【摘要】：目的建立以特異性熒光探針為特點(diǎn)的Taqman熒光定量RT-PCR方法,對(duì)輪狀病毒A群核酸進(jìn)行檢測(cè)。方法根據(jù)輪狀病毒A群基因組保守序列設(shè)計(jì)引物和探針,建立并分析TaqMan RT-PCR的重復(fù)性、特異性、敏感性;以所建立的方法對(duì)128例病毒性腹瀉患者糞便標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)以基因測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果所建立的TaqMan RT-PCR檢測(cè)方法對(duì)輪狀病毒A群具有很好的特異性和重復(fù)性,靈敏度達(dá)到101拷貝/μl。128例糞便標(biāo)本中,輪狀病毒A群的檢出率為18.0%,與基因測(cè)序比對(duì)結(jié)果相符。結(jié)論構(gòu)建的輪狀病毒A群TaqMan RT-PCR檢測(cè)方法快速、特異且靈敏,可用于臨床病原診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
[Abstract]:Objective to establish a Taqman fluorescence quantitative RT-PCR method based on specific fluorescence probe to detect rotavirus group A nucleic acid. Methods Primer and probe were designed according to the conserved sequence of rotavirus A genome to establish and analyze the repeatability, specificity and sensitivity of TaqMan RT-PCR. The fecal specimens of 128 patients with viral diarrhea were detected by the established method and verified by gene sequencing. Results the TaqMan RT-PCR method was specific and reproducible to rotavirus group A, and the sensitivity reached 101 copies / 渭 l.128 fecal specimens. The detection rate of rotavirus group A was 18.0%. The results were consistent with the results of gene sequencing. Conclusion the constructed method for detecting rotavirus group A TaqMan RT-PCR is rapid, specific and sensitive, and can be used for clinical diagnosis and epidemiological investigation.
【作者單位】： 湖州市疾病預(yù)防控制中心;
【基金】：湖州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013GY15)
【分類(lèi)號(hào)】：R373

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 曾軍榮;李榕嬌;陳永強(qiáng);鄺熾莊;孫慧冰;;常見(jiàn)腹瀉病毒多重?zé)晒饽孓D(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年13期

2 衛(wèi)海燕;黃學(xué)勇;許玉玲;馬宏;陳豪敏;許汴利;;EV71病毒核酸快速檢測(cè)方法的比較[J];病毒學(xué)報(bào);2012年06期

3 許東亮;聶曉晶;張國(guó)成;錢(qián)新宏;楊曉蕾;鄧軍霞;李玲莉;;實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速診斷腸道病毒71型感染[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2012年12期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 陽(yáng)正東;;0～5歲小兒急性腹瀉病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果分析[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年08期

2 許東亮;張國(guó)成;聶曉晶;成勝權(quán);孫新;李志宏;楊曉蕾;呂香萍;;快速診斷人細(xì)小病毒B19感染方法學(xué)比較研究[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2013年05期

3 農(nóng)學(xué)圣;;新生兒腸道病毒感染的診療現(xiàn)狀[J];大家健康(學(xué)術(shù)版);2013年07期

4 王和平;鄭躍杰;陳小文;鄧?yán)^巋;張民;劉萍;林遂香;;直接免疫熒光與實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)常見(jiàn)呼吸道病毒抗原比較[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2013年10期

5 黃旭;徐江;肖朋;鄧海燕;閆穎;劉海霞;;心理應(yīng)激狀態(tài)下大鼠咬肌兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶表達(dá)情況[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2014年04期

6 毛莉萍;章幼奕;;腸道病毒71型病毒學(xué)及致病機(jī)制研究進(jìn)展[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2014年11期

7 徐德順;陳莉萍;朱曉娟;;應(yīng)用雙重實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)方法同時(shí)檢測(cè)A組輪狀病毒和星狀病毒[J];疾病監(jiān)測(cè);2014年12期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 周玉;史新輝;馬蘭花;;腹瀉患兒1064例糞便中輪狀病毒抗原檢測(cè)結(jié)果分析[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2010年05期

2 呂元聰;;諾如病毒感染性腹瀉簡(jiǎn)介[J];應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年02期

3 陳瑞剛;朱笑年;郭振;李眸晗;郭玉成;;兒童重癥手足口病的胸部X線(xiàn)分析[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2009年10期

4 李玉萍;馬娜;;不同劑量甲基強(qiáng)的松龍治療重癥手足口病療效觀察[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2010年04期

5 廖國(guó)東;吳文鋒;許桂鋒;許銘清;陳家圖;謝建忠;羅光毅;;實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)在手足口病檢測(cè)中應(yīng)用[J];中華實(shí)用診斷與治療雜志;2010年11期

6 楊秀惠;嚴(yán)延生;陳前進(jìn);陳秋婷;謝文煌;何愛(ài)華;張紅榕;;病毒性腦炎病例中腸道病毒的分析[J];海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2008年04期

7 孫毅;靳艷;黃衛(wèi)東;劉純義;張萍;;腸道病毒腦炎39例病原學(xué)及影響其預(yù)后的相關(guān)因素分析[J];中國(guó)小兒急救醫(yī)學(xué);2006年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王懋梁;;輪狀病毒的研究進(jìn)展(綜述)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1979年01期

2 張惠芬;;人輪狀病毒Ⅱ型:體外培養(yǎng)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));1981年03期

3 閻沐京;任中原;;輪狀病毒樣因子是否為輪狀病毒屬中的新成員[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).流行病學(xué)傳染病學(xué)分冊(cè);1984年06期

4 吳妙靈 ,白植生 ,吳妙靈;輪狀病毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)[J];微生物學(xué)免疫學(xué)譯刊;1985年03期

5 張傳安;;人輪狀病毒的血凝活性[J];預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào);1985年03期

6 古月;;牛奶中輪狀病毒抗體[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);1985年08期

7 Anna Maria Agllano ,李玉如;新的人輪狀病毒株的分離[J];微生物學(xué)免疫學(xué)譯刊;1986年04期

8 孫茂盛,郭仁;輪狀病毒免疫有關(guān)的一些研究進(jìn)展[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1988年01期

9 陳錦生,鄧滌夷,陳霞,徐昌志,陳毓玲,李金田,何家鑫;福建省首次檢出新的成人輪狀病毒[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1988年04期

10 王振坤;輪狀病毒的免疫學(xué)研究[J];上海免疫學(xué)雜志;1988年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 胡秀華;;細(xì)胞培養(yǎng)與real-time RT-PCR相結(jié)合的方法檢測(cè)水體中感染性輪狀病毒[A];2006中國(guó)微生物學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

2 夏樂(lè)樂(lè);何彪;楊凡力;徐琳;涂長(zhǎng)春;;蝙蝠輪狀病毒分離與鑒定[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第八屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

3 王春鳳;王會(huì)巖;徐鳳宇;楊文杰;毛玉杰;單曉楓;劉尚高;;豬A組輪狀病毒Vp4全基因在大腸桿菌中的表達(dá)與檢測(cè)[A];第六屆全國(guó)會(huì)員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2005年

4 王春鳳;王會(huì)巖;徐鳳宇;楊文杰;毛玉杰;單曉楓;劉尚高;;豬A組輪狀病毒Vp4全基因在大腸桿菌中的表達(dá)與檢測(cè)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第六屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

5 王春鳳;楊樹(shù)寶;胡靜濤;趙丹;張?jiān)讫?葉麗萍;吳慶海;劉尚高;;豬A組輪狀病毒VP4全基因的克隆與序列分析[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第六屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

6 王春鳳;于守平;高云航;姜秀云;劉尚高;;豬A組輪狀病毒VP4全基因片斷的克隆與序列分析[A];人畜共患傳染病防治研究新成果匯編[C];2004年

7 王春鳳;楊樹(shù)寶;胡靜濤;趙丹;張?jiān)讫?葉麗萍;吳慶海;劉尚高;;豬A組輪狀病毒VP4全基因的克隆與序列分析[A];第六屆全國(guó)會(huì)員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2005年

8 劉凱軍;;輪狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NSP1與種屬限制性的相關(guān)性研究[A];第六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

9 王延?xùn)|;楊少華;高運(yùn)東;郭學(xué)軍;楊宏軍;劉曉;王長(zhǎng)法;胡國(guó)良;仲躋峰;何洪彬;;輪狀病毒VP7基因與LTB基因的融合表達(dá)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)第七屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨第十三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2009年

10 陳衛(wèi)紅;曹玉華;張智軍;;輪狀病毒外殼蛋白VP4修飾Fe_3O_4納米粒子用于生物成像及藥物輸運(yùn)的研究[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第4分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 李國(guó)華;桿狀病毒系統(tǒng)中地方株輪狀病毒蛋白的重組表達(dá)及病毒樣顆粒的構(gòu)建[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

2 魏靜;人源輪狀病毒T細(xì)胞識(shí)別及其小型豬腹瀉模型的建立[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 王敏;基因優(yōu)化的表達(dá)人輪狀病毒重組腺病毒免疫效果研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2008年

4 秦嵐;輪狀病毒NSP1抑制天然免疫機(jī)制及其對(duì)宿主蛋白調(diào)控的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

5 李晉濤;人源輪狀病毒的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯口服疫苗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

6 劉勇;輪狀病毒VP7基因修飾、表達(dá)及免疫原性研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

7 劉馨;重組輪狀病毒VP4抗原的表達(dá)及免疫原性研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

8 李丹地;河北省盧龍地區(qū)輪狀病毒流行病學(xué)及G5P[6]毒株的分子特征研究[D];吉林大學(xué);2008年

9 霍云雯;在昆蟲(chóng)細(xì)胞中表達(dá)輪狀病毒我國(guó)地方株VP4并構(gòu)建病毒樣顆粒[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2001年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 夏樂(lè)樂(lè);蝙蝠輪狀病毒的分離與鑒定[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

2 白萱;反向遺傳構(gòu)建A組輪狀病毒重配毒株的研究[D];華中師范大學(xué);2008年

3 謝金鑫;大慶地區(qū)牛輪狀病毒的分離及其全序列分析[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

4 蘇小庚;河北省犢牛輪狀病毒的分離鑒定及特性研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

5 秦玉俠;豬A組輪狀病毒NSP4基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建與免疫檢測(cè)比較[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

6 李傳印;A組輪狀病毒NSP6蛋白表達(dá)及免疫學(xué)性質(zhì)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

7 李思成;滅活輪狀病毒與滅活甲肝病毒聯(lián)合疫苗的制備及免疫學(xué)效果評(píng)價(jià)[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

8 楊文杰;豬A組輪狀病毒VP7基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)免疫研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

9 李松;一株人源性輪狀病毒的分離及其在Vero細(xì)胞上的適應(yīng)性培養(yǎng)[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

10 呂新輝;中國(guó)不同地區(qū)A、B組輪狀病毒分離株VP7基因序列的比較分析[D];山東大學(xué);2007年

，

本文編號(hào)：2384863