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神經(jīng)生長因子在誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞分化中的作用

發(fā)布時(shí)間:2018-07-06 17:17

  本文選題:神經(jīng)生長因子 + 樹突狀細(xì)胞; 參考:《中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2015年08期


【摘要】:目的:在體外探討神經(jīng)生長因子(nerve growth factor,NGF)在刺激小鼠骨髓來源的樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)分化過程中的作用。方法:首先取C57BL/6小鼠股骨、脛骨骨髓細(xì)胞,按培養(yǎng)過程中干預(yù)因素不同分為磷酸鹽緩沖液(phosphate buff ered saline,PBS)刺激組(PBS組,n=6)、NGF刺激組(NGF組,n=6)、粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte monocyte colony stimulating factor,GM-CSF)和IL-4共刺激組(GM-CSF+IL-4組,n=6)、NGF加GM-CSF和IL-4共刺激組(NGF+GM-CSF+IL-4組,n=6),培養(yǎng)第7天采用流式細(xì)胞儀比較各組間CD11c+細(xì)胞陽性率和CD8a-亞型比例;然后用GM-CSF+IL-4刺激培養(yǎng)未成熟的DCs,經(jīng)CD11c免疫磁珠陽性分選得到純化的未成熟DCs,將其分為PBS組(n=6)、NGF組(n=6)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)組(LPS組,n=6)、NGF+LPS組(n=6),分別用PBS,NGF,LPS,NGF+LPS誘導(dǎo)細(xì)胞成熟,24 h后酶聯(lián)免疫吸附分析法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)上清液中IL-6,IL-10和IL-12的水平。結(jié)果:1)NGF組CD11c+DCs百分比高于PBS組,低于GM-CSF+IL-4組(均P0.05);GM-CSF+IL-4組與NGF+GM-CS F+IL-4組間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且在4組中均以CD8a-DCs為主;2)NGF可以增強(qiáng)LPS誘導(dǎo)的DCs分泌IL-6,IL-10和IL-12(均P0.05),而單獨(dú)NGF刺激對(duì)DCs分泌IL-6,IL-10和IL-12無影響(均P0.05)。結(jié)論:NGF可以誘導(dǎo)小鼠骨髓細(xì)胞向CD11c+DCs的定向分化,并且以CD8a-亞型為主;NGF能增強(qiáng)LPS誘導(dǎo)的DC分泌IL-6,IL-10和IL-12。
[Abstract]:Aim: to investigate the role of nerve growth factor (nerve growth) in the differentiation of dendritic cells derived from bone marrow in vitro. Methods: bone marrow cells of femur and tibia were taken from C57BL / 6 mice. According to the intervention factors during the culture process, they were divided into three groups: phosphate buffer (phosphate buff ered Saline PBS) stimulation group (PBS group) and NGF-stimulated group (NGF group), granulocyte macrophage colony-stimulating factor (granulocyte monocyte colony stimulating factor-GM-CSF group and IL-4 co-stimulation group (GM-CSF IL-4 group, nn6 group), NGF plus GM-CSF and IL-4 co-stimulation group (NGF + GM-CSF and IL-4 co-stimulation group). (NGF GM-CSF IL-4 group). On the 7th day, the positive rate of CD11c cells and the ratio of CD8a- subtype were compared by flow cytometry. Immature DCswere cultured with GM-CSF IL-4 and purified by CD11c immunomagnetic bead positive sorting. The immature DCswere divided into two groups: PBS group (nong6), lipopolysaccharide polysaccharide group (LPS group nn6) and LPS group (LPS group nn6). The levels of IL-6 IL-10 and IL-12 in supernatant were detected by (enzyme linked immunosorbent Elisa. Results the percentage of CD11c DCs in NGF group was higher than that in PBS group and lower than that in GM-CSF IL-4 group (P0.05). There was no significant difference (P0.05), and in the four groups, CD8a-DCs were the main group. NGF could enhance the secretion of IL-6 IL-10 and IL-12 by LPS induced DCs (P0.05), but NGF alone had no effect on the secretion of IL-6 IL-10 and IL-12 by DCs (P0.05). Conclusion the differentiation of bone marrow cells into CD11c DCs can be induced by 1: 10% NGF, and CD8a- subtype can enhance the secretion of IL-6 IL-10 and IL-12 by LPS-induced DCs.
【作者單位】: 中南大學(xué)湘雅醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81170023)~~
【分類號(hào)】:R329.2

【共引文獻(xiàn)】

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6 包晶晶;林海霞;馬t,

本文編號(hào):2103548


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