【摘要】： 目的 觀察雌激素缺乏對大鼠海馬CA1/CA2區(qū)和額葉皮層HCNP的含量和ChAT、M1 AChR、α_7 nAChR及NMDA受體亞單位NR_1基因表達的影響。 方法 1實驗動物分組 將4月齡雌性SD大鼠30只隨機分為3組:假手術(shù)組(Sham組)、去卵巢組(OVX組)和去卵巢給予苯甲酸雌二醇組(OVX+EB組),每組10只。Sham組為雙側(cè)去除少量卵巢上脂肪組織;OVX組為去除雙側(cè)卵巢;OVX+EB組為去卵巢手術(shù)10天后給予苯甲酸雌二醇皮下注射,100μg/kg,隔日一次。手術(shù)后常規(guī)喂養(yǎng)4個月。 2組織標本的獲取及指標測定 麻醉大鼠,開顱并迅速分離海馬背側(cè)組織和額葉皮層置于液氮中,于-80℃低溫冰箱保存,用于組織蛋白和組織總RNA的提取。分離大鼠子宮并進行稱重。 2.1蛋白測定 提取海馬背側(cè)組織蛋白及額葉皮層組織蛋白并用Bradford法測定蛋白含量,以每毫升樣品中的毫克蛋白量(mg/ml)表示。β-actin作為HCNPpp的內(nèi)參照,用western-blotting法測定大鼠海馬C-HCNPpp和N-HCNPpp的相對含量。 2.2 mRNA表達的測定 用Trizol法提取海馬背側(cè)組織和額葉皮層組織總RNA。用β-actin作為內(nèi)參照,RT-PCR法測定海馬背側(cè)組織和額葉皮層HCNPpp mRNA、ChAT mRNA、NR_1 mRNA、M1 AChR mRNA及α_7 nAChR mRNA的相對表達量。 結(jié)果 1大鼠子宮重量變化 與Sham和OVX+EB組相比,OVX組大鼠子宮重量明顯降低(P0.01),而Sham組和OVX+EB組大鼠子宮重量無差別。 2大鼠海馬HCNPpp相對含量的變化 與Sham和OVX+EB組相比,OVX組C-HCNPpp的相對含量明顯升高(P0.05),而Sham組和OVX+EB組之間無差別(P0.05)。但三組之間N-HCNPpp的相對含量的差別無統(tǒng)計學(xué)意義。 3大鼠皮層HCNPpp相對含量的變化 與Sham和OVX+EB組相比,OVX組C-HCNPpp的相對含量明顯升高(P0.05),而Sham組和OVX+EB組之間無差別(P0.05)。但三組之間N-HCNPpp的相對含量的差別無統(tǒng)計學(xué)意義。 4大鼠海馬HCNPpp mRNA表達水平的變化 與Sham組比較,OVX組和OVX+EB組HCNPpp mRNA的相對表達量的無顯著性差別(P0.05);與OVX組比較,OVX+EB組HCNPpp mRNA的相對表達量升高(P0.05)。5大鼠皮層HCNPpp mRNA表達水平的變化 Sham組、OVX組和OVX+EB組之間的HCNPpp mRNA的相對表達量無顯著性差異(P0.05)。 6大鼠海馬ChAT mRNA表達水平的變化 與Sham和OVX+EB組相比,OVX組ChAT mRNA的相對表達量明顯降低(P0.05),而Sham組與OVX+EB組之間無差別(P0.05)。 7大鼠皮層ChAT mRNA表達水平的變化 Sham組、OVX組和OVX+EB組之間的ChAT mRNA的相對表達量無顯著性差異(P0.05)。 8大鼠海馬M1 AChR mRNA表達水平的變化 與Sham組比較,OVX組M1 AChR mRNA相對表達量明顯升高(P0.05),OVX+EB組M1 AChR mRNA相對表達量明顯升高(P0.01),而OVX組和OVX+EB組無差別(P0.05)。 9大鼠皮層M1 AChR mRNA表達水平的變化 Sham組、OVX組和OVX+EB組,三組之間的M1 AChR mRNA的相對表達量無顯著性差異(P0.05)。 10大鼠海馬α_7 nAChR mRNA表達水平的變化 與Sham和OVX+EB組相比,OVX組α_7 nAChR mRNA相對表達量明顯降低(P0.05),而Sham組和OVX+EB組無差別(P0.05)。 11大鼠皮層α_7 nAChR mRNA表達水平的變化 與Sham和OVX+EB組相比,OVX組α_7 nAChR mRNA相對表達量明顯降低(P0.05),而Sham組和OVX+EB組無差別(P0.05)。 12大鼠海馬NR_1 mRNA表達水平的變化 與Sham和OVX+EB組相比,OVX組NR_1 mRNA相對表達量明顯降低(P0.05),而Sham組和OVX+EB組無差別(P0.05)。 13大鼠皮層NR_1 mRNA表達水平的變化 Sham組、OVX組和OVX+EB組之間的NR_1 mRNA的相對表達量無顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論 1雌激素缺乏可導(dǎo)致大鼠海馬CA1/CA2區(qū)及額葉皮層HCNP的增多。 2雌激素缺乏可導(dǎo)致大鼠海馬CA1/CA2區(qū)ChAT、α_7 nAChR mRNA表達水平降低,此結(jié)果說明ChAT、α_7 nAChR mRNA水平受雌激素的調(diào)控,可能是雌激素缺乏導(dǎo)致AD發(fā)生發(fā)展的分子機制之一。 3雌激素缺乏可導(dǎo)致大鼠海馬CA1/CA2區(qū)NR_1 mRNA表達水平降低,此結(jié)果說明NR_1 mRNA水平受雌激素的調(diào)控,可能是雌激素缺乏導(dǎo)致AD發(fā)生發(fā)展的分子機制之一。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R341

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 蔡維君,鄧小華,羅學(xué)港;大鼠Meynert基底核TrkA和ChAT的表達[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2000年03期

，

本文編號：2302411