本文選題：結(jié)核分枝桿菌 + MPT　； 參考：《實用預(yù)防醫(yī)學(xué)》2015年04期

【摘要】：目的探討中國結(jié)核分枝桿菌MPT64抗原的多態(tài)性及對其T/B細(xì)胞抗原表位的影響;應(yīng)用MPT64抗原檢測試劑盒對MPT64基因突變菌株和野生菌株進(jìn)行檢測,以進(jìn)一步分析MPT64抗原多態(tài)性對結(jié)核感染檢測的影響。方法從中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所結(jié)核室保存的2 346株國內(nèi)結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群臨床分離株中挑選180株,對其MPT64基因擴(kuò)增后進(jìn)行序列比對,比較其T/B細(xì)胞抗原表位與非表位的多態(tài)性,對突變的菌株與野生菌株進(jìn)行BACTEC MGIT 960系統(tǒng)與液體培養(yǎng)管進(jìn)行培養(yǎng),報陽后,用膠體金標(biāo)記抗MPT64單克隆抗體采用免疫層析色譜法進(jìn)行MPT64蛋白檢測。結(jié)果 180株臨床分離株中有15株(包括2株BCG菌株)表現(xiàn)有MPT64蛋白的多態(tài)性,占菌株數(shù)的8.33%,8株菌有63bp的缺失,4株菌有單位點的非同義突變,1株是單位點插入。MPT64基因的突變造成13個T細(xì)胞抗原表位(56.52%)和4個B細(xì)胞抗原表位(占80%)的改變,T/B細(xì)胞抗原表位區(qū)的dN/dS值均高于對應(yīng)的非表位區(qū)。8株有63bp缺失的菌株膠體金檢測陰性,對應(yīng)的野生株檢測陽性;5株單位點突變的菌株與對應(yīng)的野生菌株膠體金檢測均陽性。結(jié)論中國結(jié)核分枝桿菌MPT64蛋白存在多態(tài)性,這是產(chǎn)生抗原改變的原因之一,這會影響抗原相關(guān)功能的改變并引起免疫逃逸。63bp缺失會造成MPT64抗原檢測試劑盒的假陰性,而某些單位點突變對檢測效率無影響。
[Abstract]:Objective to investigate the polymorphism of MPT64 antigen of Mycobacterium tuberculosis in China and its effect on T / B cell epitope, and to detect the mutant and wild strains of MPT64 gene by using MPT64 antigen detection kit. To further analyze the influence of MPT 64 antigen polymorphism on tuberculosis infection detection. Methods 180 strains of Mycobacterium tuberculosis were selected from the clinical isolates of 2 346 strains of Mycobacterium tuberculosis in the laboratory of the Infectious Disease Control and Prevention Center of China Center for Disease Control and Prevention. The MPT64 gene was amplified and sequenced. The polymorphism of T / B cell epitope and non-epitope was compared. The mutant strain and wild strain were cultured in BACTEC MGIT960 system and liquid culture tube. MPT 64 protein was detected by immunochromatography with colloidal gold labeled anti-MPT 64 monoclonal antibody. Results Fifteen of 180 clinical isolates (including 2 BCG strains) showed MPT64 protein polymorphism. 8 strains with 63bp missing 4 strains with non-synonymous mutation with unit point insertion of .MPT64 gene mutation resulting in 13 T cell epitopes 56.52% and 4 B cell antigen epitopes (80%) The values of DN / DS in the epitope of cell antigen were higher than those in the corresponding non-epitope. 8 strains with 63bp deletion were negative for colloidal gold. 5 strains with unit point mutation and the corresponding wild strains were tested positive for colloidal gold. Conclusion there is polymorphism in MPT64 protein of Mycobacterium tuberculosis in China, which is one of the causes of antigen change. It will affect the change of antigen-related function and cause the deletion of immune escape. 63 BP will result in false negative of MPT64 antigen detection kit. However, some unit point mutations had no effect on detection efficiency.
【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所傳染病預(yù)防控制國家重點實驗室感染性疾病診治協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(編號:81401647)
【分類號】：R378.911

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本文編號：2013492