【摘要】： [目的】 內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells, EPCs)的研究越來越受到關(guān)注。EPCs不僅維持正常脈管系統(tǒng)的生理功能,而且主導病理狀態(tài)下的血管再生與修復。但目前對于顱腦創(chuàng)傷后的血管生成研究尚不多見。本研究組前期研究發(fā)現(xiàn)了顱腦創(chuàng)傷(traumatic brain injury, TBI)患者循環(huán)血中EPCs隨病程呈先低后高的變化規(guī)律,本研究擬對比研究TBI以及非創(chuàng)傷應激對大鼠循環(huán)血EPCs動態(tài)變化的影響,以確立TBI大鼠EPCs是否為特異性變化,并探索可能影響其變化的因素,為進一步治療干預TBI提供可參考的理論依據(jù)。 [材料與方法] 健康成年雄性Wistar大鼠36只(體重250-300g,鼠齡7周),分為腦創(chuàng)傷組(TBI)、電休克組(electroconvulsive shock, ECS)、冷水游泳組(cold water swim,CWS)和正常對照組(control,CON)。TBI模型建立：在顱骨前囟后3mm,矢狀縫側(cè)方2mm鉆直徑3mm的骨孔,應用大鼠液壓(Fluid-Percussion injury, FPI)打擊儀以1atm的打擊力度致傷；ECS組建立：在大鼠清醒狀態(tài)下,用鼠耳夾電極分別夾住生理鹽水濕潤的鼠耳,給予電刺激,刺激電流強度為90mA,時間1秒。刺激后大鼠立即意識不清,并出現(xiàn)持續(xù)數(shù)秒的身體及四肢強直痙攣；CWS組建立：在直徑1.5米的圓柱形容器中儲4℃水20cm深,放置清醒大鼠持續(xù)游泳3分鐘。分別于創(chuàng)傷或其他應激實施前24h和實施后3h、6h、24h、48h、72h、168h、取大鼠內(nèi)眥球后靜脈叢血液約0.6ml,采用Ficoll密度梯度離心法分離大鼠循環(huán)血單個核細胞,以CD34、CD133雙抗體陽性作為EPCs標志,應用流式細胞儀(flow cytometer, FCM)測定大鼠循環(huán)血中EPCs數(shù)量。應用小動物血細胞分析儀完成其他血細胞的測定。 [結(jié)果] 1.大鼠循環(huán)血中存在表達CD34/CD133雙陽性的EPCs,正常大鼠循環(huán)血中EPCs為33～57個／20萬單個核細胞,平均為42個／20萬單個核細胞。 2.腦創(chuàng)傷后,大鼠血中EPCs3小時明顯下降到正常值以下(創(chuàng)傷前的36.96%),至10-24個／20萬單個核細胞；然后迅速升高,到6小時明顯超過正常水平(比創(chuàng)傷前增高60.54%),24小時再回落到正常水平,P0.05。 3.電刺激后,大鼠循環(huán)血EPCs3小時也明顯增高(增高56.92%),持續(xù)到24小時達高峰(增高78.61%),到72小時回到正常水平。P0.05。 4.冷刺激后,大鼠循環(huán)血EPCs3小時就明顯增高(增高38.31%),持續(xù)到48小時,6小時(增高64.74%)和24小時最明顯(增高79.21%),72小時降低回到正常水平。P0.05。 5.三個實驗組應激后各時間點的EPCs變化與對照組比較,其差異有統(tǒng)計學意義。 6.TBI、ECS、CWS后大鼠循環(huán)血血小板和白細胞都有明顯增高。 [結(jié)論] 1.CD34、CD133雙抗體標記技術(shù)結(jié)合流式細胞儀檢測可實現(xiàn)對大鼠循環(huán)血中EPCs的定量測定。 2.兩種非創(chuàng)傷應激對大鼠EPCs的數(shù)量影響比較相似,EPCs均出現(xiàn)增高趨勢。非創(chuàng)傷應激可以促進大鼠循環(huán)血EPCs的動員,為急性應激成為機體保護機制提供一種理論依據(jù)。 3.大鼠液壓模型腦損傷后EPCs變化特征與TBI患者傷后循環(huán)血中EPCs的變化特征相似,TBI后大鼠循環(huán)血的EPCs水平同樣存在先降低,后增高的變化特征。 4.各種應激后大鼠循環(huán)血中的EPCs的數(shù)量變化與血小板和白細胞數(shù)量均無顯著相關(guān)。 5.TBI大鼠循環(huán)血EPCs一過性降低,可能并非由于機體應激不足或動員受抑制,而是損傷組織的消耗導致。這可能是補充或動員EPCs可在未來用于顱腦創(chuàng)傷治療的理論依據(jù)之一。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R363

【共引文獻】

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本文編號：2449488