本文選題：環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增 + 單純皰疹病毒��； 參考：《南華大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的:建立單純皰疹病毒(Herpes Simple Virus)Ⅰ型和Ⅱ型、人乳頭瘤病毒(Human Papillomavirus)6型和11型的LAMP檢測(cè)方法。 方法:分別設(shè)計(jì)擴(kuò)增各型病毒特異基因的LAMP引物,提取病毒DNA,配置LAMP反應(yīng)體系,60～65℃保溫約60 min,完成對(duì)靶病原體基因的擴(kuò)增,肉眼及電泳判定擴(kuò)增結(jié)果。LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)酶切進(jìn)一步鑒定;設(shè)立對(duì)照組,評(píng)價(jià)LAMP方法的特異性;10倍系列稀釋模板,檢測(cè)LAMP技術(shù)的敏感性。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組經(jīng)LAMP后,肉眼觀察到LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn),電泳后呈LAMP特征性梯狀條帶,對(duì)照組均無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物;HSV及HPV LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)相應(yīng)限制性內(nèi)切酶酶切鑒定正確,特異性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與對(duì)照組無(wú)交叉反應(yīng),具有特異性;LAMP可檢測(cè)到單純皰疹病毒Ⅰ型、單純皰疹病毒Ⅱ型、人乳頭瘤病毒6型、人乳頭瘤病毒11型DNA的最低濃度分別是1 pg/μL、10 pg/μL、1 pg/μL、1 pg/μL,其敏感性與PCR相當(dāng)。 結(jié)論:建立了檢測(cè)單純皰疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型、人乳頭瘤病毒6型和11型的LAMP檢測(cè)方法,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示該法特異和敏感,有望用于臨床檢測(cè)。
[Abstract]:Objective: to establish a method for the detection of herpes simplex virus (Herpes simple virus) type 鈪，

本文編號(hào)：2014138