【摘要】：目的探討注射鈷原卟啉(cobalt protoporphyrin,Co PP)誘導血紅素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)表達增加在老齡小鼠骨骼肌微環(huán)境包括氧化應激、炎癥反應的調(diào)節(jié)作用。方法分別將正常成年(2月齡)和老年(18月齡)C57BL/6雄性小鼠按照簡單隨機抽樣法分為對照組及注射Co PP組;Co PP組小鼠連續(xù)3 d腹腔注射Co PP溶液[5 mg/(kg·d)],對照組注射同體積生理鹽水。在3、7、14 d后取新鮮腓腸肌組織,Western blot檢測HO-1(3 d組)的表達,ELISA檢測過氧化標志分子丙二醛(MDA)、過氧化氫(H2O2)含量及抗氧化酶類Cu Zn-超氧歧化酶(SOD)等活性變化。用老年C57BL/6小鼠建立腓腸肌損傷模型,采用簡單隨機抽樣法分為Co PP處理組和對照組,分別在3、7、14 d后檢測中性粒細胞和M2型巨噬細胞浸潤。結(jié)果正常老年組HO-1表達量高于成年組,老年組注射Co PP后HO-1表達升幅顯著低于成年組(P0.05);注射Co PP后,成年和老年組MDA、H2O2含量均下降,SOD、Cu Zn-SOD、GSH-Px和CAT酶活性升高,且老年Co PP組過氧化標志分子含量高于成年Co PP組,抗氧化酶活性較低(P0.05)。骨骼肌損傷后3、7 d,Co PP處理組中性粒細胞浸潤均低于對照組;CD163陽性M2型巨噬細胞浸潤出現(xiàn)較晚,且注射Co PP后,M2型巨噬細胞的浸潤顯著高于對照組。結(jié)論老年骨骼肌對Co PP的反應性下降,抗氧化應激能力下降。損傷后誘導HO-1表達增加能夠降低早期中性粒細胞、促進M2型巨噬細胞的浸潤,可能有助于骨骼肌損傷修復。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of cobalt protoporphyrin (cobalt protoporphyrin,Co PP) on the expression of heme oxygenase-1 (heme oxygenase 1 (HO-1) in skeletal muscle microenvironment including oxidative stress and inflammation in aged mice. Methods normal adult (2 months old) and aged (18 months old) male C57BL/6 mice were randomly divided into control group and Co PP injection group according to simple random sampling method. Mice in Co PP group were intraperitoneally injected with Co PP solution [5 mg/ (kg d)] for 3 days, while control group were injected with the same volume of normal saline. The expression of HO-1 in fresh gastrocnemius muscle was detected by, Western blot and ELISA was used to detect malondialdehyde (MDA) (MDA), a marker of peroxidation. The content of hydrogen peroxide (H2O2) and the activities of antioxidant enzymes Cu Zn- superoxide dismutase (SOD) were changed. The model of gastrocnemius injury in aged C57BL/6 mice was established and divided into Co PP treatment group and control group by a simple random sampling method. The infiltration of neutrophils and M2 macrophages were detected after 37,14d. Results the expression of HO-1 in the normal elderly group was higher than that in the adult group, and the increase of HO-1 expression in the elderly group after Co PP injection was significantly lower than that in the adult group (P0.05). After Co PP injection, the content of MDA,H2O2 decreased and the activities of SOD,Cu Zn-SOD,GSH-Px and CAT increased in both adult and elderly groups. The content of peroxidation markers in the elderly Co PP group was higher than that in the adult Co PP group, and the antioxidant enzyme activity was lower (P0.05). The infiltration of neutrophils in the treatment group was lower than that in the control group at 3 and 7 days after skeletal muscle injury, and the infiltration of M 2 macrophages in the CD163 positive group was later than that in the control group, and after Co PP injection, the infiltration of M 2 macrophage was significantly higher than that in the control group. Conclusion the reactivity of skeletal muscle to Co PP decreased and the ability of anti-oxidation stress decreased in the elderly. The increased expression of HO-1 after injury can decrease neutrophils and promote the infiltration of M2 macrophages, which may be helpful to repair skeletal muscle injury.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學西南醫(yī)院醫(yī)學檢驗系臨床血液學教研室;第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所康復科;重慶醫(yī)科大學附屬大公館康復醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學基金面上項目(31171148)~~
【分類號】：R363

【共引文獻】

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