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血管緊張素Ⅱ?qū)θ四殠чg充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-07-06 16:52

  本文選題:血管緊張素Ⅱ + 臍帶 ; 參考:《中華損傷與修復(fù)雜志(電子版)》2015年05期


【摘要】:目的體外觀察不同濃度血管緊張素Ⅱ(Ang-Ⅱ)對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(h UCMSC)凋亡、增殖和旁分泌的影響,篩選適宜濃度Ang-Ⅱ預(yù)處理h UCMSC。方法照筆者單位實(shí)驗(yàn)室建立的方法,體外分離、培養(yǎng)并鑒定h UCMSC,取3~8代h UCMSC接種于培養(yǎng)板,將細(xì)胞按隨機(jī)數(shù)字表法分為4組(每組3個(gè)復(fù)孔):空白對(duì)照組、100 ng/m L Ang-Ⅱ組、500 ng/m L Ang-Ⅱ組及1000 ng/m L Ang-Ⅱ組,后3組分別于含有100ng/m L、500 ng/m L及1000 ng/m L Ang-Ⅱ的培養(yǎng)基、空白對(duì)照組使用不含有Ang-Ⅱ的培養(yǎng)基培養(yǎng),各組于培養(yǎng)24、48、72 h后分別于倒置顯微鏡鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞融合的情況,吖啶橙/溴化乙錠(AO/EB)染色法檢測細(xì)胞凋亡情況,CCK-8法檢測細(xì)胞增殖活性,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期(S期),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測各組細(xì)胞上清液中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(b FGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)的含量。結(jié)果培養(yǎng)24、48、72 h后,倒置顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)類似,均呈長梭形,少數(shù)細(xì)胞呈多角形,100 ng/m L Ang-Ⅱ組細(xì)胞的融合率分別為40%~45%、70%~80%、90%~95%,融合速度顯著增加。AO/EB結(jié)果顯示:僅100 ng/m L Ang-Ⅱ組與空白對(duì)照組未出現(xiàn)凋亡細(xì)胞或死亡細(xì)胞。CCK-8的結(jié)果同樣顯示100 ng/m L Ang-Ⅱ組細(xì)胞增殖速度顯著快于空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示為100 ng/m L Ang-Ⅱ組所處的增殖周期(S)期細(xì)胞數(shù)量的比例顯著增加。ELISA檢測結(jié)果是100 ng/m L Ang-Ⅱ組細(xì)胞的VEGF、b FGF、HGF含量最高,與空白對(duì)照組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均小于0.05)。結(jié)論 100 ng/m L Ang-Ⅱ具有抑制細(xì)胞凋亡,促進(jìn)細(xì)胞增殖的功能,這可能與其使h UCMSC大量分泌VEGF、b FGF、HGF有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of different concentrations of angiotensin 鈪,

本文編號(hào):2103484

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