilical cord Wharton gum tissue derived mesenchymal stem cells (UCMSCs) may be an ideal cell source for the treatment of new angiogenesis and vascular injury-related diseases in tissue engineering.
【學(xué)位授予單位】:汕頭大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類號】:R329

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本文編號:2455019

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