【摘要】： 激活素(Activin),因其具有促進垂體卵泡刺激素(FSH)分泌作用而命名,屬于轉化生長因子β(transforming-growth factor-β, TGF-β)超家族成員。 本研究在克隆激活素特異信號傳導蛋白——激活素受體相互作用蛋白5(ActRIP5)基因基礎上,構建ActRIP5表達載體及制備抗ActRIP5抗體,進一步采用免疫組織化學染色及RT-PCR分析ActRIP5在組織中的表達。RT-PCR檢測結果顯示ActRIP5 mRNA在多種組織表達,在胰腺組織中ActRIP5及ActRIP2表達,而ActRIP1、ActRIP3及ActRIP4無表達,提示ActRIP5及ActRIP2可能是決定激活素作用于胰腺組織的關鍵信號分子。免疫組織化學染色進一步顯示,在小鼠胰腺中,ActRIP2僅僅表達在胰島,而ActRIP5不僅表達在胰腺內分泌部胰島細胞,外分泌部腺泡細胞也有表達。在小鼠胰島β細胞系MIN6細胞中高表達ActRIP5,其不僅分布于細胞漿,在細胞核也有表達,主要集中在核膜。MIN6細胞在激活素的刺激下2h ActRIP5開始升高,在LPS的作用下8h表達增加。。對STZ損傷模型鼠檢測發(fā)現(xiàn),模型鼠Activin A mRNA在損傷過程中表達水平逐漸降低,ActRIP5表達隨時間也逐漸減少。提示在急性損傷模型鼠中ActRIP5表達的減少可能不利于Activin A發(fā)揮保護作用。 綜上所述,本研究結果顯示,作為激活素信號傳導途經(jīng)調控蛋白,ActRIP5在胰腺組織中的表達及其生物活性都受多種因素影響,因此ActRIP5是決定激活素A在胰島細胞作用的關鍵信號傳導分子。
[Abstract]:Activin (Activin), is a member of transforming-growth factor- 尾 (TGF- 尾) superfamily because of its role in promoting the secretion of pituitary follicle stimulating hormone (FSH). On the basis of cloning activin-specific signal transduction protein-activin receptor interacting protein 5 (ActRIP5) gene, ActRIP5 expression vector was constructed and anti-ActRIP5 antibody was prepared. Immunohistochemical staining and RT-PCR were used to detect the expression of ActRIP5 in tissues. The results of RT-PCR showed that ActRIP5 mRNA was expressed in many tissues, ActRIP5 and ActRIP2 in pancreas, but ActRIP1,ActRIP3 and ActRIP4 were not. These results suggest that ActRIP5 and ActRIP2 may be the key signaling molecules that determine the action of activin on pancreatic tissue. Immunohistochemical staining further showed that ActRIP2 was expressed only in islets in mouse pancreas, while ActRIP5 was expressed not only in pancreatic endocrine islets but also in exocrine acinar cells. The overexpression of ActRIP5, in mouse islet 尾 cell line MIN6 cells was not only expressed in cytoplasm, but also in nucleus, mainly in nuclear membrane. The expression of ActRIP5 in MIN6 cells began to increase at 2 h after stimulation of activin, and increased at 8 h after the action of LPS. It was found that the expression level of Activin A mRNA decreased and the expression of ActRIP5 decreased with time after STZ injury. It suggested that the decrease of ActRIP5 expression in acute injury model rats may not be beneficial to the protective effect of Activin A. To sum up, our results show that the expression and biological activity of ActRIP5 in pancreatic tissues are affected by many factors as activin signal transduction pathway regulatory protein. Therefore, ActRIP5 is a key signal transduction molecule that determines the action of activin A in islet cells.
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R392

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