發(fā)布時(shí)間：2018-12-29 11:33

【摘要】： 目的：克隆鼠IFN-λ2基因,構(gòu)建其腺病毒載體,獲取病毒重組子,并研究其生物學(xué)活性。 方法：用人水皰口炎病毒VSV(vesicular stomatovirus)病毒誘導(dǎo)小鼠原代脾細(xì)胞表達(dá)IFN-λ2,通過(guò)RT-PCR獲取IFN-λ2 cDNA,將其亞克隆至pShuttle-CMV載體,經(jīng)PmeⅠ線性化后,與腺病毒的骨架載體pAdEasy在BJ5183菌中同源重組,293A細(xì)胞包裝擴(kuò)增,免疫熒光、Western blot檢測(cè)mIFN-λ2蛋白的表達(dá)。mIFN-λ2對(duì)鼠肺腺癌細(xì)胞LA795的抑制作用,通過(guò)MTT細(xì)胞存活實(shí)驗(yàn)檢測(cè)活性。 結(jié)果：獲取鼠IFN-λ2的cDNA,序列與GeneBank公布序列完全一致,成功構(gòu)建腺病毒載體；MTT法研究Ad-mIFN-λ2和Ad-Lacz對(duì)小鼠肺腺癌細(xì)胞LA795的體外抑制作用,結(jié)果顯示mIFN-λ2對(duì)LA795細(xì)胞生長(zhǎng)具有一定的抑制作用。 結(jié)論：成功構(gòu)建mIFN-λ2的重組腺病毒載體,其病毒重組子體外具有生物活性。
[Abstract]:Aim: to clone mouse IFN- 位 2 gene, construct its adenovirus vector, obtain recombinant virus and study its biological activity. Methods: human vesicular stomatitis virus (VSV (vesicular stomatovirus) virus induced the expression of IFN- 位 2 in primary spleen cells of mice. IFN- 位 2 cDNA, was obtained by RT-PCR and subcloned into pShuttle-CMV vector. The expression of IFN- 位 2 cDNA, was linearized by Pme 鈪，

本文編號(hào)：2394771