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miR-33s通過靶向p38 MAPK負(fù)性調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)

發(fā)布時間:2018-09-07 12:40
【摘要】:目的探討miR-33s是否能夠通過靶向p38 MAPK負(fù)性調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。方法體外培養(yǎng)人單核細(xì)胞株THP-1,分別將miR-33s的擬似物(mimic,25 nmol/L)和miR-33s的抑制劑(inhibitor,25 nmol/L)轉(zhuǎn)染至THP-1細(xì)胞24 h。用濃度10.0 ng/m L的LPS誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染后的THP-1細(xì)胞24 h,分別采用Realtime RT-PCR和Western blot方法檢測細(xì)胞miR-33s及p38MAPK蛋白表達(dá),ELISA法檢測THP-1細(xì)胞培養(yǎng)上清液中白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6)的分泌量。結(jié)果 miR-33s mimic轉(zhuǎn)染組p38 MAPK蛋白表達(dá)明顯減少(P0.05),IL-1β、TNF-α、IL-6含量顯著降低(P0.05)。miR-33s inhibitor轉(zhuǎn)染組p38MAPK蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05),IL-1β、TNF-α、IL-6含量顯著上升(P0.05)。結(jié)論 LPS能誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞釋放IL-1β、TNF-α、IL-6;miR-33s mimic抑制炎性細(xì)胞因子的分泌。miR-33s inhibitor促進(jìn)促炎性細(xì)胞因子的分泌;miR-33s可能通過靶向結(jié)合p38 MAPK的3'末端非編碼區(qū)來發(fā)揮它的負(fù)性調(diào)節(jié)炎癥作用。
[Abstract]:Objective to investigate whether miR-33s can negatively regulate the inflammatory response induced by LPS by targeting p38 MAPK. Methods Human mononuclear cell line THP-1, was transfected into THP-1 cells for 24 h after transfection of miR-33s mimicry (mimic,25 nmol/L) and miR-33s inhibitor (inhibitor,25 nmol/L). After transfection of THP-1 cells induced by 10.0 ng/m L LPS for 24 h, the expression of miR-33s and p38MAPK protein in THP-1 cell culture supernatant was detected by Realtime RT-PCR and Western blot respectively. The levels of interleukin 1 尾 (IL-1 尾), tumor necrosis factor 偽 (TNF- 偽) and white blood cell (WBC) in the culture supernatant of THP-1 cells were detected by Elisa. Secretion of interleukin 6 (IL-6). Results the expression of p38 MAPK protein was significantly decreased in miR-33s mimic transfected group (P0.05). (P0.05). The expression of p38MAPK protein in MIR-33s inhibitor group was significantly increased (P0.05). Conclusion LPS can induce THP-1 cells to release IL-1 尾 -TNF- 偽 -TNF- 偽 IL-6mmiR-33s mimic to inhibit the secretion of inflammatory cytokines. MiR-33s inhibitor can promote the secretion of pro-inflammatory cytokines. MiR-33s may play a negative role in inflammatory regulation by targeting the 3'terminal noncoding region of p38 MAPK.
【作者單位】: 南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院麻醉科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金(編號:81301625) 湖南省科技廳科技基金(編號:2013FJ6006)
【分類號】:R364.5

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