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尼古丁對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞激活及活化后細(xì)胞死亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-02-18 10:34
【摘要】:目的觀察尼古丁對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞激活及活化后細(xì)胞死亡的影響。方法建立慢性尼古丁暴露的小鼠動(dòng)物模型,腹腔注射LPS誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞激活,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察皮質(zhì)、海馬、黑質(zhì)CD-11b陽性小膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的變化;BV2細(xì)胞(小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞系)傳代培養(yǎng),運(yùn)用CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活性,一氧化氮檢測(cè)試劑盒檢測(cè)一氧化氮(NO)釋放情況,RT-PCR分析誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細(xì)胞介素1(IL-1β)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、環(huán)氧化酶-2(COX-2)、干擾素調(diào)節(jié)因子1(IRF-1)、Caspase-11mRNA的表達(dá),免疫印跡法分析P-I-κB、Caspase-3的表達(dá)變化。結(jié)果尼古丁抑制LPS誘導(dǎo)的皮質(zhì)、海馬、黑質(zhì)CD-11b陽性小膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá);尼古丁抑制LPS刺激引起的BV2細(xì)胞的死亡,NO的釋放,iNOS、TNF-αI、L-1βI、L-6、COX-2I、RF-1、Caspase-11 mRNA的表達(dá),P-I-κB、Caspase-3蛋白的表達(dá)。結(jié)論尼古丁可以抑制LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞活化及激活誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡(AICD),對(duì)腦內(nèi)炎癥反應(yīng)具有神經(jīng)保護(hù)作用。
[Abstract]:Objective to observe the effect of nicotine on the activation and cell death of lipopolysaccharide (LPS)-induced microglia. Methods LPS was injected intraperitoneally to induce microglia activation, and the expression of CD-11b positive microglia in cortex, hippocampus and substantia nigra was observed by immunohistochemical method. BV2 cells (mouse glioma cell line) were subcultured. The cell activity was detected by CCK-8 kit, nitric oxide (NO) release was detected by nitric oxide assay kit, and inducible nitric oxide synthase (iNOS),) was analyzed by RT-PCR. The expression of tumor necrosis factor (TNF- 偽), interleukin 1 (IL-1 尾), interleukin 6 (IL-6), cyclooxygenase-2 (COX-2), interferon regulatory factor 1 (IRF-1), and Caspase-11mRNA were detected. The expression of P-I- 魏 B caspase-3 was analyzed by Western blot. Results nicotine inhibited the expression of CD-11b positive microglia in cortex, hippocampus and substantia nigra induced by LPS. Nicotine inhibited the death of BV2 cells induced by LPS, the release of NO, the expression of Caspase-11 mRNA and the expression of P-I- 魏 Bmcaspase-3 protein. Conclusion nicotine can inhibit the activation of microglia induced by LPS and the activation of (AICD), induced cell death.
【作者單位】: 中國醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院發(fā)育生物學(xué)教研室;中國醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院耳鼻咽喉科;
【分類號(hào)】:R363

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本文編號(hào):2425788


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