【摘要】： 目的： 1.收集并制備人臍帶間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)上清(USFM)。 2.研究USFM對體外培養(yǎng)的人真皮成纖維細胞(HDF)因紫外損傷的保護作用和對小鼠皮膚因紫外輻照損傷的抗光老化作用。 方法： 1.從人臍帶中分離培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細胞(UC-MSCs),傳代培養(yǎng),收集干細胞分泌無血清上清,制備USFM. 2.建立UVA損傷HDF損傷模型。MTT法檢測USFM對HDF細胞生長作用及增殖作用濃度。 3.室內(nèi)紫外照射建立昆明小鼠皮膚光老化模型,免疫組化染色觀察小鼠皮膚結(jié)構(gòu)變化,測定小鼠體內(nèi)血漿中SOD酶活性、谷胱甘肽還原酶(GSH-PX)酶活性、丙二醛含量。 結(jié)果： 1.USFM在蛋白質(zhì)濃度≤400μg／ml時,對HDF細胞無明顯的細胞毒性。20μg／ml的USFM對HDF細胞生長具有顯著的增殖效果。USFM預(yù)處理的HDF細胞經(jīng)紫外輻射后細胞存活率為86.4%±1.10,與模型組相比(64.35%±3.22),具有顯著性差異。USFM 20μg/ml、10μg／ml預(yù)處理的HDF細胞內(nèi)SOD酶(超氧化歧化酶)活性分別是42.95±1.15U/ml、38.74±0.53 U／ml,與模型組HDF細胞內(nèi)SOD酶活性相比21.31±1.31 U／ml,具有顯著性差異。 2.成功建立小鼠光老化模型。老化的皮膚組織出現(xiàn)成纖維細胞損傷甚至破碎,彈力纖維和Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維斷裂,排列紊亂,彈力纖維樣物質(zhì)異常增生,同時伴有單核炎癥細胞的浸潤；體內(nèi)SOD酶活性顯著下降,為7.26±2.24U/ml,MDA(丙二醛)異常堆積,為25.93±1.16nmol/ml。外用USFM可以減輕皮膚光老化,膠原纖維雖有一定量的增加,但是排列整齊,同時炎癥細胞浸潤明顯減少,與模型組比較,血漿中的SOD酶、谷胱甘肽過氧化物還原酶(GSH-PX)顯著增高,MDA含量顯著減少。USFM 20μg/ml、10μg/ml預(yù)處理的小鼠體內(nèi)SOD酶(超氧化歧化酶)活性分別是53.3±5.99U/ml、37.26±2.24U/ml,與模型組HDF細胞內(nèi)SOD酶活性相比7.26±2.24U／ml,具有顯著性差異。 結(jié)論： 1.從醫(yī)療廢棄物人臍帶中分離得到間充質(zhì)干細胞。 2.UVA能抑制HDF細胞生長,導(dǎo)致細胞凋亡與壞死。 3.UVA+UVB照射皮膚,能加速皮膚的光老化,削弱皮膚的抗氧化防御功能。 4. USFM具有良好的抗氧化作用。
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【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R329

【引證文獻】

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1 葉翠芳;紫菜提取物及其抗紫外輻射活性的研究[D];暨南大學(xué);2012年

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本文編號：2301319