【摘要】：目的:構(gòu)建出HEV Ch-S-1株的全長c DNA克隆,并轉(zhuǎn)染至Hep G2細(xì)胞并對其表達(dá)進(jìn)行初步研究。方法:利用重疊PCR方法獲得HEV Ch-S-1株全長PCR產(chǎn)物;構(gòu)建體外轉(zhuǎn)錄載體p KS-HEV,成功獲得HEV基因組RNA,并轉(zhuǎn)染至Hep G2細(xì)胞,通過RT-n PCR、套式PCR和間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測病毒的表達(dá)。結(jié)果:成功構(gòu)建了HEV基因組全長c DNA體外轉(zhuǎn)錄載體p KS-HEV,并證明了該c DNA克隆在Hep G2細(xì)胞中成功進(jìn)行了表達(dá)。結(jié)論:成功構(gòu)建了HEV Ch-S-1株全長體外轉(zhuǎn)錄載體p KS-HEV,并對其表達(dá)進(jìn)行了初步研究,為將來在分子水平上研究HEV及研發(fā)疫苗提供了一些實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
[Abstract]:Aim: to construct a full-length c DNA clone of HEV Ch-S-1 strain and transfect it into Hep G2 cells and study its expression. Methods: the full-length PCR products of HEV Ch-S-1 strain were obtained by overlapping PCR method. HEV genomic RNA, was constructed and transfected into Hep G2 cells by construction of in vitro transcription vector p KS-HEV,. The expression of the virus was detected by RT-n PCR, nested PCR and indirect immunofluorescence assay. Results: the full-length c DNA transcriptional vector p KS-HEV, of HEV genome was successfully constructed and the c DNA clone was successfully expressed in Hep G2 cells. Conclusion: the full-length transcriptional vector p KS-HEV, of HEV Ch-S-1 strain was successfully constructed and its expression was preliminarily studied, which provided some experimental basis for the study of HEV and the development of vaccine at molecular level in the future.
【作者單位】： 長春中藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所;
【分類號】：R373.21

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本文編號：2424776