本文選題：鮑曼不動(dòng)桿菌 + 多重耐藥��； 參考：《中國(guó)醫(yī)科大學(xué)》2009年碩士論文

【摘要】： 研究背景 鮑曼不動(dòng)桿菌是引起院內(nèi)感染的重要病原菌,易引起醫(yī)院獲得性肺炎、菌血癥、泌尿系統(tǒng)感染、腦膜炎、軟組織感染以及腹腔內(nèi)感染等嚴(yán)重感染。特別是近年國(guó)內(nèi)外報(bào)道多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌在重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病房引起暴發(fā)流行,病死率極高。隨著鮑曼不動(dòng)桿菌感染治療越來(lái)越困難常表現(xiàn)為對(duì)多種抗菌藥物耐藥即多重耐藥,臨床治療也面臨著嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。因此加強(qiáng)對(duì)其多重耐藥機(jī)制的研究,有助于臨床醫(yī)生選擇合適抗菌藥物,同時(shí)對(duì)控制鮑曼不動(dòng)桿菌引起的院內(nèi)感染也具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。 目的 目前大多數(shù)不動(dòng)桿菌為多重耐藥(Multi-drug Resistant Acinetobacter,MDR-A),即同時(shí)對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、氨基糖苷類(lèi)耐藥。近年來(lái)相關(guān)研究表明主動(dòng)外排機(jī)制是引起多重耐藥的重要因素,而我國(guó)此類(lèi)研究不多。本文就本院鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性進(jìn)行分析,通過(guò)外排表型試驗(yàn)了解主動(dòng)外排機(jī)制在介導(dǎo)鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥機(jī)制中的作用;同時(shí)進(jìn)行外排泵相關(guān)基因檢測(cè);上述研究將為明確本地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥機(jī)制提供有益線索。 方法 回顧性分析我院7年來(lái)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)10種臨床常用抗菌藥物的耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果;篩選2007年1月-2007年12月中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬一院臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌,經(jīng)Vitek2系統(tǒng)進(jìn)一步鑒定確定為鮑曼不動(dòng)桿菌;采用Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法檢測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)12種抗菌藥物的敏感性篩選出50株多重耐藥菌;采用瓊脂稀釋法測(cè)定亞胺培南,頭孢噻肟,環(huán)丙沙星以及阿米卡星的MIC值,同時(shí)進(jìn)行外排表型試驗(yàn);采用PCR方法擴(kuò)增外排泵編碼基因及調(diào)節(jié)基因,通過(guò)DNA序列測(cè)定以及與GenBank序列的比對(duì)分析,了解外排泵的基因結(jié)構(gòu)。 結(jié)果 50株多重耐藥菌株對(duì)亞胺培南、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星和阿米卡星的MIC值的范圍分別為1-128μg/ml,128-512μg/ml,16-128μg/ml和32-1024μg/ml。同時(shí)以亞胺培南、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星和阿米卡星作為底物,四種抗菌藥物外排表型檢測(cè)結(jié)果顯示:在25μg/ml利血平存在條件下,50株多重耐藥菌分別有46、50、49和50株菌MIC值降低4倍或4倍以上,呈現(xiàn)明顯的外排作用;而在CCCP存在條件下,分別有21、44、26和48株菌MIC值降低4倍或4倍以上。兩種外排泵抑制劑之間存在不同的外排效果。外排泵相關(guān)基因檢測(cè)結(jié)果:泵編碼基因adeB的檢出率為94%,而雙組份調(diào)節(jié)系統(tǒng)adeR、adeS基因的檢出率分別為96%、92%。 討論 我院鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)、磺胺類(lèi)及氨基糖苷類(lèi)藥物的敏感性呈逐年下降趨勢(shì)。研究發(fā)現(xiàn)外排泵抑制劑利血平和CCCP能明顯提高多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌藥物的體外抗菌活性。這提示本研究所收集的鮑曼不動(dòng)桿菌的多重耐藥性與主動(dòng)外排機(jī)制密切相關(guān),同時(shí)兩種外排泵抑制劑的不同外排效果提示可能存在除AdeABC型以外的泵出系統(tǒng)。本研究將為監(jiān)測(cè)本地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌的多重耐藥機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Background of the study



It is an important pathogen causing nosocomial infection , which is apt to cause severe infections such as pneumonia , bacteraemia , urinary system infection , meningitis , soft tissue infection and intra - abdominal infection .



Purpose



In recent years , the study shows that the active efflux mechanism is one of the most important factors causing multiple drug resistance .



method



A retrospective analysis was made on the results of resistance to antibiotics in ten clinical commonly used antibiotics in our hospital from January 2007 to December 2007 . The results were as follows : 50 strains of multiple drug resistant strains were screened for susceptibility to 12 antibacterial drugs from January 2007 to December 2007 . The gene and regulatory genes were amplified by agar dilution method . The gene structure of efflux pump was determined by DNA sequencing and comparison with GenBank .



Results



In the presence of 25 渭g / ml reserpine , there were 46 , 50 , 49 and 50 bacterial MIC values of 46 , 50 , 49 and 50 strains decreased by 4 or more than 4 times or more respectively . The results showed that the detection rate of the two efflux pump inhibitors was 94 % and the detection rate of adeR and adeS genes was 96 % and 92 % respectively .



discuss



The sensitivity of acinetobacter baumandii to 尾 - lactam , sulfanilamide and aminoglycosides has been decreasing year by year . It is found that both reserpine and CCCP of efflux pump can significantly increase the antibacterial activity in vitro . This suggests that the multiple drug resistance of baumanii collected by this study is closely related to the active efflux mechanism , and the different efflux effect of two efflux pump inhibitors suggests that there may be pumping systems other than AdeABC type . This study will provide the basis for monitoring the multiple drug resistance mechanism of baumanii in the region .
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類(lèi)號(hào)】：R378.9

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本文編號(hào)：2081809