【摘要】：目的探討腺病毒36感染對(duì)人脂肪源性間充質(zhì)干細(xì)胞過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator-activated receptor,PPARγ)和脂聯(lián)素(adiponectin)基因表達(dá)的影響。方法無(wú)菌條件下獲取人皮下脂肪組織、I型膠原酶消化并收集人脂肪源性間充質(zhì)干細(xì)胞(human adipose-derived mesenchymal stem cell,h AMSC),細(xì)胞傳至第3代(P3代)對(duì)h AMSC進(jìn)行定向成脂誘導(dǎo),并進(jìn)行油紅O染色;流式細(xì)胞儀檢測(cè)h AMSC表面免疫表型;人類(lèi)腺病毒36(adenouirus-36,Ad36)感染h AMSC,采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR(Real time-PCR)方法檢測(cè)Ad36感染的h AMSC PPARγ和adiponectin基因表達(dá)的變化規(guī)律。結(jié)果 (1)h AMSC在體外呈梭形生長(zhǎng),且能穩(wěn)定傳代;(2)細(xì)胞在加入成脂誘導(dǎo)劑后可定向分化成脂肪細(xì)胞;(3)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示h AMSC免疫表型:CD105(93.0±1.3)%,CD44(99.6±0.3)%,CD34(0.2±0.1)%,CD45(0.2±0.3)%,CD31(0.3±0.3)%,CD29(3.4±0.2)%;(4)Ad36感染h AMSC后細(xì)胞內(nèi)脂滴逐漸增多、增大。PPARγ和adiponectin基因在Ad36感染h AMSC后的第1天開(kāi)始表達(dá),感染后第2~6天較0 MOI組顯著升高(P0.05),至感染后第8天10 MOI劑量組表達(dá)水平開(kāi)始下降。結(jié)論 Ad36使h AMSC定向分化成脂肪細(xì)胞,并上調(diào)了PPARγ和adiponectin基因的表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of adenovirus 36 infection on peroxisome proliferator activated receptor (peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR 緯) and adiponectin (adiponectin) gene expression in human adipose derived mesenchymal stem cells. Methods Human subcutaneous adipose tissue was obtained under aseptic condition. Human adipose-derived mesenchymal stem cells (human adipose-derived mesenchymal stem cell,h AMSC), cells) were digested by type I collagenase and then transferred to the 3rd generation (P3 generation) to induce direct adipogenesis of AMSC. And oil red O staining; The surface immunophenotype of h AMSC was detected by flow cytometry, and the expression of h AMSC PPAR 緯 and adiponectin genes in h AMSC, infected by human adenovirus 36 (adenouirus-36,Ad36) was detected by fluorescence real time quantitative PCR (Real time-PCR. Results (1) h AMSC grew fusiform in vitro and could be subcultured stably. (2) adipocytes could be differentiated into adipocytes after adding lipogenic inducer. (3) the results of flow cytometry showed that CD105 was (93.0 鹵1.3)%, CD44 was (99.6 鹵0.3)%, CD34 was (0.2 鹵0.1)%, CD45 was (0.2 鹵0.3)%, CD31 was (0.3 鹵0.3)%. CD29 (3.4 鹵0.2)%; (4) the lipid droplets in the cells increased gradually after Ad36 infection with AMSC, and the expression of PPAR 緯 and adiponectin genes began on the first day after Ad36 infection with AMSC, and increased significantly on the 2nd day after Ad36 infection compared with 0 MOI group (P0.05). The expression level of 10 MOI dose group began to decrease on the 8th day after infection. Conclusion Ad36 can induce h AMSC to differentiate into adipocytes and up-regulate the expression of PPAR 緯 and adiponectin genes.
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室;新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30960363) 博士(后)科研啟動(dòng)基金(2012-7)
【分類(lèi)號(hào)】：R373

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2416193