發(fā)布時間：2018-10-25 18:48

【摘要】： 目的探討人促紅細胞生成素(rhEPO)對低氧損傷膠質(zhì)細胞的影響及對基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)表達的影響 方法通過體外純化培養(yǎng)第3代星形膠質(zhì)細胞,將其分為正常組、低氧組、rhEPO預(yù)處理組;以四唑藍(MTT)比色法測定低氧培養(yǎng)12h、24h、36h細胞的存活率,倒置顯微鏡和透射電鏡觀察低氧對膠質(zhì)細胞形態(tài)的影響;免疫熒光和逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法研究低氧對星形膠質(zhì)細胞MMP-9表達的影響。 結(jié)果 1、低氧組星形膠質(zhì)細胞在低氧培養(yǎng)下出現(xiàn)細胞腫脹,且隨時間的延長而加重,rhEPO預(yù)處理組在各個時間點細胞腫脹明顯輕于低氧組。 2、rhEPO能減輕細胞超微結(jié)構(gòu)的改變及降低MTT比值。 3、RT-PCR及免疫熒光檢測:低氧組MMP-9 mRNA及蛋白的表達在低氧各個時間點均高于正常組,在24h達到最高,在36h開始降低(P0.05) 4、rhEPO預(yù)處理組MMP-9mRNA及蛋白的表達變化在12h、24h、36h較低氧組低(P0.05) 結(jié)論rhEPO通過抑制MMP-9的表達促進低氧條件下星形膠質(zhì)細胞的存活。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of human erythropoietin (rhEPO) on the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in hypoxic injured glial cells. They were divided into normal group, hypoxia group and rhEPO pretreatment group. The survival rate of cultured cells was determined by (MTT) colorimetry. The morphology of glial cells was observed by inverted microscope and transmission electron microscope (TEM). The effects of hypoxia on MMP-9 expression in astrocytes were studied by immunofluorescence and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results 1. The astrocytes of hypoxic group showed swelling in hypoxia culture, which was aggravated with the prolongation of time. The swelling of astrocytes in rhEPO pretreatment group was lighter than that in hypoxic group at each time point. 2rhEPO can reduce the ultrastructural changes and MTT ratio. 3RT-PCR and immunofluorescence detection: the expression of MMP-9 mRNA and protein in hypoxia group was higher than that in normal group at all time points, reached the highest level at 24 h, and decreased at 36 h (P0.05). The expression of MMP-9mRNA and protein in rhEPO pretreatment group was lower than that in hypoxic group at 12h, 24h and 36h (P0.05). Conclusion rhEPO can promote the survival of astrocytes in hypoxic condition by inhibiting the expression of MMP-9.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R363

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本文編號：2294520