【摘要】： 目的:利用氟病區(qū)煤烘玉米建立燃煤型氟斑牙大鼠模型,觀察SD大鼠食用含氟煤烘玉米后牙齒成釉細(xì)胞形態(tài)發(fā)生的改變,以及氟對(duì)大鼠牙齒發(fā)育過程中凋亡抑制基因Bcl-2、Bax在成釉細(xì)胞中表達(dá)的影響,探討燃煤型氟斑牙發(fā)生的分子機(jī)制和預(yù)防控制措施。 方法:該實(shí)驗(yàn)包括兩部分: 實(shí)驗(yàn)一燃煤型氟斑牙動(dòng)物模型的建立 1、動(dòng)物的選擇、分組及飼養(yǎng):50只3周齡的SD大鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為5組,每組10只,雌雄各5只,分籠喂養(yǎng),每12小時(shí)明暗交替,自由飲食,分別為: ①高氟組:飼以含氟量為88mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽; ②中氟組:飼以含氟量為56mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽; ③低氟組:飼以含氟量為30mg/kg的玉米,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽; ④陽性對(duì)照組:給予飲用100mg/L的氟化鈉水溶液,配料成分中玉米為不含氟的玉米,配以面粉、豆粉、魚粉、骨粉、麥麩和食鹽; ⑤陰性對(duì)照組:飲用水中含氟量為0.08ppm,飼料配方中不含氟。 2、觀察指標(biāo)及方法 ①實(shí)驗(yàn)開始時(shí)和每周后分別稱量體重,觀察大鼠一般情況,記錄體重變化。 ②在一月末和三月末分別進(jìn)行尿樣和血樣采集,用氟離子選擇電極法測(cè)定尿液和血清中氟離子的含量。 ③在一月末及三月末檢查氟斑牙的發(fā)生情況,根據(jù)氟斑牙分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)各組大鼠氟斑牙進(jìn)行記分,并在實(shí)驗(yàn)前后用游標(biāo)卡尺測(cè)量牙齒長度。 ④當(dāng)觀察到大鼠牙齒出現(xiàn)明顯的氟斑牙時(shí)即處死取材,取出牙齒和下頜骨。常規(guī)制作石蠟切片,HE染色,觀察大鼠成釉細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。 采用免疫組化方法,觀察成釉細(xì)胞中相關(guān)凋亡基因Bcl-2及Bax的表達(dá)。在光學(xué)顯微鏡下,將切片的數(shù)字化圖像輸入多媒體分析系統(tǒng),把陽性表達(dá)的強(qiáng)度轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào),對(duì)免疫組化的陽性區(qū)域的染色強(qiáng)度進(jìn)行半定量分析,每例隨機(jī)選取6個(gè)視野,測(cè)定Bcl-2及Bax免疫組化光密度值,取均值作為測(cè)量值。 結(jié)果: 1、大鼠的一般情況及體重變化:陰性對(duì)照組的大鼠被毛光滑,有光澤,反應(yīng)靈敏,實(shí)驗(yàn)組的大鼠被毛失去光澤,反應(yīng)遲鈍,陰性對(duì)照組大鼠體重增加較實(shí)驗(yàn)組明顯,差異有顯著性(P＜0.05)。 2、實(shí)驗(yàn)組大鼠血氟、尿氟水平在三月末均高于一月末,差異有顯著性(P＜0.01);實(shí)驗(yàn)組大鼠血氟、尿氟同期水平為高氟組＞中氟組＞低氟組＞陰性對(duì)照組,兩兩比較,差異有顯著性(P＜0.01)。 3、模型復(fù)制3個(gè)月后肉眼觀察到陰性對(duì)照組大鼠的牙齒呈半透明棕黃色,光滑而有光澤,實(shí)驗(yàn)組大鼠牙齒由棕黃色轉(zhuǎn)變?yōu)榈S色,部分區(qū)域有白堊色不透光改變,甚至出現(xiàn)白色條紋或斑點(diǎn),繼而形成白色斑塊。嚴(yán)重者出現(xiàn)釉質(zhì)缺損,牙齒長度磨損變短的現(xiàn)象。 4、漠型大鼠氟斑牙記分:隨著染氟時(shí)間的延長和染氟劑量的增加,實(shí)驗(yàn)組大鼠牙齒大部分棕色橫紋消失,整個(gè)牙面呈白粉筆樣,大多伴有牙體缺損;高氟組記分為3級(jí)的數(shù)量最多,達(dá)到8例,中氟組、低氟組、陽性對(duì)照組依次減少,陽性對(duì)照組僅3例,陰性對(duì)照組記分均為0級(jí);高氟組、中氟組與低氟組和對(duì)照組比較,差異有顯著性(P＜0.01)。 5、牙齒長度測(cè)量:實(shí)驗(yàn)組大鼠牙齒長度在三月末明顯短于一月末,染氟組與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.01),高氟組牙齒長度最短,與各組比較均有顯著性差異(P＜0.05)。 6、HE染色結(jié)果:陰性對(duì)照組大鼠切牙從根端向切端,成釉細(xì)胞由卵圓形逐漸向高柱狀分化,成熟的成釉細(xì)胞成高柱狀,排列均勻一致,釉質(zhì)成熟期后成釉細(xì)胞逐漸由高柱狀向矮立方狀轉(zhuǎn)化,成牙本質(zhì)細(xì)胞排列整齊呈柵欄狀,牙本質(zhì)均勻一致,其間可見牙本質(zhì)小管,牙髓細(xì)胞分布均勻;低氟組成釉細(xì)胞排列不規(guī)則,原有的高柱狀結(jié)構(gòu)變矮,少量細(xì)胞發(fā)生扭曲,成牙本質(zhì)細(xì)胞排列紊亂;高氟組成釉細(xì)胞排列極不規(guī)則,大量細(xì)胞扭曲,釉質(zhì)變薄。 7、Bcl-2及Bax的表達(dá):實(shí)驗(yàn)組Bcl-2及Bax在成釉細(xì)胞、成牙本質(zhì)細(xì)胞及牙髓細(xì)胞中均有表達(dá),定位于細(xì)胞胞漿和胞核的核膜,呈棕黃色顆粒,各實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)部位基本相同,高氟組表達(dá)最弱,陰性對(duì)照組表達(dá)最強(qiáng)。經(jīng)半定量分析比較,染氟組和陰性對(duì)照組差異有顯著性(P＜0.01)。染氟組之間僅高氟組和中氟組之間差異有顯著性(P＜0.05)。 結(jié)論: 1、成功建立了燃煤型氟斑牙大鼠模型。 2、隨著染氟時(shí)間的延長和染氟劑量的增加,大鼠氟斑牙的嚴(yán)重程度也隨著增加。 3、過量的氟可導(dǎo)致大鼠成釉細(xì)胞由原有的高柱狀向矮立方轉(zhuǎn)化,發(fā)生排列紊亂、扭曲等形態(tài)改變。 4、過量的氟對(duì)大鼠成y尷赴鸅cl-2及Bax蛋白的表達(dá)有抑制作用,推測(cè)其可能誘導(dǎo)了成釉細(xì)胞凋亡,從而影響牙釉質(zhì)發(fā)育,并最終導(dǎo)致牙齒的發(fā)育異常。 5、
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R-332;R781

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5 ;循證牙醫(yī)學(xué)文摘[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2011年04期

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9 丁士e，

本文編號(hào)：2399591