本文選題：肝干細(xì)胞 + 肝細(xì)胞生長因子　； 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的 探討和比較不同體外條件對大鼠胚胎肝干細(xì)胞分化成熟的影響。 方法 將取自孕14天胎齡F344大鼠胚胎肝組織的肝干細(xì)胞分別接種至含10、20、40 ng/mL肝細(xì)胞生長因子(Hepatocyte Growth Factor HGF),0.5%、1%、2%二甲基亞砜(Dimethyl Sulfoxide DMSO),10 ng/mL HGF+0.5% DMSO、20 ng/mL HGF+1% DMSO、40 ng/mL HGF+2% DMSO以及空白的培養(yǎng)基中進(jìn)行體外培養(yǎng)15 d;誘導(dǎo)15 d后,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay ELISA)檢測和比較不同組細(xì)胞內(nèi)甲胎蛋白(alpha fetoprotein AFP)和白蛋白(albumin ALB)的濃度,實(shí)時(shí)定量PCR比較不同組細(xì)胞ALB、葡萄糖6-磷酸酶(Glucose-6-phosphatase G-6P)、細(xì)胞角蛋白8(Cytokeratin 8 CK-8)、細(xì)胞角蛋白18(Cytokeratin 18 CK-18)的mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果 誘導(dǎo)15 d后各實(shí)驗(yàn)組與空白對照組相比肝干細(xì)胞ELISA檢測AFP明顯下降(P0.01),ALB明顯升高(P0.01);實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果表明各實(shí)驗(yàn)組ALB、G-6P、CK-8、CK-18的mRNA水平較對照組均明顯升高,其中大鼠胎肝干細(xì)胞體外最佳誘導(dǎo)條件為20 ng/mL HGF+1% DMSO(P0.05)。 結(jié)論 HGF和DMSO均可在體外誘導(dǎo)大鼠肝干細(xì)胞分化,不同濃度HGF和DMSO影響其分化成熟程度;HGF、DMSO對大鼠胎肝干細(xì)胞的分化具協(xié)同效應(yīng)。
[Abstract]:Objective to investigate and compare the effects of different conditions on the differentiation and maturation of rat embryonic liver stem cells in vitro. Methods Hepatic stem cells derived from fetal liver tissue of F344 rats were inoculated into 10% 20 ~ 40 ng / mL Hepatocyte growth Factor (HGF) and 0.5% dimethyl Sulfoxide DMSO 10 ng / mL HGF 0.5% DMSO-1% DMSO-40 ng / mL HGF 2% HGF 2% HGF 20 ng / mL HGF 20 ng / mL HGF 1% DMSO-1% DMSO-40 ng / mL HGF 2%. DMSO and blank medium were cultured in vitro for 15 days, and after 15 days of induction, Enzyme linked immunosorbent assay (enzyme-linked immunosorbent assay) was used to detect and compare the concentrations of (alpha fetoprotein and albumin. The mRNA levels of ALB, Glucose-6-phosphatase G-6P, cytokeratin 8 CK-8 and cytokeratin 18 CK-18 were compared by real-time quantitative PCR. Results after 15 days of induction, the levels of AFP in liver stem cell Elisa were significantly decreased (P0.01) and ALB was significantly increased (P0.01) in each experimental group compared with the control group, and the mRNA level of CK-8 CK-18 in all experimental groups was significantly higher than that in the control group. The optimal induction condition of rat fetal liver stem cells in vitro was 20 ng / mL HGF 1% DMSO (P0.05). Conclusion both HGF and DMSO can induce the differentiation of rat hepatic stem cells in vitro. Different concentrations of HGF and DMSO have synergistic effects on the differentiation of rat fetal liver stem cells.
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R329

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本文編號：2078413