【摘要】： 丙型肝炎病毒(HCV)屬黃熱病毒科,感染人體后可引起機(jī)體免疫應(yīng)答發(fā)生異常,導(dǎo)致組織損傷,形成慢性持續(xù)性感染,并能進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞肝癌。HCV整個(gè)基因組呈高度變異,其中位于HCV包膜蛋白E2 N端的27個(gè)氨基酸變異最大,故命名為第一高變區(qū)(HVR1)。 丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)試劑在血液篩查、臨床疾病診斷中發(fā)揮著重要作用。但由于HCV的高變異,致使現(xiàn)有HCV抗體檢測(cè)試劑存在漏檢、中和性抗體難以檢測(cè)等問題。軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所利用生物信息學(xué)篩選出4條具有高交叉反應(yīng)性的HVR1抗原,并利用自行構(gòu)建的pBV IL1載體進(jìn)行了上述HVR1抗原的嵌合表達(dá),獲得了1條能覆蓋大部分HVR1抗原變異的嵌合抗原F4HVR1 (專利號(hào): ZL 0114187916)。 本研究在此基礎(chǔ)上,對(duì)嵌合抗原進(jìn)行純化,獲得蛋白純品,鑒定嵌合抗原的活性和特異性,建立了HVR1抗體ELISA檢測(cè)技術(shù)。 本研究對(duì)北京市紅十字血液中心2008-2009年間的77991名獻(xiàn)血者的ALT和乙肝表面抗原(HBsAg)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)和分析,研究ALT不合格者的性別、年齡、季節(jié)分布特點(diǎn),并作出了ALT不合格與HBsAg的相關(guān)性分析。本研究對(duì)上述ALT單項(xiàng)不合格中的2035份血清進(jìn)行了HVR1抗體的檢測(cè),并與C區(qū)、NS3區(qū)、NS4區(qū)、NS5區(qū)抗體的檢測(cè)作比較,確立HVR1單獨(dú)抗體陽性血清,評(píng)價(jià)HVR1抗體檢測(cè)在防止HCV血液漏檢中的重要作用;建立了用于評(píng)價(jià)HVR1抗體檢測(cè)試劑的獻(xiàn)血者血清質(zhì)控品。該抗原與目前HCV診斷試劑中采用的保守抗原完全不同,能從本質(zhì)上提高HCV血液篩查的靈敏度。
[Abstract]:Hepatitis C virus (HCV) belongs to the yellow fever virus family. It can cause abnormal immune response, tissue damage and chronic persistent infection. The whole genome of HCV was highly variable, of which 27 amino acids located at the N terminal of HCV envelope protein E2 had the largest variation, so it was named the first hypervariable region (HVR1). Hepatitis C virus antibody detection reagent plays an important role in blood screening and clinical diagnosis. However, due to the high variation of HCV, the existing HCV antibody detection reagent has some problems, such as missed detection and difficult detection of neutralizing antibody. The Institute of basic Medicine, Academy of military Medical Sciences, screened out four HVR1 antigens with high cross-reactivity by bioinformatics, and expressed the HVR1 antigen by using the self-constructed pBV IL1 vector. A chimeric antigen F4HVR1 (patent number: ZL 0114187916) covering most of the variation of HVR1 antigen was obtained. In this study, the chimeric antigen was purified, protein purity was obtained, the activity and specificity of chimeric antigen were identified, and the detection technique of HVR1 antibody ELISA was established. In this study, the results of ALT and hepatitis B surface antigen (HBsAg) detection in 77991 blood donors from Beijing Red Cross Blood Center in 20082009 were statistically analyzed, and the sex, age, seasonal distribution characteristics of ALT unqualified patients were studied. The correlation between ALT disqualification and HBsAg was analyzed. In this study, 2035 unqualified ALT sera were tested for HVR1 antibody, and compared with C region, NS3 region, NS4 region and NS5 region. To evaluate the important role of HVR1 antibody detection in preventing HCV blood leakage. The serum quality control products of blood donors for the evaluation of HVR1 antibody detection reagent were established. The antigens are completely different from the conservative antigens used in HCV diagnostic reagents and can improve the sensitivity of HCV blood screening essentially.
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R392.1

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本文編號(hào)：2344330