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不同碘攝入量對(duì)子二代小鼠生長(zhǎng)、腦發(fā)育的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-06-28 13:43

  本文選題:碘缺乏 + 碘過(guò)量; 參考:《天津醫(yī)科大學(xué)》2008年碩士論文


【摘要】: 目的: 研究不同碘攝入量對(duì)20日齡、40日齡子二代Balb/c小鼠生長(zhǎng)發(fā)育的影響及大腦、小腦皮質(zhì)和海馬的形態(tài)學(xué)改變,進(jìn)一步探討碘缺乏和碘過(guò)量對(duì)子二代小鼠生長(zhǎng)發(fā)育、大腦、小腦發(fā)育及功能的影響。 方法: 選用斷乳后一個(gè)月,體重在16~20 g的SPF-VAF級(jí)的Balb/c小鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為5組:低碘組(LI)、適碘組(NI)、5倍碘組(5HI)、10倍碘組(10HI)、50倍碘組(50HI),LI組動(dòng)物飼以低碘飼料(平均碘含量<50μg/kg),其余各組飼以正常飼料(平均碘含量300μg/kg),上述兩種飼料中各種糧食的配比相同,只是碘含量不同。LI組飲用去離子水,其余各組飲用含不同濃度碘化鉀的去離子水,其飲水中碘化鉀含量分別為10μg/L(NI),1200μg/L(5HI),2700μg/L(10HI),14700μg/L(50HI)。小鼠每日的碘攝入量估計(jì)如下:小鼠每日進(jìn)食5g,進(jìn)水5ml,各組動(dòng)物每日碘攝入量分別為:<1μg/d(LI),1.5μg/d(NI),7.5μg/d(5HI),15μg/d(10HI),75μg/d(50HI)。喂養(yǎng)三個(gè)月后,雌雄隨機(jī)1:1合籠,連續(xù)傳兩代,分別取20日齡、40日齡子二代小鼠腦組織,電子天平稱重,中性福爾馬林溶液固定后常規(guī)石蠟包埋,進(jìn)行焦油紫染色、免疫組化(NSE、GFAP、MBP)染色,觀察大腦皮質(zhì),海馬區(qū)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變。應(yīng)用Motic Images Advanced 3.1圖像分析系統(tǒng)測(cè)量以下指標(biāo):焦油紫染色切片中大腦皮質(zhì)分子層厚度;免疫組化切片中海馬CA3區(qū)NSE陽(yáng)性神經(jīng)元面數(shù)密度、平均光密度;CA1區(qū)GFAP陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞面數(shù)密度、平均光密度及MBP陽(yáng)性少突膠質(zhì)細(xì)胞平均光密度。小腦NSE陽(yáng)性神經(jīng)元和GFAP陽(yáng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞的面數(shù)密度(N_A)、體積密度(V_V)、細(xì)胞質(zhì)的平均光密度,MBP陽(yáng)性神經(jīng)纖維平均光密度,小腦皮質(zhì)分子層及顆粒層厚度。 結(jié)果: 1子二代小鼠生長(zhǎng)發(fā)育:20日齡時(shí),LI組和50HI組子二代小鼠的體重、腦重和身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)、后肢長(zhǎng)與NI組相比呈現(xiàn)出了不同程度的發(fā)育落后,其中LI組表現(xiàn)更為明顯。40日齡時(shí)小鼠體格有所增長(zhǎng),但與NI組比較,LI組和50HI組仍呈現(xiàn)不同程度的發(fā)育落后。 2子二代小鼠大腦皮質(zhì)、海馬發(fā)育:與NI組相比,20日齡、40日齡子二代小鼠其余各組均表現(xiàn)出不同程度的腦發(fā)育差別,其中LI組、50HI組落后更為明顯,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3子二代小鼠小腦皮質(zhì)、顆粒層,髓質(zhì)發(fā)育:與NI組相比,20日齡、40日齡子二代小鼠其余各組小腦GFAP、NSE、MBP及皮質(zhì)層、顆粒層厚度均降低,其中LI組、50HI組落后更為明顯,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論: 1子二代小鼠生長(zhǎng)發(fā)育:碘缺乏和嚴(yán)重碘過(guò)量都會(huì)影響子二代小鼠的生長(zhǎng)發(fā)育,其中碘缺乏的影響更為明顯,其機(jī)理可能與碘缺乏和碘過(guò)量所致甲狀腺功能低下有關(guān)。 2子二代小鼠大、小腦皮質(zhì)、海馬發(fā)育:腦發(fā)育臨界期碘缺乏和嚴(yán)重碘過(guò)量都會(huì)影響子二代小鼠大腦皮質(zhì)發(fā)育,海馬區(qū)及小腦神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的酶和蛋白的合成和代謝。
[Abstract]:Objective: to study the effects of different iodine intake on the growth and development of the second generation Balb / c mice at the age of 20 and 40 days and the morphological changes in the cerebellum, cerebellar cortex and hippocampus. To further investigate the effects of iodine deficiency and iodine excess on the growth, development and function of the second generation mice. Methods: one month after weaning, Balb / c mice of SPF-VAF grade, weighing 1620 g, were divided into two groups, half male and half female. They were randomly divided into five groups: low iodine group (Li), high iodine group (NI), 5 times iodine group (5 HI), 10 times iodine group (10 HI), 50 times iodine group (50 HI) and 50 times iodine group (average iodine content < 50 渭 g/kg). The rest groups were fed with normal diet (average iodine content 300 渭 g/kg). The proportion of grain is the same. Only the deionized water with different iodine content. The other groups drank deionized water with different concentrations of potassium iodide, and the drinking water contained 10 渭 g / L (NI) 1200 渭 g / L (5HI) of 2700 渭 g / L (10HI) 14700 渭 g / L (50HI) of potassium iodide. The daily iodine intake of mice was estimated as follows: the daily iodine intake of mice was less than 1 渭 g / d (Li), 1.5 渭 g / d (NI), 7.5 渭 g / d (5HI), 15 渭 g / d (10 HI) and 75 渭 g / d (50HI), respectively. After feeding for three months, the male and female were randomly caged at 1:1 for two consecutive generations. The brain tissues of the second generation mice of 20 days old or 40 days old were weighed by electronic balance, fixed with neutral formalin solution and routinely embedded in paraffin, and then stained with tar violet. The morphological changes of neurons, astrocytes and oligodendrocytes in the cerebral cortex, hippocampus and astrocytes were observed by immunohistochemical staining (NSE-GFAP MBP). The following indexes were measured by using the image analysis system of Motic Images Advanced 3.1: the thickness of cerebral cortex molecular layer in tar violet staining section and the number density of NSE-positive neurons in hippocampal CA3 area in immunohistochemical section. The number density of GFAP positive astrocytes, the average optical density and the average optical density of MBP positive oligodendrocytes in CA1 region were observed. The surface number density (NA), volume density (VV), mean optical density of MBP positive nerve fibers and the thickness of molecular layer and granular layer of cerebellar cortex were observed in cerebellar NSE positive neurons and GFAP positive astrocytes. Results: 1 the body weight, brain weight and body length, tail length, hind limb length of the second generation mice of the second generation of mice at the age of 20 days were lower than those of the NI group, and the mice in the second generation group showed different degrees of developmental backwardness compared with the NI group. The physique of Li group was more obvious than that of NI group at 40 days old, but compared with NI group, Li group and 50HI group still showed different degrees of developmental backwardness. Hippocampal development: compared with NI group, the other groups showed different degrees of brain development, especially in Li group. And the difference was statistically significant. The development of cerebellar cortex, granular layer and medulla: compared with NI group, the thickness of granular layer in cerebellar GFAPN NSEMBP and cortical layer of other groups were decreased compared with NI group. Li group was more backward than 50 HI group, and the difference was statistically significant. Conclusion: 1 the growth and development of the second generation mice: both iodine deficiency and severe iodine excess will affect the growth and development of the second generation mice, and the effect of iodine deficiency is more obvious. The mechanism may be related to hypothyroidism induced by iodine deficiency and iodine excess. Hippocampal development: iodine deficiency and severe iodine excess in the critical stage of brain development can affect the synthesis and metabolism of enzymes and proteins in the cerebral cortex, hippocampal and cerebellar neurons and glial cells of the second generation mice.
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類號(hào)】:R363

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