【摘要】：目的觀察維生素C(Vc)能否通過升高端粒酶活性促進衰老個體來源骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)的增殖能力。方法以骨特異性早衰小鼠(SAMP6)為實驗組,不發(fā)生早衰的R品系小鼠(SAMR1)為對照組,采用顯微CT掃描技術(shù)驗證SAMP6小鼠的骨衰老表型。分離培養(yǎng)兩組小鼠的BMMSCs,其中SAMP6小鼠來源的BMMSCs分別應(yīng)用不同濃度的Vc進行處理。采用MTT法檢測BMMSCs的增殖能力,繪制生長曲線,使用端粒酶試劑盒檢測端粒酶活性,并用PCR和Western blot方法檢測端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)的表達(dá)水平。結(jié)果 SAMP6小鼠具有骨衰老表型,SAMP6小鼠來源的BMMSCs的增殖能力和端粒酶活性均低于SAMR1小鼠來源的BMMSCs,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。加入Vc后,在一定濃度范圍內(nèi)SAMP6小鼠來源的BMMSCs增殖能力隨Vc濃度的升高而顯著改善(P0.05),同時其端粒酶活性和TERT表達(dá)水平有所提高(P0.05),與增殖能力具有相關(guān)性。其中,Vc發(fā)揮促進作用的最適濃度為100μg/m L,在1000μg/m L時有抑制作用。結(jié)論維生素C能夠增強衰老個體來源BMMSCs的增殖能力,且這種作用可能是通過升高端粒酶活性實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate whether vitamin C (Vc) can promote the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSCs) from aging individuals by increasing telomerase activity. Methods using bone-specific premature aging mice (SAMP6) as experimental group and R strain mice (SAMR1) without premature senescence as control group, bone aging phenotype of SAMP6 mice was verified by microCT scanning technique. The BMMSCs, of two groups of mice were isolated and cultured. The BMMSCs derived from SAMP6 mice were treated with different concentrations of Vc. The proliferation ability of BMMSCs was detected by MTT method, the growth curve was drawn, telomerase activity was detected by telomerase assay kit, and the expression level of telomerase reverse transcriptase (TERT) was detected by PCR and Western blot methods. Results SAMP6 mice had bone senescence phenotype. The proliferation ability and telomerase activity of BMMSCs derived from SAMP6 mice were significantly lower than those of BMMSCs, from SAMR1 mice (P0.05). After adding Vc, the proliferation ability of BMMSCs derived from SAMP6 mice was significantly improved with the increase of Vc concentration (P0.05), and the telomerase activity and TERT expression level were increased (P0.05), which was correlated with the proliferation ability. The optimum concentration of Vc was 100 渭 g / mL and inhibited at 1000 渭 g / mL. Conclusion Vitamin C can enhance the proliferation of BMMSCs in senescent individuals, and this effect may be achieved by increasing telomerase activity.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)組織工程研發(fā)中心;第四軍醫(yī)大學(xué)軍事口腔醫(yī)學(xué)國家重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31301062)~~
【分類號】：R329

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本文編號：2449596