【摘要】： 本研究利用基因重組技術(shù)，在已經(jīng)構(gòu)建出的具有Fc段的完全人源抗狂犬病毒抗體表達(dá)載體基礎(chǔ)上，通過PCR介導(dǎo)的定點(diǎn)突變技術(shù)，構(gòu)建出一個(gè)可供CDR3自由篩選、鑒定、表達(dá)的通用載體。 將體外合成的人源、鼠源抗HER2抗體的CDR3連接至構(gòu)建出的通用載體上，通過對(duì)其在酵母中表達(dá)產(chǎn)物的生物學(xué)及免疫學(xué)功能的檢測(cè)，對(duì)本實(shí)驗(yàn)所構(gòu)建出的通用載體和表達(dá)出的重組人源、鼠源抗HER2抗體進(jìn)行鑒定。 本研究還利用網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)，以首個(gè)應(yīng)用于HER2陽(yáng)性乳腺癌患者的人源化HER2重組單克隆抗體Herceptin作為參照，對(duì)重組人源、鼠源抗HER2抗體分別進(jìn)行一級(jí)結(jié)構(gòu)、二級(jí)結(jié)構(gòu)和三維結(jié)構(gòu)分析，通過三者之間的對(duì)比，找出決定HER2抗體活性的關(guān)鍵，為HER2治療性單抗的研制提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:In this study, by using gene recombination technique, based on the constructed full-human anti-rabies virus antibody expression vector with FC segment and PCR mediated site-directed mutagenesis, a CDR3 free screening and identification was constructed. A universal vector for expression. The CDR3 of human and mouse anti HER2 antibody synthesized in vitro was ligated to the constructed universal vector, and the biological and immunological functions of the expressed product in yeast were detected. The universal vector constructed in this experiment and the recombinant human and mouse anti-HER2 antibody were identified. Using the network database, the first humanized HER2 recombinant monoclonal antibody (Herceptin) applied to HER2 positive breast cancer patients was used as the reference, and the primary structure, secondary structure and three dimensional structure of the recombinant human and murine anti-HER2 antibodies were analyzed respectively. The key to determine the activity of HER2 antibody was found out through the comparison among them, which provided theoretical and experimental basis for the development of HER2 therapeutic monoclonal antibody.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號(hào)】：R392.11

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2145990