AdeABC主動外排系統(tǒng)與鮑曼不動桿菌多重耐藥性的研究
本文選題:鮑曼不動桿菌 + 多重耐藥 ; 參考:《中國醫(yī)科大學(xué)》2009年碩士論文
【摘要】: 研究背景 鮑曼不動桿菌是引起院內(nèi)感染的重要病原菌,易引起醫(yī)院獲得性肺炎、菌血癥、泌尿系統(tǒng)感染、腦膜炎、軟組織感染以及腹腔內(nèi)感染等嚴重感染。特別是近年國內(nèi)外報道多重耐藥鮑曼不動桿菌在重癥監(jiān)護病房、血液病房引起暴發(fā)流行,病死率極高。隨著鮑曼不動桿菌感染治療越來越困難常表現(xiàn)為對多種抗菌藥物耐藥即多重耐藥,臨床治療也面臨著嚴峻的挑戰(zhàn)。因此加強對其多重耐藥機制的研究,有助于臨床醫(yī)生選擇合適抗菌藥物,同時對控制鮑曼不動桿菌引起的院內(nèi)感染也具有重要的現(xiàn)實意義。 目的 目前大多數(shù)不動桿菌為多重耐藥(Multi-drug Resistant Acinetobacter,MDR-A),即同時對β-內(nèi)酰胺類、喹諾酮類、氨基糖苷類耐藥。近年來相關(guān)研究表明主動外排機制是引起多重耐藥的重要因素,而我國此類研究不多。本文就本院鮑曼不動桿菌耐藥性進行分析,通過外排表型試驗了解主動外排機制在介導(dǎo)鮑曼不動桿菌多重耐藥機制中的作用;同時進行外排泵相關(guān)基因檢測;上述研究將為明確本地區(qū)鮑曼不動桿菌多重耐藥機制提供有益線索。 方法 回顧性分析我院7年來鮑曼不動桿菌對10種臨床常用抗菌藥物的耐藥監(jiān)測結(jié)果;篩選2007年1月-2007年12月中國醫(yī)科大學(xué)附屬一院臨床分離的鮑曼不動桿菌,經(jīng)Vitek2系統(tǒng)進一步鑒定確定為鮑曼不動桿菌;采用Kirby-Bauer紙片擴散法檢測鮑曼不動桿菌對12種抗菌藥物的敏感性篩選出50株多重耐藥菌;采用瓊脂稀釋法測定亞胺培南,頭孢噻肟,環(huán)丙沙星以及阿米卡星的MIC值,同時進行外排表型試驗;采用PCR方法擴增外排泵編碼基因及調(diào)節(jié)基因,通過DNA序列測定以及與GenBank序列的比對分析,了解外排泵的基因結(jié)構(gòu)。 結(jié)果 50株多重耐藥菌株對亞胺培南、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星和阿米卡星的MIC值的范圍分別為1-128μg/ml,128-512μg/ml,16-128μg/ml和32-1024μg/ml。同時以亞胺培南、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星和阿米卡星作為底物,四種抗菌藥物外排表型檢測結(jié)果顯示:在25μg/ml利血平存在條件下,50株多重耐藥菌分別有46、50、49和50株菌MIC值降低4倍或4倍以上,呈現(xiàn)明顯的外排作用;而在CCCP存在條件下,分別有21、44、26和48株菌MIC值降低4倍或4倍以上。兩種外排泵抑制劑之間存在不同的外排效果。外排泵相關(guān)基因檢測結(jié)果:泵編碼基因adeB的檢出率為94%,而雙組份調(diào)節(jié)系統(tǒng)adeR、adeS基因的檢出率分別為96%、92%。 討論 我院鮑曼不動桿菌對β-內(nèi)酰胺類、磺胺類及氨基糖苷類藥物的敏感性呈逐年下降趨勢。研究發(fā)現(xiàn)外排泵抑制劑利血平和CCCP能明顯提高多重耐藥鮑曼不動桿菌藥物的體外抗菌活性。這提示本研究所收集的鮑曼不動桿菌的多重耐藥性與主動外排機制密切相關(guān),同時兩種外排泵抑制劑的不同外排效果提示可能存在除AdeABC型以外的泵出系統(tǒng)。本研究將為監(jiān)測本地區(qū)鮑曼不動桿菌的多重耐藥機制奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Background of the study
It is an important pathogen causing nosocomial infection , which is apt to cause severe infections such as pneumonia , bacteraemia , urinary system infection , meningitis , soft tissue infection and intra - abdominal infection .
Purpose
In recent years , the study shows that the active efflux mechanism is one of the most important factors causing multiple drug resistance .
method
A retrospective analysis was made on the results of resistance to antibiotics in ten clinical commonly used antibiotics in our hospital from January 2007 to December 2007 . The results were as follows : 50 strains of multiple drug resistant strains were screened for susceptibility to 12 antibacterial drugs from January 2007 to December 2007 . The gene and regulatory genes were amplified by agar dilution method . The gene structure of efflux pump was determined by DNA sequencing and comparison with GenBank .
Results
In the presence of 25 渭g / ml reserpine , there were 46 , 50 , 49 and 50 bacterial MIC values of 46 , 50 , 49 and 50 strains decreased by 4 or more than 4 times or more respectively . The results showed that the detection rate of the two efflux pump inhibitors was 94 % and the detection rate of adeR and adeS genes was 96 % and 92 % respectively .
discuss
The sensitivity of acinetobacter baumandii to 尾 - lactam , sulfanilamide and aminoglycosides has been decreasing year by year . It is found that both reserpine and CCCP of efflux pump can significantly increase the antibacterial activity in vitro . This suggests that the multiple drug resistance of baumanii collected by this study is closely related to the active efflux mechanism , and the different efflux effect of two efflux pump inhibitors suggests that there may be pumping systems other than AdeABC type . This study will provide the basis for monitoring the multiple drug resistance mechanism of baumanii in the region .
【學(xué)位授予單位】:中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2009
【分類號】:R378.9
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,本文編號:2081809
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