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外周血基質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)鑒定及其向施萬細(xì)胞的誘導(dǎo)分化

發(fā)布時間:2018-11-26 13:39
【摘要】:目的研究體外分離培養(yǎng)大鼠外周血基質(zhì)干細(xì)胞(PBMSCs)并誘導(dǎo)分化為施萬細(xì)胞的潛能。方法從SD大鼠取血分離培養(yǎng)PBMSCs,采用流式細(xì)胞術(shù)和免疫細(xì)胞化學(xué)法對其細(xì)胞表面抗原進行檢測與鑒定,并用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測BrdU作用4h后BrdU的陽性率。PBMSCs經(jīng)β-巰基乙醇、全反式維甲酸及復(fù)合條件培養(yǎng)基等三個步驟向施萬細(xì)胞定向誘導(dǎo)后,用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測S-100和P75的表達。結(jié)果流式細(xì)胞術(shù)顯示培養(yǎng)獲得的PBMSCs中CD11b、CD29、CD45、CD49d、CD90及CD106的陽性率分別為19.97%、99.96%、46.62%、5.46%、71.22%和10.76%。免疫細(xì)胞化學(xué)法顯示PBMSCs呈CD34陰性,而BrdU陽性率為(34.1±4.3)%。PBMSCs經(jīng)定向誘導(dǎo)后S-100和P75的陽性率分別是(75.2±4.1)%和(78.9±4.6)%。結(jié)論從外周血分離獲得的干細(xì)胞符合基質(zhì)干細(xì)胞的特性,這些細(xì)胞在特定的條件下可誘導(dǎo)分化成為施萬細(xì)胞。
[Abstract]:Aim to study the potential of (PBMSCs) isolated from rat peripheral blood stromal cells and induced to differentiate into Schwann cells in vitro. Methods PBMSCs, from SD rats was isolated and cultured by flow cytometry and immunocytochemistry. The positive rate of BrdU was detected by immunocytochemistry after 4 h exposure to BrdU, and the positive rate of PBMSCs was detected by 尾 -mercaptoethanol (尾 -mercaptoethanol). The expression of S-100 and P75 was detected by immunocytochemistry after induction of all-trans retinoic acid and compound conditioned medium to Schwann cells. Results the positive rates of CD11b,CD29,CD45,CD49d,CD90 and CD106 in PBMSCs obtained by flow cytometry were 19.9797 ~ 99.96 and 46.62 ~ 5.46 ~ 71.22% and 10.76% respectively. Immunocytochemistry showed that PBMSCs was CD34 negative, and the positive rate of BrdU was (34.1 鹵4.3)%. The positive rates of S-100 and P75 were (75.2 鹵4.1)% and (78.9 鹵4.6)%, respectively. Conclusion the stem cells isolated from peripheral blood accord with the characteristics of stromal stem cells. These cells can be induced to differentiate into Schwann cells under certain conditions.
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院組織學(xué)與胚胎學(xué)教研室;
【分類號】:R329

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