發(fā)布時間：2018-07-08 17:58

  本文選題：脂肪組織 + 間質(zhì)干細(xì)胞��； 參考：《中國組織工程研究》2015年06期

【摘要】：背景:脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞因其取材安全、創(chuàng)傷小、易純化、增殖快等優(yōu)點(diǎn)而備受關(guān)注。目的:建立一種有效、快速分離培養(yǎng)較高純度小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,熒光標(biāo)記后探索其是否可在體內(nèi)向腸道歸巢。方法:取小鼠腹股溝及附睪脂肪,用0.1%Ⅰ型膠原酶消化得到單細(xì)胞,并與剩余未消化脂肪組織塊一起接種,貼壁培養(yǎng)獲得脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,通過細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞表型、生長動力學(xué)、成骨成脂分化潛能4個方面進(jìn)行鑒定,并將脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞用PKH67標(biāo)記后經(jīng)尾靜脈注射移植到潰瘍性結(jié)腸炎模型小鼠體內(nèi),觀察其向腸道的歸巢情況。結(jié)果與結(jié)論:脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞鏡下呈梭形,快速增殖呈漩渦狀排列,細(xì)胞高表達(dá)CD29、CD44、CD90,不表達(dá)CD45。成骨誘導(dǎo)堿性磷酸酶染色顯示有黑色顆粒生成,茜素紅S染色呈紅色結(jié)節(jié),成脂誘導(dǎo)油紅O染色顯示有大量脂滴。細(xì)胞生長曲線顯示第3-5天為對數(shù)增長期,細(xì)胞生長活力良好。結(jié)腸冰凍切片在熒光顯微鏡下可見綠色熒光光點(diǎn),并隨時間推移有增加趨勢。以上結(jié)果表明采用膠原酶消化加組織塊貼壁法體外分離培養(yǎng)的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞增殖快、純度高,可向成骨成脂細(xì)胞分化,在體內(nèi)可向結(jié)腸歸巢并增殖。
[Abstract]:Background: adipose derived mesenchymal stem cells (MSCs) have attracted much attention due to their advantages of safety, small trauma, easy purification and rapid proliferation. Aim: to establish an effective and rapid method for isolation and culture of adipose mesenchymal stem cells (MSCs) from high purity mice. Methods: the adipose mesenchymal stem cells were obtained from mouse inguinal and epididymal adipose cells after digested with 0.1% collagenase and inoculated with residual undigested adipose tissue. The adipose mesenchymal stem cells were obtained by cell morphology and phenotype. The growth kinetics and adipogenic differentiation potential of adipose mesenchymal stem cells were identified. The adipose mesenchymal stem cells were labeled with PKH67 and injected into the ulcerative colitis model mice via tail vein to observe the homing of adipose mesenchymal stem cells to the intestine. Results and conclusion: adipose mesenchymal stem cells were fusiform under microscope, and rapid proliferation was whirlpool. Osteoblast-induced alkaline phosphatase staining showed black granulation, alizarin red S staining showed red nodules, and lipogenic oil red O staining showed a large number of lipid droplets. The cell growth curve showed the logarithmic growth period on day 3-5, and the cell growth activity was good. Green fluorescent spots were observed in colonic frozen sections under fluorescence microscope and increased with time. The results showed that the adipose mesenchymal stem cells isolated and cultured by collagenase digestion and tissue mass adherence could proliferate rapidly and have high purity, and could differentiate into osteoblasts and homing and proliferating into colon in vivo.
【作者單位】： 北京大學(xué)航天臨床醫(yī)學(xué)院消化科;北京大學(xué)人民醫(yī)院臨床分子生物學(xué)研究所;
【基金】：航天中心醫(yī)院特色臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展科研項(xiàng)目(YN2013TS03)《間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合內(nèi)皮祖細(xì)胞治療小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的療效及機(jī)制研究》~~
【分類號】：R329.2

【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2108249