【摘要】：目的:通過體外及體內(nèi)實驗探討大鼠切牙Apical bud上皮細胞誘導(dǎo)大鼠脂肪來源間充質(zhì)干細胞向成牙本質(zhì)細胞分化的能力。方法:分離培養(yǎng)大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞、Apical bud上皮細胞,制備Apical bud上皮條件誘導(dǎo)液并體外對ADSCs誘導(dǎo)7d,通過實時定量PCR方法檢測成牙本質(zhì)關(guān)鍵基因DMP-1及DSPP的表達。制備ADSCs及Apical bud上皮重組細胞團進行大鼠腎被膜下移植,8W后取材,分別采用HE染色、Masson三色法和免疫組化方法對移植生成物進行組織學(xué)檢測。結(jié)果:Apical bud上皮誘導(dǎo)ADSCs后DMP-1及DSPP m R NA表達水平顯著高于對照組。體內(nèi)移植8W后H E染色可見管樣牙本質(zhì)和骨樣牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu),Masson三色法可以觀察到有綠色的牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu),免疫組化檢測中CK14染色陽性,DSPP染色陽性。結(jié)論:Apical bud上皮細胞在體外能夠誘導(dǎo)ADSCs向成牙本質(zhì)細胞分化,且細胞重組在體內(nèi)可以構(gòu)建出牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu)。
[Abstract]:Aim: to investigate the differentiation of rat adipose derived mesenchymal stem cells into odontoblast cells induced by rat incisor Apical bud epithelial cells in vitro and in vivo. Methods:, Apical bud epithelial cells from rat adipose mesenchymal stem cells were isolated and cultured. Apical bud conditioned medium was prepared and ADSCs was induced in vitro for 7 days. The expression of DMP-1 and DSPP was detected by real-time quantitative PCR. ADSCs and Apical bud epithelial recombinant cell clusters were prepared for submembrane transplantation of rat kidney. After 8 weeks of transplantation, the transplanted products were detected by HE staining, Masson trichrome method and immunohistochemical method respectively. Results the expression of DMP-1 and DSPP m R NA in ADSCs induced by: Apical bud epithelium was significantly higher than that in control group. After 8 weeks of transplantation, the tubular and bone-like dentin structures could be observed by H E staining. Green dentin-like structures could be observed by Masson trichrome. CK14 staining and DSPP staining were positive in immunohistochemistry. Conclusion: Apical bud epithelial cells can induce ADSCs to differentiate into odontoblast in vitro, and dentin like structure can be constructed by cell recombination in vivo.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院正畸科;解放軍總醫(yī)院口腔科;解放軍總醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)研究所;解放軍總醫(yī)院老年口腔科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金(項目編號:31200741) 中國博士后科學(xué)基金(項目編號:2013M532108) 北京市科技新星計劃(項目編號:Z14144000180000)
【分類號】：R329.2

【參考文獻】

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本文編號：2343881