【摘要】：目的體外構(gòu)建重組質(zhì)粒pEGFP-N1-apoJ,轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,并檢測(cè)其在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)。方法通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)重組質(zhì)粒pEGFP-N1-apoJ轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,確定轉(zhuǎn)染效率,并通過(guò)Real-time PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)法、Western blot法檢測(cè)載脂蛋白-J(apoJ)的表達(dá)。結(jié)果增強(qiáng)型綠色熒光蛋白在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染效率達(dá)35%。轉(zhuǎn)染后Real-time PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)法和Western blot法檢測(cè)證實(shí)重組質(zhì)粒pEGFP-N1-apoJ在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)論重組質(zhì)粒p EGFPN1-apoJ成功轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,并在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中得到表達(dá),有助于應(yīng)用apoJ行基因治療,為進(jìn)一步研究apoJ作為新的腦出血治療措施奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
[Abstract]:Aim to construct a recombinant plasmid pEGFP-N1-apoJ, to transfect rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) and detect its expression in rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). Methods Rat bone marrow mesenchymal stem cells were transfected with recombinant plasmid pEGFP-N1-apoJ mediated by liposome and the transfection efficiency was determined. The expression of apolipoprotein -J (apoJ) was detected by Real-time PCR, immunocytochemistry and Western blot. Results the transient transfection efficiency of enhanced green fluorescent protein in rat bone marrow mesenchymal stem cells was 35%. The expression of recombinant plasmid pEGFP-N1-apoJ in rat bone marrow mesenchymal stem cells was confirmed by Real-time PCR, immunocytochemistry and Western blot assay. Conclusion the recombinant plasmid p EGFPN1-apoJ was successfully transfected into rat bone marrow mesenchymal stem cells and expressed in rat bone marrow mesenchymal stem cells, which was helpful for gene therapy with apoJ. To further study apoJ as a new treatment of intracerebral hemorrhage to lay the experimental foundation.
【作者單位】： 四川醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科;四川醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】：四川省衛(wèi)生廳課題基金(No:110597)
【分類號(hào)】：R329

【共引文獻(xiàn)】

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1 盧寧;趙龍鳳;李紅;郝彥琴;黃麗麗;;應(yīng)用全骨髓貼壁法獲取高純度大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2010年03期

2 季紅;高青;胡先同;范英昌;;丹酚酸B體外誘導(dǎo)MSCs向心肌細(xì)胞分化中β-catenin表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[J];天津中醫(yī)藥;2013年11期

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2 李秀英;人間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及免疫抑制作用機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2015年

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2 劉婕婷;HGF基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞源性脂肪細(xì)胞與PLGA構(gòu)建組織工程脂肪的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2008年

3 陳麗;體外誘導(dǎo)大鼠骨髓及人胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞向多巴胺能樣細(xì)胞分化[D];暨南大學(xué);2008年

4 楊艷麗;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞PKH26標(biāo)記后生物學(xué)性狀及其向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年

5 陳國(guó)歡;Angiopoietin-1通過(guò)整合素對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞粘附存活和凋亡的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

6 王力;淫羊藿總多糖對(duì)體外培養(yǎng)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)影響的研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2009年

7 趙艷梅;體外不同誘導(dǎo)條件對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

8 戴儒麗;川芎嗪對(duì)骨髓間質(zhì)干細(xì)胞增殖、SDF-1mRNA表達(dá)及向心肌樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2010年

9 盧寧;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及脂多糖對(duì)其增殖與分泌TNF-α的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 莊淑波;劉毅;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在整形外科的應(yīng)用前景[J];中國(guó)美容醫(yī)學(xué);2006年03期

2 莊淑波;劉毅;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外成脂分化能力的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)美容醫(yī)學(xué);2006年11期

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本文編號(hào)：2199739